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CLUB DE REVISTA
Annie Cannabal.
Cannabal.
Residente I de Oftalmología
Universidad del sinu
Asesor: Álvaro Pérez MD.
BACTERICIDAL EFFECT OF INTRAVITREAL LEVOFLOXACIN
IN AN EXPERIMENTAL MODEL OF ENDOPHTHALMITIS
Consuelo Ferrer, Alejandra Rodríguez, José L.
Abad, Joaquín FernándezFernández-Canillas and Jorge
L. Alio
►
1.Dpto. Biología Molecular, VISSUM, Instituto Oftalmológico de Alicante
► 2. Div. de Oftalmología, Facultad de Medicina,
► Universidad Miguel Hernández, Campus San Juan, Alicante, Spain.
British Journal of Ophthalmology.
Ophthalmology.
Published online 22 Jan 2008
Introduccion
la endoftalmitis es una rara pero catastrófica complicación de la
cirugia intraocular y las lesiones penetrantes. La administración
intravitrea de antibioticos es el pilar del tratamiento de esta entidad.
La penetracion intraocular por otras vías es pobre debida a la
influencia de de varios factores.
La primera linea de tartamiento intravitreo en la endoftalmitis es la
vancomicina para cubrir gram positivos, ceftazidima para gram
negativosrecientemente se a explorado la eficacia de las
fluoroquinilonas en el tratamiento de la endoftalmitis. La
levofloxacina ha tenido actividad en gram positivos y negativos (3-5)
3 Miller D, Alfonso EC. Comparative in vitro activity of levofloxacin, ofloxacin, and ciprofloxacin against ocular
streptococcal isolates. Cornea 2004;23:289-93.
5. Duggirala A, Joseph J, Sharma S et al. Activity of newer fluoroquinolones against gram-positive and gram-negative
bacteria isolated from ocular infections: an in vitro comparison. Indian J.Ophthalmol. 2007;55:15-9.
►
Estudios anteriores con levofloxacina al 0.5% en endoftalmitis fueron
positivos.
►
Yildirin y Cols evaluaron levofloxacina intravitrea en endoftalmitis por
S. epidermidis mostrando reduccion significativa frente al grupo de
control. (18)
►
No se evaluó la toxicidad de la levofloxacina a nivel intravitreo.
18. Yildirim O, Oz O, Aslan G et al. The efficacy of intravitreal levofloxacin and intravitreal dexamethasone in
experimental Staphylococcus epidermidis endophthalmitis. Ophthalmic Res. 2002;34:349-56.
Propósito
► Evaluar
la eficacia de la levofloxacina
intravitrea al 1.5% frente al tratamiento
combinado de vancomicina y ceftazidime en
un modelo experimental de endoftalmitis
bacteriana.
Materiales y Métodos
CEPAS Y CULTIVOS:
Staphilococus aureus CECT 239
Staphylococus epidermidis CECT 231
Pseudomona aeuriginosa
Inoculación en 10 ml thioglycolate broth
Incubado durante la noche a 150rpm y 37º C.
La preparación fue realizada en 10 diluciones,
sembrada en agar chocolate y agar sangre e incubada a 37ºC
hasta confirmar la concentración en UFC
Inoculacion intravitrea de:
200 UFC/100ul
40UFC/ 100ul
40.000 UFC/ 100ul
Pseudomona aeuriginosa
Staphilococus aureus
Staphylococus epidermidis
www.oftalmo.com/sco/revista-14/f15-01.jpg
MODELO EXPERIMENTAL DE ENDOFTALMITIS:
75 conejos de nueva zelandia, blancos, de diferente raza y
sexo, y de aproximados 2 kg.
Anestesia:
Ketamina 35mg/Kg (IM)
Xylazina 5 Mg / kg (IM)
Atropina IM 0,1 mg / kg (IM)
Tetracaine cloruro de 1 mg / ml tópico
Oxybuprocaine cloruro de 4 mg / ml tópico
Dilatación pupilar: tropicamide con el 1% y el 10% de
clorhidrato de fenilefrina.
Grupos de experimentacion
25 conejos
Staphilococus aureus
5 sin tratamiento
10 tratados con 0.1ml levofloxacina 1.5%
10 tratados con 0.1ml vancomicina 1% y
ceftazidime 2.2%
25 conejos
5 sin tratamiento
Staphylococus
epidermidis
10 tratados con 0.1ml vancomicina 1% y
ceftazidime 2.2%
25 conejos
5 sin tratamiento
Pseudomona
aeuriginosa
10 tratados con 0.1ml levofloxacina 1.5%
10 tratados con 0.1ml levofloxacina 1.5%
10 tratados con 0.1ml vancomicina 1% y
ceftazidime 2.2%
EVALUACION CLINICA:
Conjuntiva
0 = Normal
1 = leve edema
2 = Edema, hiperemia leve, ligero exudado
3 = Edema, hiperemia marcados, pesados exudado
Córnea
0 = Transparente
1 = Edema focal
2 = Edema difuso
3 = Opaco
Iris
0 = Normal
1 = leve hiperemia
2 = Marcada hiperemia
3 = Marcada hiperemia, sinequias, pupila irregular
Vítreo
0 = transparente
1 = Áreas de celularidad vitrea, detalles de fondo de ojo parcialmente
visibles, buen reflejo rojo
2 = moderada celularidad vitrea, detalles de fondo de ojo no visibles, reflejo
parcial
3 = no reflejo rojo
Calendario de toma de muestras
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►
1 º día:
2 º día:
inoculación bacteriana
extracción de 0.1ml de h. acuoso.
toma de muestra sin tratamiento
aplicación del tratamiento
3º día:
toma de muestra
5 ° y 8 ° día: toma de muestra
8º aplicación de euthanized T61®.
T61®.
Se aspiraron 0,1 ml de la cavidad vítrea media a través de
una aguja de calibre 21.
El material acuoso aspirado de la cámara anterior fue con
una aguja de calibre 30.
Las muestras fueron transportadas al laboratorio de
microbiología a 4 º C.
DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO:
MICROBIOLOGICO:
►
50 o 100 µ l de humor acuoso o vítreo fueron cultivados en
agar sangre Columbia (Biomeriux, Sa bioMérieux, Marcy L
` Etoile, Francia) o
agar chocolate (Biomeriux, Sa
bioMérieux, Marcy L Etoile, Francia) y cultivadas a 37 º C.
►
El crecimiento bacteriano se puso a prueba a las 24 y 48
horas contando las colonias y los resultados se expresaron
en UFC / ml
ml..
►
Si al 7 dia no hubo colonias se considero negativo
►
Se analizaron sólo los ojos que tenía un cultivo positivo en
algún momento durante el curso del tratamiento.
tratamiento.
►
La concentracion minima inhibitoria de la levofloxacina,
vancomicina y ceftazidima fueron
determinadas por
Etest® los rangos de concentraciones fueron de 0.002 a
32 mg/L
Análisis estadístico:
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►
Los análisis estadísticos se realizaron usando el SPSS de
Windows versión 11.0.1)
El modo de prueba ANOVA así como el Bonferroni fueron
usados para la medición de UFC en este estudio.
Resultados:
► No
se encontraron diferencias significativas
en el numero de UFC por ml de vítreo entre
los 3 grupos.
► La eficacia de los antibióticos se evaluó
después de las 24 horas a fin de determinar
el efecto en la población de bacterias para
vigilar su crecimiento.
► En
relación con el cuadro clínico, el 80% de
los conejos sin tratamiento mostró graves
signos de endoftalmitis después de 5 días:
► Leve hiperemia, edema corneal, hiperemia
del iris, celularidad vítrea, perdida del reflejo
rojo e hipopion.
Discusión:
►
►
El tratamiento con levofloxacina al 1,5% mostro reduccion
de signos clinicos para todas las cepas en correlación a los
ojos no tratados, pero no presento diferencias significativas
con los ojos que recibieron tratamiento con vancomicina
mas ceftazidima.
En los tres modelos de endoftalmitis ambos tratamientos
fueron eficaces, los estudios se estan llevando a cabo para
establecer el nivel de toxicidad de los levofloxacina
intravitrea. Hasta l afecha se ha informado que las dosis de
50, 100, 250 y 500 ug intravitreos en conejos no presentan
toxicidad retiniana (26)
26. Gurler B, Ozkul Y, Bitiren M et al. A study on the toxicity of intravitreal levofloxacin in rabbits. Curr.Eye Res.
2002;24:253-62.
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Este estudio se centro en la busqueda de alternativas
reales en el tratamiento de la endoftalmitis debido al hecho
que el espectro microbiologico y la suseptibilidad del
postoperatorio estan cambiando (20-21)
En estados unidos ha aumentado la insidencia de bacterias
gram positivas (21)
En europa aumento hasta del 38% de Streptococus.
En india se a reportado hasta el 38% se resistencia a la
ceftazidima (28)
20. Mollan SP, Gao A, Lockwood A et al. Postcataract endophthalmitis: incidence and microbial isolates in a United Kingdom
region from 1996 through 2004.J.Cataract Refract.Surg. 2007;33:265-8.
21. Recchia FM, Busbee BG, Pearlman RB et al. Changing trends in themicrobiologic aspects of postcataract
endophthalmitis. Arch.Ophthalmol. 2005;123:341-6.
28. Kunimoto DY, Das T, Sharma S et al. Microbiologic spectrum and susceptibilityof isolates: part I. Postoperative
endophthalmitis. Endophthalmitis ResearchGroup. Am.J.Ophthalmol. 1999;128:240-2.
Fotografía tomada el día tres, ojo con endoftalmitis por S. aureus
grado 3.
Fotografía tomada el día ocho, después del tratamiento con 1.5%
de Levofloxacina.