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Transcript
UNIVERSIDAD DE LA REPÚBLICA
FACULTAD DE CIENCIAS
VIROLOGÍA
Carga horaria:
Total: 84 hs.
Teórico: 34 hs.
Práctico: 30 hs.
Seminario: 20 hs.
Objetivos:
1) Introducir al estudiante de Bioquímica y Biología en los aspectos básicos y
aplicados de la Virología.
2) Promover una actitud crítica durante el curso que le permita al estudiante discutir
los problemas planteados.
3) Destacar la importancia de esta disciplina en el momento científico actual y su
utilización en otras áreas, lo que ha permitido un desarrollo del conocimiento
científico
Temario
PROGRAMA TEÓRICO
1. Introducción. Principales características de los virus para ser considerados seres vivos.
Diferencias con otros agentes infecciosos. Principios de taxonomía viral.
2. Morfología y estructura viral. Concepto de Virión, viroides y priones.
3. Relación virus célula. Receptores: células permisivas y no permisivas, interacciones con
los aparatos de transcripción y traducción celular. Tipos de infección.
4. Multiplicación viral. Etapas fundamentales de la multiplicación. Diferentes estrategias de
replicación del ácido nucleico.
5. Mecanismo de interferencia de la multiplicación viral. Interferón. Interferencia
intrínseca. Inhibición química.
6. Genética de virus. Ciclo lítico y lisogénico. Mutaciones. Complementación.
Recombinación. Reordenamiento.
7. Virus vegetales
8. Viroides
9. Evolución viral. Teorías sobre el origen de los virus. Factores que afectan la evolución de
virus ADN y ARN. Concepto de cuasiespecie. Variabilidad antigénica y genética.
10. Inmunología viral. Sistema inmune. Anticuerpos, antígenos. Relación antígenoanticuerpo. Respuesta humoral y celular.
11. Transformación celular por virus. Conceptos generales. Propiedades de las células
transformadas. Mecanismos de transformación celular por Retrovirus y por virus ADN
tumorales.
12. Clasificación de los virus. Principales grupos de virus ADN y ARN, su biología e
importancia.
13. Genética molecular de virus. Expresión de genes virales en sistemas heterólogos.
Expresión de genes virales en células de mamíferos: transfección, expresión transitoria.
Genomas virales como vectores de genes para expresión: Baculovirus, Vaccinia,
Retrovirus, Herpes.
14. Diagnóstico virológico. Bioseguridad. Obtención de la muestra clínica. Métodos
rápidos y directos. Métodos serológicos. Biología molecular como herramienta de las
técnicas de diagnóstico, principales técnicas.
15. Caracterización molecular de los componentes virales. Proteínas virales. Análisis
electroforético. Digestión enzimática de proteínas y análisis de proteínas. Acidos nucleicos.
Hibridación de ácidos nucleicos. Finger printing. PCR. Métodos de secuenciación.
Bibliografía
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Robert G.l Webster, Alan Granoff. Encyclopedy of Virology. Volúmenes 1, 2 y 3.
Academic Press. DISPONIBLE EN BIBLIOTECA.
Bermard Fields, David Knipe. Virology. Volúmenes 1 y 2. Raven Press. New York.
DISPONIBLE EN BIBLIOTECA
E. Domingo. Virus en evolución. Eudema Biologia. España.
E. Domingo, R. Webster, J. Holland. Origin and evolution of viruses. Academic
Press.
Influenza B virus evolution, cocirculating linages and comparison of evolutionary
pattern with those of Influenza A and C viruses. Yamashita M., Kristal M., Fitch W.
and Palese P. Virology, 1988; 163: 112 - 122
PROGRAMA PRÁCTICO
1. El laboratorio de Virología. Reconocimiento de principales equipos para trabajar en
virología. Introducción teórica.
2. Sustratos biológicos. Cultivos celulares. Medios de cultivo. Conservación de células.
Preparación de cultivos celulares de línea.
3. Técnicas de aislamiento viral en cultivos preparados y huevos embrionados.
4. Identificación de virus. Observación de efecto citopático (ECP) producido por diferentes
virus. Técnicas inmunoenzimáticas: ELISA e inmunofluorescencia. Hemadsorción.
5. Titulación de virus. Técnica de hemoaglutinación (modelo Influenza). Ensayo de plaqueo
viral. Otros métodos de titulación.
6. Análisis molecular de los componentes virales: proteínas. Preparación de un extracto
celular infectado con un virus. Análisis de las proteínas virales.
7. Análisis molecular de los componentes virales: ácidos nucleicos.
7.1 Extracción de ARN viral y análisis en gel de agarosa (Modelo Rotavirus).
7.2 Extracción de ADN viral, ensayo con enzimas de restricción y su análisis en gel de
agarosa, tinción con bromuro de Etidio. (Modelo Adenovirus)
7.3 Técnica de PCR para amplificar genomas virales a partir de ARN vira
Material de apoyo
Carpeta de trabajos prácticos preparada por docentes de la Sección Virología. Facultad de
Ciencias.
SEMINARIOS
Se realizarán seminarios sobre temas de las clases teóricas. En cada actividad de seminario
se discuten tres trabajos de investigación o de revisión publicados en revistas científicas.
(10 clases)
Bibliografía
Los artículos de revistas científicas son seleccionados por los docentes de la Sección cada
año para su actualización.
Evaluación del curso
El curso se aprobará por un examen final con un mínimo de 3 (RRR) de calificación, que
podrá consistir en preguntas y/o problemas sobre los teóricos dictados, los trabajos
científicos utilizados en los seminarios y las actividades desarrolladas en el práctico.
Régimen de ganancia del curso
Participación obligatoria en los seminarios que la Sección le indique a cada estudiante y
asistencia obligatoria en los prácticos, así como aprobación de una prueba de evaluación de
los mismos, que se realizará al finalizar la actividad práctica, con una etapa de recuperación.
Si el estudiante perdiera dicha evaluación perderá el curso aunque hubiera participado en la
actividad de seminario.