Download unidad ii: el reconocimiento del antigeno

ANEXO I
1.
CARRERA/DIPLOMA: Lic. en Biotecnología
2.
AÑO / CUATRIMESTRE: 2010 / Primer y segundo cuatrimestres
3.
NOMBRE DE LA ASIGNATURA: Inmunología
4.
NOMBRE DEL PROFESOR: Graciela Glikmann
5.
NÚCLEO AL QUE PERTENECE LA ASIGNATURA: Orientación
6.
AREA DE CONOCIMIENTO: Microbiología e Inmunología
7.
TIPO DE ASIGNATURA: Teórico-experimental
8.
CRÉDITOS: 16
9.
CARGA HORARIA TOTAL: 144
10. PROGRAMA ANALÍTICO
PROGRAMA TEÓRICO
UNIDAD I: INTRODUCCION A LA INMUNOLOGIA E INMUNIDAD INNATA
CONCEPTOS BÁSICOS EN INMUNOLOGÍA
Los componentes del sistema inmune. Principios de la inmunidad innata y adaptativa. El
reconocimiento y los mecanismos efectores de la inmunidad adaptativa.
INMUNIDAD INNATA
Defensas del huésped. Patrones de reconocimiento de la inmunidad innata. El sistema del
complemento. Respuestas innatas inducidas por la infección.
UNIDAD II: EL RECONOCIMIENTO DEL ANTIGENO
RECONOCIMIENTO ANTIGÉNICO POR LOS RECEPTORES DE LAS CÉLULAS B Y T
Estructura de la molécula de anticuerpo. Interacción de la molécula de anticuerpo con el antígeno
específico. Reconocimiento por la célula T.
GENERACIÓN DE LOS RECEPTORES DE LOS LINFOCITOS
Generación de la diversidad de inmunoglobulinas. Rearreglo génico del receptor de la célula T.
Variación estructural en las regiones constantes de las inmunoglobulinas.
PRESENTACIÓN ANTIGÉNICA A LOS LINFOCITOS T
Generación de los ligandos del receptor T. El complejo mayor de histocompatibilidad y sus
funciones.
UNIDAD III: EL DESARROLLO DE LINFOCITOS
DESARROLLO Y SUPERVIVENCIA DE LOS LINFOCITOS
Generación de los linfocitos en la médula ósea y el timo. Rearreglo de los segmentos génicos del
receptor antigénico y su relación con el control del desarrollo. Interacción con antígenos propios y su
relación con la supervivencia o eliminación de los linfocitos. Supervivencia y maduración de los
linfocitos en los tejidos linfoides periféricos.
UNIDAD IV: LA RESPUESTA INMUNE ADAPTATIVA
INMUNIDAD MEDIADA POR CÉLULAS T
Producción de células T efectoras. Propiedades generales de las células T efectoras. Citotoxicidad
mediada por células T. Activación de macrófagos por células CD4 T H1. Linfocitos TH17, TH22 y
regulatorios.
LA RESPUESTA INMUNE HUMORAL
Activación de células B por células T helper activadas. Distribución y funciones de los diferentes
isotipos de inmunoglobulinas. Destrucción de patógenos recubiertos por anticuerpos mediada por
receptores Fc.
INMUNIDAD ADAPTATIVA FRENTE A LA INFECCIÓN
Los diferentes agentes infecciosos y los mecanismos de enfermedad. El curso de la respuesta
adaptativa. Sistema inmune de mucosas. Memoria inmunológica.
UNIDAD V: EL SISTEMA INMUNE EN LA SALUD Y LA ENFERMEDAD
MANIPULACIÓN DE LA RESPUESTA INMUNE
Manipulación de la respuesta contra las infecciones (vacunas). Regulación de la respuesta
inmunológica.
FALLAS EN LOS MECANISMOS DE DEFENSA DEL HUÉSPED
Evasión de los mecanismos de defensa normales. Síndrome de inmunodeficiencia adquirida.
ALERGIA E HIPERSENSIBILIDAD
Sensibilización y producción de IgE. Mecanismos efectores de las reacciones alérgicas.
Hipersensibilidad.
AUTOINMUNIDAD Y TRANSPLANTES
Naturaleza de las respuesta a antígenos propios. Mecanismos de tolerancia. Base genética y
ambiental de la autoinmunidad. Mecanismos de patogénesis. Respuesta a aloantígenos y rechazo a
los transplantes.
PROGRAMA PRÁCTICO
INMUNIZACION Y PRODUCCION DE ANTICUERPOS
OBTENCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE ANTICUERPOS POLICLONALES
Principios de la inmunización. Conceptos de antígeno y hapteno. Efecto de la dosis de antígeno y
ruta de inmunización. Tipos de adyuvantes. Etapas del proceso de inmunización. Respuestas
primaria y secundaria. Animales de laboratorio. Protocolos de inmunización. Caracterización de la
respuesta policlonal. Especificidad y reacción cruzada.
OBTENCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE ANTICUERPOS MONOCLONALES
Fundamentos del proceso de obtención de anticuerpos monoclonales. Semejanzas y diferencias con
los anticuerpos policlonales. Etapas. Protocolos de inmunización. Células de mieloma. Técnicas de
fusión y selección de híbridos. Clonación y conservación. Caracterización de los anticuerpos.
Importancia y aplicaciones de los anticuerpos monoclonales. Anticuerpos quiméricos y humanizados.
Obtención de fragmentos Fv y scFv. Bibliotecas de expresión en fagos y otras técnicas alternativas.
PURIFICACION DE ANTICUERPOS
PURIFICACIÓN DE ANTICUERPOS MEDIANTE CROMATOGRAFÍA DE AFINIDAD
Purificación de anticuerpos mediante cromatografía con Proteína G. Evaluación de los resultados
mediante el método de Bradford, SDS-PAGE y ELISA indirecto. Principios de la purificación de
anticuerpos de isotipo M. Criterios para la selección de diferentes tipos de cromatografías.
PURIFICACIÓN DE ANTICUERPOS MEDIANTE CROMATOGRAFÍA DE INTERCAMBIO IÓNICO
Purificación de anticuerpos mediante cromatografía con DEAE. Evaluación de los resultados
mediante el método de Bradford, SDS-PAGE y ELISA indirecto. Comparación de los métodos de
purificación. Criterios para la selección de diferentes tipos de cromatografías.
DETECCION, MEDICION Y CARACTERIZACION DE LA RESPUESTA DE ANTICUERPOS
REACCIONES DE PRECIPITACIÓN Y AGLUTINACIÓN
Precipitación en medios líquidos y en medios gelosados. Fundamentos y aplicaciones. Difusión
simple. Doble difusión bidimensional. Difusión radial. Inmunoelectroforesis. Aplicaciones en el
diagnóstico clínico. Fundamentos de la aglutinación. Aplicaciones. Reacciones de aglutinación.
Tipificación de los diferentes grupos sanguíneos. Test de Coombs y detección de la incompatibilidad
Rh.
DETECCIÓN DE ANTÍGENOS Y ANTICUERPOS POR ELISA
Equilibrio de la interacción antígeno-anticuerpo. Concepto de afinidad. Utilización de técnicas de
ELISA para la detección de antígenos y anticuerpos. Distintas metodologías. Ensayos competitivos y
no competitivos. Diferencias con el Radioinmunoensayo (RIA).
Ensayos de ELISA de captura para la detección de anticuerpos de fase aguda. ELISA indirecto para
la detección de anticuerpos de isotipo G. Ensayos de ELISA para detección de antígenos. Ventajas y
desventajas de cada inmunoensayo. Evaluación de los diferentes parámetros que afectan los
resultados. Aplicaciones en el laboratorio de investigación y en el de diagnóstico clínico.
DETECCIÓN DE ANTÍGENOS Y ANTICUERPOS POR WESTERN BLOT
SDS-PAGE, transferencia y revelado. Evaluación de los diferentes parámetros que afectan los
resultados. Aplicaciones en el laboratorio de investigación y en el de diagnóstico clínico.
DETECCIÓN DE ANTÍGENOS Y ANTICUERPOS POR INMUNOFLUORESCENCIA
Inmunofluorescencia directa e indirecta. Principales patologías autoinmunes. Características de la
técnica. Formatos alternativos. Aplicaciones al diagnóstico.
AISLAMIENTO Y CARACTERIZACION DE LINFOCITOS
AISLAMIENTO DE CÉLULAS MONONUCLEARES E INMUNOTIPIFICACIÓN DE SUBPOBLACIONES LINFOCITARIAS
Aislamiento de células mononucleares. Marcación con anticuerpos monoclonales. Aplicaciones de
técnica en el diagnóstico clínico. Técnicas alternativas: Citometría de flujo y separación con
partículas magnéticas recubiertas de anticuerpos. Caracterización de poblaciones celulares
mediante citometría de flujo. Evaluación de resultados. Aplicaciones.
CARACTERIZACIÓN DE LA ESPECIFICIDAD, FRECUENCIA Y FUNCIÓN DE LOS LINFOCITOS
Cultivo por dilución terminal. ELISPOT. Identificación de subpoblaciones T mediante detección de
citoquinas. Identificación de la especificidad del receptor de células T mediante tetrámeros MHCpéptido.
11. BIBLIOGRAFÍA OBLIGATORIA:
Kuby Immunology. Sixth Edition. T.J. Kindt, R.A. Goldsby, B.A. Osborne. W.H. Freeman and
Company. New York. 2007.
Janeway´s Immunobiology. K.M. Murphy, P. Travers, M. Walport. Garland Science. London, UK.
2007.
12. BIBLIOGRAFIA DE CONSULTA:
Cellular and molecular immunology. Fifth Edition. A.K. Abbas, A.H. Lichtman, D.L. Baker, A.
Baker. Saunders, 2003.
Immunology. Sixth Edition. I.M. Roitt, J. Brostoff, D. Male. Blackwell, 2001.
Inmunología e inmunoquímica: fundamentos. R.A. Margni. Panamericana, 1996.
Introducción a la inmunología humana. Novena Edición. L. Fainboim, L.M. Satz, J. Geffner. 1999.
Advanced immunology. Third Edition. D. Male, A. Cooke, M. Owen, J. Trowsdale, B. Champion.
Mosby, 1996.
Principles of cellular and molecular immunology. J.M. Austyn, K.J. Wood. Oxford Univ Press,
1993.
Immunoassays. First Edition. E.P. Diamandis, T.H. Christopoulos. Academic Press, 1996.
Monoclonal antibodies: principles and practice. Third Edition. J.W. Goding. Academic Press,
1996.
Antibodies: a laboratory manual. E. Harlow, D. Lane. Cold Spring Harbor Laboratory, 1988.
Essentials of Mucosal Immunology. M.F. Kagnoff, H. Kiyono (eds.). Academic Press, 1996.
Immunochemical Techniques. Laboratory manual. J. Goers. Academic Press, 1993.
Bioconjugate Techniques. G.T. Hermanson. Academic Press, 1996.
Immunochemistry in Practice. Third Edition. A. Johnstone, R. Thorpe. Blackwell Science, 1996.
Antibody techniques. V.S. Malik, Lillehoj E.P. Academic Press, 1994.
The thymus. Ritter M.A., Crispe I.N. IRL Press, 1992.
Immunology: a comparative approach. R.J. Turner. John Wiley & Sons, 1994.