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Transcript
Seminario aminoácidos, proteínas y enzima - 2014
Respondan en grupo las siguientes consignas y envíen como archivo adjunto UNA SOLA
COPIA POR GRUPO al correo de la cátedra [email protected]
En la casilla ASUNTO consignar tema del Seminario y apellidos+ iniciales del nombre de
los integrantes del grupo (ej: seminario bioelem. Benitez JC, Sandoval TS,Torres LA.)
Fecha límite de recepción del trabajo: miércoles 16 de abril a las 18 HS
Integrantes: PONER LOS NOMBRES DE LOS
INTEGRANTES DEL GRUPO
Criterios de evaluación:
El trabajo práctico se considerará aprobado si tiene 6 o más respuestas correctas
CADA RESPUESTA CORRECTA VALE 0,5 PTO.
Grilla de respuestas
Ejercicio 1
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
a
b
c
d
e
Ejercicio
Respuesta
2a
2b
3
4a
4b
4c
4d
4e
4f
4g
1
1 Seleccione LA afirmación correcta de cada una de las siguientes consignas.
(Marque su respuesta en la grilla que se encuentra al inicio de este documento.)
1. La unión peptídica
a) Es un tipo especial de unión ester
b) Posee un carácter parcial de doble ligadura
c) Está ionizada a pH fisiológico
d) Se rompe por agentes que desnaturalizan proteínas , tales como solventes orgánicos
o altas concecntraciones de urea.
e) a pH 7 presenta carga negativa
2. El péptido alanil-glicil- serina
a) Contiene alanina con un grupo alfa –amino libre
b) Contiene tres enlaces peptídicos
c) No es opticamente activo.
d) Contiene alanina con un grupo carbono terminal
e) Contiene un aminoácido aromático
3. El
a)
b)
c)
d)
e)
comportamiento anfótero de los aa se refiere a .
el pH que exista en una disolución acuosa determina su ionización
el pH que exista en una disolución acuosa determina su actividad óptica
el pH impide que se solubilicen en una disolución acuosa
el pH en el cual la carga neta del aminoácido es cero
el pH en el cual tiene máxima solubilidad
4. Planaridad y rotación de enlaces en el enlace peptídico:
a) El enlace C-N del agrupamiento amídico posee cierto carácter de doble enlace.
b) Existe libre rotación sobre el eje del enlace carbono-nitrógeno.
c) No existe libre rotación de los enlaces que unen los grupos CO y NH del enlace
d) Los 4 átomos del enlace peptídico son los únicos que se sitúan en el mismo plano.
e) La orientación geométrica de los átomos de O e H en el enlace peptídico es de tipo
cis.
5. Las albúminas son:
a) Globulinas.
b) Nucleoproteínas.
c) Proteínas conjugadas.
d) Proteínas simples.
e) Histonas.
6. Indicar cuál, entre las siguientes relaciones, es incorrecta:
a) Ovoalbúmina - proteína de reserva en aves.
b) Elastina - proteína estructural.
2
c) Insulina - proteína hormonal.
d) Inmunoglobulina G - proteína de defensa.
e) Caseína - enzima.
7. Las albúminas son:
a) Globulinas.
b) Nucleoproteínas.
c) Proteínas conjugadas.
d) Proteínas simples.
e) Histonas.
8. Las proteínas:
a) Cuando se hidrolizan, la estructura primaria no se afecta.
b) No se pueden cristalizar.
c) No poseen una conformación molecular específica.
d) Al hidrolizarse por medios proteolíticos, se produce la racemización de sus
aminoácidos.
e) Nada de lo anterior es cierto.
9. La estructura terciaria de una proteína puede estabilizarse por fuerzas tales como:
a) Atracción electrostática entre cadenas laterales de aminoácidos con grupos
cargados.
b) Puentes de hidrógeno entre cadenas laterales de aminoácidos ácidos y alcohólicos.
c) Enlaces por puentes de hidrógeno entre enlaces peptídicos.
d) Interacciones hidrófobas entre cadenas laterales no polares.
e) Todas las anteriores.
10. ¿Cuál de las siguientes afirmaciones sobre la estructura de las proteínas no es
correcta?:
a) En las proteínas solubles, las cadenas hidrófobas laterales de los aminoácidos se
encuentran frecuentemente expuestas al medio acuoso.
b) Los puentes disulfuro tienen gran importancia en el mantenimiento de la estructura
tridimensional de las proteínas.
c) La estructura primaria determina las estructuras de orden superior de las proteínas.
d) El plegamiento de una proteína es un proceso cooperativo al que contribuyen
multitud de interacciones de distinta naturaleza.
e) Los residuos de tirosina y asparragina pueden establecer interacciones por puentes
de hidrógeno entre sí.
2 De la lectura del resumen transcripto a continuación extraiga las respuestas a las
siguientes preguntas: (Indique su respuesta en la grilla que se encuentra al inicio
de este documento)
a) Teniendo en cuenta el valor de Km es un marcador de la afinidad de la enzima por su
sustrato. Cuál de las dos enzimas descriptas mostró mayor afinidad por el sustrato?
3
b) Analizando los valores de Vmax de ambas enzimas. Cuál de las dos se necesitará en
menor cantidad para lograr la saturación el sustrato?
Manzanares, P., Van den Broeck, H.C., De Graaff, L.H. and Visser, J.
Purificación y caracterización de dos alfa-L-ramnosidasas, RhaA y RhaB del Aspergillus
aculeatus. Applied and Environmental Microbiology. 67(5), 2230-2234 (2001).
Resumen: Dos proteínas con actividad de alfa-L-rhamnosidasas, RhaA y RhaB, se
identificaron a partir del fraccionamiento y purificación de un filtrado del cultivo de
Aspergillus aculeatus crecido sobre hespiridina. Ambas proteínas, resultan N - glicosiladas y
presentan masas moleculares de 92 y 85 kDa, donde el 24 y 15%, fueron aportados por
carbohidratados. RhaA y RhaB, son ópticamente activas a pH comprendidos entre los valores
4,5 a 5, mostraron valores de Km y Vmax de 2,8 mM y 24 U/mg (RhaA) y 0,30 mM y 14
U/mg (RhaB) cuando se testean frente a un p-nitrofenil- -L-rhamnopyranosido. Ambas
fueron capaces de hidrolizar enlaces del tipo alfa -1,2 y alfa 1,6 de -D-glucósidos.
Utilizando anticuerpos policlonales, pudo clonarse el cDNA correspondientes de ambas  L-rhamnosidasas, rhaA y rhaB. Sobre la base de las secuencias de aminoácidos derivados de
los cDNA clonados, pudo concluirse que ambas proteínas son altamente homólogas (60% de
identidad).
3 Interpretación de gráficos
GRÁFICO 3
El gráfico 3 ilustra las energías de activación de una determinada reacción en presencia
y ausencia de una enzima. Cuál es el color (rojo o azul) que grafica el curso de la
reacción en presencia de la enzima? (Escriba su respuesta en el cuadro que se
encuentra al inicio de este documento.
4
4 Observe las siguientes reacciones. A qué clase de enzimas pertenecen las que
intervienen en ellas? (Indique su respuesta en la grilla que se encuentra al inicio de
este documento)
a)
b)
c)
5
d)
e)
f)
g)
6