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Naringinasa
Por: J. Andrés Guadarrama Villarreal
Propiedades
• Complejo enzimático. (2007)
• α-Rhamnosidasa y flavonoide-βglucosidasa
• Anteriormente se pensaba que contaba
con 2 sitios activos. (2000)
Propiedades
• 100 a 500 kDa
• Extracelular en la mayoría de los
microorganismos estudiados
• Estable a pH entre 3.0 y 7 (ácidos)
aunque depende de la fuente.
Propiedades
• Estable hasta los 40 °C aunque depende
en gran manera del microorganismo que
la produce.
• Enzima inmovilizada considerablemente
más estable (hasta 57°C).
• Enzima inmovilizada presenta estabilidad
en algunos solventes orgánicos
Propiedades
Estructura
α-Rhamnosidasa (Bacillus sp. GL1)
a) Vista frontal
a) Vista lateral
Estructura
• 5 dominios
•
•
•
•
•
N: Dominio terminal
D1: 6 α helices
D2: 13 β plegadas
A: Barril (α/ α)6 (el más grande)
C: 7 β plegadas
Dominios
Complejo enzima
inhibidor
Ki=1.8mM
Sitio catalítico
Km=2.8mM
Fuente de obtención
• Historicamente aislada de semillas de
apío u hojas de toronja.
• Naringinasa microbiana único proceso
práctico por razones de disponibilidad.
Microorganismos
Cultivo sumergido
-Represión de la
producción de enzima por
glucosa
-Concentraciones altas de
carbohidrato también
reprime producción
-Balancear crecimiento
con producción de la
enzima
Cultivo sumergido
-Enzima
inducible
Aplicaciones
• Preparación de cloropoliesporina C
• Producción de rhamnosa
• Preparación de prunina
• Mejoramiento del aroma en vinos
• Transformación de esteroides
Reducción del
sabor amargo
- Naringenina estiene un tercio del amargor
de la naringina.
- Prunina tiene aún menos por lo que se
desea solo la primera hidrólisis.
Reducción del
sabor amargo
- Se utilizan enzimas inmobilizadas
normalmente de A. Niger o de Penicilllium
sp.
- Penicillium sp. Ofrce la ventaja de una alta
actividad rhamnosidasa y una baja
actividad glucosidasa por lo que es más
recomendable.
Referencias
-Busto, Meza, Ortega; Immobilization of naringinase from Aspergillus niger
CECT 2088 in poly(vinyl alcohol) cryogels for the debittering of juices; Foode
Chemistry; 2006
-Puri, Banerjee; Optimization of process parameters for the production of
naringinase by Aspergillus niger MTCC 1344; Process Biochemistry; 2003
-Puri, Banerjee; Production, purification, and characterization of the debittering
enzyme naringinase, Biotechnology Advances 18 (207-217) ; 2000)
-Cui, Maruyama, Crystal Structure of Glycoside Hydrolase Family 78 α-LRhamnosidase from Bacillus sp. GL1; Journal of Molecular Biology 374 (384396) ; 2007
-Vila-Real, Alfaia; Pressure-enhanced activity and stability of -l-rhamnosidase
and d-glucosidase activities expressed by naringinase; Journal of molecular
catalysis B: Enzymatic; 2010
-BRENDA Enzymatic information system