Download Congreso Nacional del XIV Verano de la Investigación Científica del

XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico
PARTICIPACIÓN DE LA PROTEÍNA A (SpA) EN LA INTERNALIZACIÓN DE Staphylococcus
aureus EN CÉLULAS ENDOTELIALES DE BOVINO
Diana Angélica Martínez Valencia. Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo,
[email protected]. Asesor: Dr. Javier Oviedo Boyso. Universidad Michoacana de San
Nicolás de Hidalgo, [email protected]
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
Staphylococcus aureus es una bacteria Gram (+), considerada como una bacteria
patógena oportunista que es habitual en un amplio número de hospederos. En
Medicina Veterinaria se ha encontrado que S. aureus es la principal causa de la
mastitis bovina; provocando una pérdida de entre el 10 y el 30 % de la producción
del animal en una lactación. La mastitis causada por S. aureus tiende a ser una
infección subclínica y crónica, con baja respuesta al tratamiento con antibióticos
convencionales, probablemente debido a su localización intracelular. Se ha
reportado que la proteína A de S. aureus (SpA), es una proteína que juega un
papel importante en la fagocitosis de esta bacteria por los fagocitos profesionales.
Sin embargo, a la fecha no se ha estudiado su participación en la internalización
de S. aureus en células fagocíticas no profesionales, como las células
endoteliales. El desarrollo del presente trabajo permitirá conocer los mecanismos
moleculares involucrados en la internalización de S. aureus en las células
hospederas y podría ayudar al desarrollo de nuevas estrategias de tratamiento
para las patologías causadas por esta bacteria.
METODOLOGÍA
En el presente trabajo se utilizan cuatro cepas de S. aureus: ATCC 27543, 2158
tipo silvestre, la mutante 2309 que no expresa proteína A y 2306 que sobreexpresa proteína A. Se utiliza un modelo de infección in vitro con células
endoteliales de bovino (CEB). Como primer paso se determinó una cinética de
crecimiento para definir el punto de crecimiento bacteriano óptimo para realizar los
ensayos de infección. Enseguida se han estado realizando ensayos de
internalización con las cuatro cepas antes mencionadas, de acuerdo al protocolo
establecido en el laboratorio del Dr. Oviedo-Boyso. Los niveles de internalización
de cada cepa se obtienen calculando el coeficiente del número de células
endoteliales entre el número de Unidades Formadoras de Colonia (CEB/UFC). El
conteo del número de CEB se realiza en una cámara de Neubauer y el número de
UFC mediante la técnica de conteo en placa.
CONCLUSIONES
Los resultados obtenidos hasta el momento, han demostrado que la bacteria que
no expresa proteína A tiene un coeficiente de internalización menor, comparándolo
con las cepas que sí la expresan. Esto sugiere que SpA juega un papel importante
en la internalización de S. aureus en fagocitos no profesionales. Enseguida se
analizarán los mecanismos moleculares mediante los cuales SpA modula la
internalización de S. aureus.
© Programa Interinstitucional para el Fortalecimiento de la Investigación y el Posgrado del
Pacífico
Agosto 2014