Download Get cached
Document related concepts
Transcript
UNIVERSIDAD VERACRUZANA MANUAL DE DIAGNÓSTICO DE GESTACIÓN EN HEMBRAS BOVINAS A TRAVÉS DE PALPACIÓN FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA TRANSRECTAL Y ULTRASONOGRAFÍA. TRABAJO RECEPCIONAL EN LA MODALIDAD DE: TRABAJO PRÁCTICO EDUCATIVO COMO REQUISITO PARCIAL PARA OBTENER EL TÍTULO DE MÉDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA PRESENTA: DANIELA LOEZA DELOYA ASESOR: DR. FELIPE MONTIEL PALACIOS VERACRUZ, VER. FEBRERO 2012 1 INDICE GENERAL AGRADECIMIENTOS………………………………………………………………….II DEDICATORIA………………………………………………………………………...III INTRODUCCCION ……………………………….................................................IV ANTECEDENTES ……………………………………………………………………VI JUSTIFICACION……………………………………………………………………….X OBJETIVOS……………………………………………………………………………XI MATERIAL Y METODOS……………………………………………………………XII INDICE DE CUADROS ............................................................................................8 CAPÍTULO 1: ANATOMÍA Y FISIOLOGÍA REPRODUCTIVA DE LA HEMBRA BOVINA....................................................................................................................9 1.1ÓRGANOS GENITALES DE LA VACA. ........................................................18 1.1.1. GENITALES EXTERNOS. ........................................................................19 1.1.1.2. Vestíbulo. ...............................................................................................19 1.1.1.3 Vulva. ......................................................................................................19 1.1.2.ÓRGANOS GENITALES INTERNOS. .......................................................21 1.1.2.1 Vagina.....................................................................................................21 1.1.2.2 Cérvix......................................................................................................21 1.1.2.3. Útero. .....................................................................................................22 1.1.2.4: Oviductos. ..............................................................................................26 1.1.2.5: Ovarios...................................................................................................30 1.2: CICLO ESTRUAL. .......................................................................................32 1.2.1: Fase folicular.............................................................................................33 1.2.2: Desarrollo folicular. ...................................................................................36 1.2.3: Fase lútea. ................................................................................................42 2 CAPITULO 2: GESTACIÓN. ..................................................................................45 2.1 OVULACIÓN. ................................................................................................45 2.2 FECUNDACIÓN............................................................................................46 2.3 PERIODOS DE GESTACIÓN. ......................................................................47 2.3.1 Periodo progestativo. .................................................................................47 2.4 DESARROLLO DE LAS MEMBRANAS EMBRIONARIAS Y FETALES Y DE LA PLACENTA..............................................................................................48 2.4.1Desarrollo de la alantoides. ........................................................................50 2.4.2 Desarrollo del amnios y del cordón umbilical. ............................................51 2.4.3 Líquidos fetales..........................................................................................53 2.5 PLACENTOMAS. ..........................................................................................53 CAPÍTULO 3: DIAGNÓSTICO DE GESTACIÓN. ..................................................54 3.1 INTRODUCCIÓN. .........................................................................................54 3.2 ASPECTOS DE IMPORTANCIA PREVIOS AL DIAGNÓSTICO DE GESTACIÓN. ......................................................................................................55 CAPITULO 4: DIAGNÓSTICO DE GESTACION POR ULTRASONOGRAFÍA. .....57 4.1 INTRODUCCIÓN. .........................................................................................57 4.2 Principios básicos de la ultrasonografía........................................................59 4.2.1 Tipos de ecógrafos. ...................................................................................61 4.3 Modo de utilización del ecógrafo...................................................................63 4.4 EXAMEN ULTRASONOGRÁFICO DEL SISTEMA REPRODUCTOR..........64 4.4.1 Ultrasonografía del Útero ..........................................................................64 4.4.2 Ultrasonografía de los folículos ováricos. ..................................................65 4.4.3 Ultrasonografía del cuerpo lúteo. ...............................................................67 4.4.4 Diagnostico de gestación por ultrasonografía. ...........................................67 3 CAPITULO 5: DIAGNÓSTICO DE GESTACIÓN POR PALPACIÓN TRANSTRANSRECTAL .........................................................................................79 5.1 INTRODUCCIÓN ..........................................................................................79 5.2 SIGNOS POSITIVOS DE PREÑEZ. .............................................................79 5.3 PROCEDIMIENTO........................................................................................81 5.4 DIAGNÓSTICO DE GESTACIÓN TEMPRANA. ...........................................84 5.5 HALLAZGOS A LA PALPACIÓN TRANSRECTAL DURANTE LA GESTACIÓN. ......................................................................................................86 6.1 INTRODUCCIÓN. .........................................................................................99 6.2 REGISTROS REPRODUCTIVOS.................................................................99 6.3 PARÁMETROS REPRODUCTIVOS...........................................................102 CONCLUSIONES ................................................................................................102 LITERATURA CITADA .........................................................................................103 4 INDICE DE FIGURAS Figura 1. Vulva de una Vaca en Estro....................................................................11 Figura 2. Aparato reproductor de la hembra bovina.. .............................................13 Figura 3. División del útero.....................................................................................14 Figura 4 Útero nulíparo de novilla virgen ..............................................................17 Figura 5.- Útero no gestante de hembra bovina .....................................................17 Figura 6. Estructuras que conforman el oviducto. ..................................................18 Figura 7.- Oviducto Disecado.................................................................................20 Figura 8.- Ovarios Inactivos durante anestro (1999) ..............................................24 Figura 9. Eventos alternos que pueden ocurrir durante el ciclo estrual..................24 Figura 10. A. Ovario con un folículo dominante. B. Corte transversal de un cuerno uterino. .......................................................................................................32 Figura 11. Múltiples folículos en ambos ovarios como en una vaca o novilla durante el proceso de superovulación. Bartolome J (2006) ...................................32 Figura 12. Regulación hormonal del ciclo estrual...................................................36 Figura 13.Calcificación Normal del corion ..............................................................41 Figuras 14.Placas epiteliales normales en el lado fetal del amnios. ......................43 Figura 15. Clasificación de técnicas de diagnostico de gestación..........................46 Figura 16. Entrada del transductor vía transrectal.. ...............................................50 Figura 17 y 18. Imágenes del tipo lineal y piramidal .............................................52 Figura 19 Ejemplo de dos tipos diferentes de ultrasonógrafos...........................53 Figura 20.Realización de evaluación reproductiva con ultrasonógrafo de transductor lineal. ...................................................................................................53 Figura 21. Ovarios en el Día 0 del Ciclo Estral. .....................................................57 Figura 22. Gestación de 21 Días............................................................................59 Figura 23. Gestación de 28 Días............................................................................61 5 Figura 24. Gestación de 29 Días. .........................................................................62 Figura 25. Gestación de 31 Días............................................................................62 Figura 26. Gestación de 31 Días / Útero ................................................................63 Figura 27. Gestación de 35 días. ..........................................................................63 Figura 28. Gestación de 40 días. ...........................................................................64 Figura 29. Gestación de 41 Días............................................................................64 Figura 30. Gestación de 45 Días............................................................................65 Figura 31. Gestación de 54 Días............................................................................65 Figura 32. Gestación de 60-días ............................................................................66 Figura 33. Gestación de 68 días con una vista longitudinal de la cabeza. .............66 Figura 34. Cabeza Fetal - 71 Días. ........................................................................67 Figura 35. Feto normal de 80 días. ........................................................................67 Figura 36. Procedimiento para identificación de membrana fetal deslizable. ........71 Figura 37. Identificación de vesícula amniótica. .....................................................71 Fig. 38. Asimetría de los cuernos y la presencia de fluido en cuerno.. ..................71 Figura 39. Procedimiento de palpación transrectal ................................................74 Figura 40. Hallazgos de 35 – 40 díasde gestación ...............................................76 Fig.41. Retracción directa del útero .......................................................................76 Fig. 42. Retracción indirecta del útero....................................................................78 Figura 43. Medidas de la Mano. .............................................................................81 Figura 44.Feto al Día 55 ........................................................................................81 Figura 45. Feto al Día 60. ......................................................................................82 Figura 46. Conceptus Normal al Día 70. ................................................................82 Figura 47. Conceptus de 2.5 meses. ....................................................................83 Figura 48. Conceptus normal al dia 80. ................................................................87 6 Figura 50. Tamaños Fetales. .................................................................................87 Figura 51. Gestación de 150 días ..........................................................................88 Figura 52. Gestación de 6 meses ..........................................................................89 Figura 53. Posición normal de la cría al parto. ......................................................89 Figura 54. Membranas fetales normales al o cerca del término. ............................89 7 INDICE DE CUADROS Cuadro 1. Características del tracto reproductor en vacas no gestantes durante el cicló estrual ………………………………………………………….……………33 Cuadro 2. Criterios para diagnóstico de gestación por palpación transrectal en vacas en los días 28 a 58 de gestación…………………...……………………..76 Cuadro 3. Criterios para diagnóstico de gestación por palpación transrectal en vacas en los días 60 al 115 de gestación………………………………………..82 Cuadro 4. Cálculo de parámetros reproductivos………………………………..90 8 1. INTRODUCCIÓN La eficiencia productiva de cualquier sistema de ganadería siempre va a depender de la eficiencia reproductiva, ya que cualquiera que sea el objetivo de dicho sistema de producción (leche, carne o pie de cría), se requerirá de un evento reproductivo, el parto, para iniciar una lactancia, producir becerros para el abasto de carne o producir becerras para reemplazar los vientres (Salas, 2008). Excepto en los animales monotremas, todos los mamíferos son vivíparos, esto es, su desarrollo embrionario y fetal se realiza por completo dentro del útero. Este periodo de desarrollo intrauterino se denomina gestación o preñez, y en el ocurre principalmente la nutrición del feto en crecimiento, y las adaptaciones maternas encaminadas a este fin, como es la formación de un órgano complejo con funciones múltiples denominado placenta. El parto constituye el término fisiológico de la gestación (Hickley, 1990). Después de alcanzar la pubertad, hay una secuencia cronológica de acontecimientos cardinales en la vida reproductiva de una hembra, que son: la actividad cíclica periódica, el servicio fecundante, el reconocimiento materno de la preñez, la gestación, el parto, el puerperio y la lactancia. Pero para poder intervenir en la propagación de la especie, una hembra debe, después de ser fertilizada, mantener una gestación a término, tener un parto eutócico (normal) y una descendencia viable (Rutter y Russo, 2002). 9 El diagnóstico de gestación es una de las prácticas que se llevan a cabo dentro de un conjunto de medidas tendientes a incrementar la eficiencia productiva de especies de interés zootécnico. Su utilidad radica en que posibilita la clasificación del grupo de vientres o reproductoras de acuerdo a su estado fisiológico (gestante o no gestante) y por lo tanto permite manejar adecuadamente la alimentación de acuerdo a los diferentes requerimientos nutricionales por etapa fisiológica. Lo especialmente importante en zonas donde el recurso forrajero es muy escaso (Aller et al., 1998). En términos generales, un método ideal de diagnóstico tendría que ser exacto, barato, fácil y rápido, además de dar un resultado inmediato para evitar el tener que examinar a los animales por segunda vez. Pero quizás lo más importante es que se puedan aplicar en los primeros momentos de la supuesta gestación; ya que el principal objetivo es predecir qué animales reanudarían el estro después del apareamiento o inseminación (aproximadam ente, al pasar un tiempo equivalente a la duración de un ciclo), para poder identificarlos, vigilarlos y en su caso, volverlos a inseminar en el momento óptimo (Thibault et al., 2001). La palpación transrectal es una herramienta más dentro del paquete de acciones que el profesional responsable del área de reproducción de cualquier unidad de producción debe poner en práctica para lograr la correcta eficiencia reproductiva (Magnasco et al, 2005). 10 2.ANTECEDENTES La palpación transtransrectal en las vacas es una práctica o método físico utilizado desde hace muchos años, consiste en introducir la mano por el recto de la hembra bovina el cual es lo suficientemente elástico que permite la exploración de los diferentes órganos del aparato reproductivo con lo cual es posible determinar estados fisiológicos (funcionalidad ovárica, fase del ciclo estrual, gestación o no gestación), o patológicos (piómetras, quistes, aplasia segmentarías y otras) (Zemjanis, 1989). Existen controversias acerca de cuándo se inició la palpación transtransrectal como método diagnóstico de gestación en los bovinos. La palpación transrectal del útero para el diagnóstico de la preñez en el ganado bovino fue descrita por primera vez en la década de 1800 (Cowie, 1948) y es el método más antiguo y más utilizado en la actualidad para el diagnóstico precoz de la gestación. La técnica de palpación puede variar entre los profesionales debido a la experiencia que se tenga. La palpación transrectal de la vesícula amniótica como ayuda para determinar el estado de preñez en el ganado fue descrito por Wisnicky y Cassida (1948). Es factible realizar el diagnóstico de gestación por la palpación de la vesícula amniótica entre los días 28 y 35 de gestación. Asímismo, el deslizamiento de las membranas corioalantoideas alrededor del día 30 de gestación fue descrito por Zemjanis (1989). La palpación transrectal "clásica" (en el mejor de los casos) se utiliza para detectar y diagnosticar preñeces mayores de 60 días, dar información sobre 11 estructuras y función ovárica, cubrir novillas, revisar vacas repetidoras e indagar sobre estados puerperales. En el peor de los casos la palpación solo se usa para diagnosticar gestaciones, lo cual no es suficiente para lograr la eficiencia reproductiva del hato, sin embargo es lo más usual en el sector ganadero (Green, 2011). El objetivo fundamental de la palpación transrectal debe ser el de coadyuvar a la eficiencia reproductiva del hato, diagnosticando anormalidades o patologías reproductivas o el no retorno al celo lo más temprano posible en vacas que no están siendo eficientes en el rancho para poder tomar decisiones acertadas y oportunas en cuanto a tratamientos o desechos a fin de incrementar o mantener productividad y eficiencia en la empresa ganadera (Blanc, 2011). Además de la palpación transrectal, existen otros métodos que sirven como herramientas para el diagnóstico de la gestación, dentro de las cuales se puede citar: a) No Retorno al Celo: Se refiere a la vaca gestante por monta o inseminación que no vuelve a entrar en calor hasta después del parto, este método no es muy confiable ya que también se puede dar el no retorno al celo por quistes ováricos, contenido uterino diferente a feto normal o por fallas en la detección de los calores o bien debido a la condición conocida como anestro derivada por perdidas en la condición corporal de las vacas y por ende fallas en la presentación del estro. (González-Stagnaro et al., 2002) 12 b) Métodos químicos como detección de niveles de hormonas en leche, orina o suero sanguíneo. Este método está basado en la identificación y determinación de niveles séricos de las hormonas que se consideran indicadoras de la gestación, aunque es de mucha utilidad, suele resultar costoso por la toma de las muestras y el envío al laboratorio (Blanc, 2011). Las hormonas que se consideran indicadoras de gestación son: Progesterona: Esta hormona es producida casi en exclusividad por el cuerpo lúteo, por lo que sus niveles séricos y en leche varían con la presencia o no de un cuerpo lúteo funcional. Por lo tanto se podría interpretar que un animal que muestre valores altos y constantes de progesterona en dos muestras separadas 21 – 24 días (tomando el servicio como día 0) se encuentra gestante. Las desventajas de éste método son principalmente 2, la pérdida embrionaria temprana y los estados patológicos donde la progesterona se mantiene elevada (piómetra, quiste luteal). Este método es considerado de utilidad alta, aunque se habla de que es más eficiente detectando vacas no gestantes. (Squire, 2003). Sulfato de estrona: Es un estrógeno conjugado producido por la placenta. Su utilidad en el diagnóstico de preñez es casi nulo, ya que llega a niveles detectables a los 75-100 días de gestación; etapa en la cual se pueden aplicar métodos más sencillos y económicos (Blanc, 2009). Proteína B: Esta hormona es una glicoproteína producida por el trofoblasto que aparece detectable aproximadamente 24 a 28 días post concepción. Su principal desventaja es su vida media alta, ya que los niveles plasmáticos 13 pueden permanecer elevados por varios días en caso de muerte embrionaria (Squire,2003). Factor de preñez temprana: Se trata de una glicoproteína que aparece a las pocas horas del apareamiento y desaparece rápidamente después de la muerte embrionaria. Puede detectarse en suero de forma fehaciente 8 días post servicio. (Cabodevila, 2005) c) Ultrasonido. El uso del ecógrafo, nos permite obtener información muy temprana de la gestación, a partir del día 20, así como, sexo de la cría y además, es útil para la detección de otros problemas reproductivos como quistes ováricos y contenidos uterinos anormales. Esta debería ser la ayuda diagnostica con que todos los profesionales de la reproducción debieran contar, aunque en los países desarrollados su uso es cada vez más generalizado, por el momento resulta costoso y no muy práctico para el uso masivo en ganaderías comerciales en los países subdesarrollados (Fricke, 2011). 14 3. JUSTIFICACIÓN La reproducción juega un papel clave en cualquier unidad de producción, por lo que es de gran importancia que cualquier Médico Veterinario Zootecnista, aunque no se especialice en la reproducción animal, conozca la gestación con todos sus eventos y su correcto diagnóstico. Dado el rol que toma la reproducción animal en la ganadería de cualquier región, se considera que es de fundamental importancia que exista en la biblioteca de cualquier escuela de medicina veterinaria, una fuente de información sobre del diagnóstico de gestación, y que además cuente con recursos gráficos y fotográficos para optimizar la comprensión del tema. Si bien es cierto que existen muchos artículos y sitios electrónicos que ofrecen información acerca de la gestación en hembras bovinas y sus técnicas de diagnóstico, no existe un manual en nuestra biblioteca que com pendie la información más importante y la ponga al alcance del alumno. Además el presente manual servirá de apoyo a los alumnos de las experiencias educativas de Fisiología de la Reproducción, Reproducción Animal y Técnicas de la Reproducción y servirá de guía para todo aquel interesado en el área reproductiva. 15 4. OBJETIVOS 4.1 OBJETIVO GENERAL Integrar un manual que abarque la gestación y su diagnóstico por ultrasonido y palpación transrectal, de manera que sirva como una guía en la práctica veterinaria. 4.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS Describir el aparato reproductor de la hembra bovina y su funcionamiento en condición no gestante. Describir los hallazgos a la palpación que se consideran indicadores o signos positivos de gestación. Analizar y comparar las ventajas y desventajas de la palpación transrectal y del ultrasonido como técnicas de diagnóstico de gestación 16 5. MATERIAL Y MÉTODOS Para la elaboración de este manual se realizaron diferentes actividades y se utilizaron los siguientes materiales: 1. Libros relacionados con el objetivo del manual, procedentes de la biblioteca de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Veracruzana. 2. Artículos científicos relacionados con el tema. 3. Publicaciones de médicos veterinarios expertos en el área tanto mexicanos como extranjeros. 4. Entrevistas y opiniones del asesor del manual, expertos sobre el tema, productores y propietarios de animales. 5. Páginas electrónicas relacionadas con el tema. El manual práctico educativo consiste en un documento escrito aunado a una colección de imágenes para cada una de las prácticas comprendidas dentro del trabajo, de manera que pueda ser comprendido por productores, técnicos y estudiantes de Medicina Veterinaria y Zootecnia. 17 CAPÍTULO 1: ANATOMÍA Y FISIOLOGÍA REPRODUCTIVA DE LA HEMBRA BOVINA 1.1ÓRGANOS GENITALES DE LA VACA. El aparato genital femenino es el órgano de reproducción de las hembras. Está capacitado para la producción de ovocitos y facilita su unión con los espermatozoides, así como el posterior alojamiento del embrión y el feto hasta el nacimiento. Para su estudio el aparato reproductivo de la hembra se ha clasificado en órganos genitales externos e internos (Gázquez y Blanco, 2004). Dentro de la estructuras externas importantes esta la vagina, conecta con la vulva formando un canal muy importante como receptáculo del pene durante el coito, así como al momento del parto para la expulsión del feto. Hacia el exterior se conecta con la vulva, constituida por dos labios y sus comisuras y el clítoris que se localiza dentro de ella (Sisson et al., 2005). Los órganos genitales internos como el cérvix y el útero están sostenidos por el ligamento ancho. Este ligamento consta del mesoovario, que sostiene al ovario; el mesosálpinx, que sostiene el oviducto; y el mesometrio, que sostiene al útero. En bovinos, la inserción del ligamento ancho es dorso lateral en la región del íleon, del modo que el útero está dispuesto como los cuernos de un carnero, con la convexidad dorsal y los ovarios situados cerca de la pelvis (Hafez, 2005). 18 1.1.1. GENITALES EXTERNOS. El vestíbulo, los labios mayores, labios menores, el clítoris y las glándulas vestibulares constituyen los genitales externos. 1.1.1.2. Vestíbulo. El vestíbulo de la vaca se extiende hasta el sitio donde el orificio uretral externo se abre en su superficie ventral. La pared del vestíbulo es similar a la de la zona posterior de la vagina, aunque existe mayor cantidad de tejido linfoide nodular en la zona superficial de la lámina propia-submucosa (Gázquez y Blanco, 2004). En la pared vestibular existe gran cantidad de vasos sanguíneos y linfáticos, además de un laberinto de espacios cavernosos que se comportan como un tejido eréctil. En el tejido conectivo de la pared se pueden observar las denominadas glándulas vestibulares mayores y menores, que son glándulas tubuloalveolares mucosas (Gázquez y Blanco, 2004). 1.1.1.3 Vulva. La vulva es la apertura externa del aparato reproductor; ella tiene dos funciones principales: abrirse para permitir la cópula y sirve como parte del canal de parto. Incluidos en la estructura vulvar están los labios y el clítoris. Los labios de la vulva están ubicados a los lados de la apertura vulvar, y tienen aspecto seco y arrugado cuando la vaca no está en celo. En la medida que el animal se acerque al celo, la vulva empezará a hincharse y tomará una apariencia rojiza y húmeda (Quintela et al.,2006) 19 Figura 1. Vulva de una Vaca en Estro. Edema e hiperemia de la vulva como respuesta fisiológica de una vaca en estro. Drost. M. 20 1.1.2.ÓRGANOS GENITALES INTERNOS. 1.1.2.1 Vagina. La vagina se extiende desde la apertura uretral hasta el cérvix. Durante la monta natural, el eyaculado es depositado en la porción anterior de la vagina. La vagina también sirve como parte del canal de parto (Sisson et al, 2005) 1.1.2.2 Cérvix Es un órgano de paredes gruesas, que establece la conexión entre la vagina y el útero. Es un órgano fibroso formado predominantemente por tejido conectivo con pequeñas cantidades de tejido muscular liso. El cérvix o cuello uterino se caracteriza por una pared gruesa y una luz estrecha. Presenta varias prominencias que tiene la forma de bordes transversales alternados en espiral que se conocen como anillos cervicales (Quintela et al.,2006). Esta estructura anatómica se encuentra perfectamente cerrada excepto durante el estro, cuando se relaja ligeramente y permite la entrada de espermatozoides al útero. La secreción mucosa del cuello uterino se expulsa por la vulva (Quintela et al.,2006). 21 Figura 2. Aparato reproductor de la hembra bovina. Dejarnette y Nebel, 2004. 1.1.2.3. Útero. El útero consta de dos cuernos uterinos y un cuerpo (figura 3). Tiene un tabique que separa los dos cuernos, y un cuerpo uterino prominente. Ambos lados del útero están unidos a las paredes pélvicas y abdominales por el ligamento ancho. Es el componente fundamental del aparato genital femenino que tiene como función el asentamiento e implantación del óvulo en caso de ser fecundado, aquí posteriormente se aloja el producto permitiendo el desarrollo del feto hasta el parto, momento en que ayuda con las contracciones a la expulsión del feto. (Sisson y Grossman, 1994). Como órgano hueco, consta de tres capas: mucosa o endometrio, muscular o miometrio y serosa o perimetrio (Gázquez y Blanco, 2004). Es el componente 22 fundamental del aparato genital femenino que tiene como función el asentamiento e implantación del óvulo en caso de ser fecundado, así como el desarrollo de la placenta y el feto. Figura 3. División del útero. Dejarnette y Nebel, 2004 El endometrio representa la mucosa uterina y está constituida por un revestimiento epitelial cúbico puesto que la altura de las células epiteliales está influida por el estado hormonal de la hembra a lo largo del ciclo ovárico. El endometrio está sometido a cambios estructurales durante el ciclo sexual, de tal manera que en los rumiantes se edematiza al llenarse los espacios alveolares conectivos de fluido plasmático proveniente de la abundante vascularización. (Gázquez y Blanco, 2004). En las hembras bovinas getsantes se pueden observar las carúnculas, que consisten en engrosamientos delimitados del endometrio por los que se 23 produce la unión de la placenta materna con la placenta fetal, en la que no existen glándulas endometriales (Gázquez y Blanco, 2004). El miometrio está constituido por dos capas de músculo liso: la interna es circular y muy gruesa y la externa longitudinal y más fina. El músculo del miometrio aumenta considerablemente durante la gestación. En el límite entre las dos capas se encuentra gran cantidad de vasos sanguíneos grandes que también irrigan al endometrio, muy abundantes en las regiones carunculares de las hembras gestantes bovinas (Perez y Romano, 1996). El perimetrio, o túnica serosa está formado por tejido conectivo laxo, recubierto por un mesotelio, que alberga fibras musculares lisas y gran cantidad de vasos sanguíneos, vasos linfáticos y nervios, cuyas funciones principales radican el facilitar contracciones al momento del parto, así como contener el sistema de irrigación para dotar de nutrientes a los diferentes tejidos (Perez y Romano, 1996). En los tejidos del útero se producen algunas secreciones que son responsables de propiciar las condiciones apropiadas que permitan la supervivencia y capacitación de los espermatozoides para para la fecundación del ovulo. Así mismo, para facilitar la división del blastocisto temprano antes de la implantación. El volumen, la composición bioquímica del liquido uterino tienen diferentes variaciones que se ajustan a las diferentes etapas del ciclo estrual El endometrio además de las funciones de sostén produce diferentes sustancias llamada genéricamente ―líquido endometrial‖, que esta contenido principalmente por proteínas séricas y algunas otras mas especificas como 24 factores de crecimiento y factores inmuno - inhibidores, cuya responsabilidad es facilitar el crecimiento embrionario (Hafez, 2005). El útero presenta una serie de contracciones que se coordinan con la motilidad del oviducto y ovario. El origen, dirección, amplitud y frecuencia de las contracciones en el tracto reproductivo varia considerablemente a lo largo del periodo gestacional. Pero la respuesta contráctil del útero permanece latente hasta el momento del parto, en que realiza su cometido principal en la expulsión del feto. Después del parto, el útero recupera su tamaño y condición previos por un proceso llamado involución, que dura de 30 a 40 días (Hafez, 2005). 25 Figura 4 Útero nulíparo de novilla virgen cuernos simétricos y turgentes, fuente , Drost, M. 2010 Figura 5.Utero no gestante de hembra bovina. Loeza, 2011. 1.1.2.4: Oviductos. Existe una íntima relación entre el ovario y el oviducto. En bovinos, el ovario se encuentra en una bolsa ovárica abierta, que consiste en un delgado pliegue peritoneal del mesosálpinx, que está unido a un asa suspendida en la porción superior del oviducto. En bovinos, la bolsa ovárica es ancha y abierta (Hafez, 2005). El oviducto (figura 6), puede dividirse en cuatro segmentos funcionales: las fimbrias, en forma de olan, el infundíbulo, abertura abdominal en forma de embudo cerca del ovario; el ámpula, dilatada y mas distal, y el istmo, la porción proximal estrecha del oviducto, que conecta a este con la luz uterina (Sisson, 1994). 26 Figura 6. Estructuras que conforman el oviducto. Dejarnette y Nebel, 2004. La porción más alta del oviducto, cercana al ovario, es llamada ámpula, es en este segmento del oviducto en el que ocurre la fertilización. La estructura en forma de embudo al final del oviducto, llamada infundíbulo, rodea los ovarios y almacena los óvulos, evitando que estos caigan a la cavidad abdominal. Las estructuras vellosas sobre el infundíbulo y dentro de la ámpula, se mueven rítmicamente para transportar el ovulo a través del oviducto al sitio de la fertilización (Quintela et al, 2006) La mucosa del oviducto esta constituida por pliegues primarios, secundarios y terciarios. La del ámpula esta dispuesta en pliegues elevados y ramificados cuya altura disminuye hacia el istmo y que se convierten en bordes bajos en la unión uterotubárica, donde se unen el oviducto y el cuerno uterino correspondiente. La compleja configuración de estos pliegues mucosos en el ámpula llena casi por completo la luz (Gázquez y Blanco, 2004) En la mucosa del oviducto, las células ciliadas cuentan con cilios móviles, llamados cinocilios, que se extienden hacia la luz. La rapidez con que estos 27 cilios se mueven es influida por la concentración de hormonas ováricas; su actividad es máxima durante la ovulación o poco después, cuando el movimiento de los cilios de la parte fimbriada de los oviductos esta muy sincronizado y dirigida hacia la abertura del infundíbulo. La acción del movimiento ciliar permite que el ovulo se desprenda de la superficie de los folículos colapsados hacia el agujero del oviducto. Los cilios se mueven hacia el útero. Su actividad, acoplada a las contracciones del oviducto, mantienen a los óvulos en constante rotación, lo que es esencial para reunir ovulo y espermatozoide e impedir la implantación en el oviducto. Los oviductos se atrofian y pierden los cilios durante el anestro, se hipertrofian y recuperan los cilios durante proestro y estro, y vuelven a atrofiarse y a perder los cilios durante la preñez (Benesch, 1951) Las células secretorias de la mucosa del oviducto son no ciliadas y característicamente contienen gránulos secretorios. El líquido de los oviductos está constituido por un contenido selectivo de sueros y productos de secreción de los gránulos de las células secretorias del epitelio oviductal. El liquido de los oviductos tiene varias funciones, incluidas la capacitación e hiperactivación del espermatozoide, fecundación y el desarrollo embrionario temprano previo a la implantación (Gázquez y Blanco, 2004) Las contracciones de los oviductos facilitan la mezcla de su contenido, ayudan a desnudar el ovulo, facilitan la fecundación al incrementar el contacto entre espermatozoides y ovulo (Hafez, 2005) 28 Las contracciones musculares de oviducto son estimuladas por contracciones de dos membranas importantes que contienen musculatura lisa y están unidas a las fimbrias, ámpula y ovario: el mesosálpinx y la membrana mesotubárica superior Figura 7.- Oviducto Disecado. El oviducto se ha disecado para demostrar su longitud considerable. Una cánula se ha insertado por el extremo infundibular. La sección ampular se ha enderezado, y elIstmo todavía esta tortuoso (Drost, M. 2010). 29 1.1.2.5: Ovarios. Los ovarios de la vaca miden normalmente de 3.5 a 4 cm de longitud, 2.5 cm de ancho y tienen alrededor de 1.5 cm de grueso en su porción mayor, el peso es de 15 a 20 g. (Sisson y Grossman, 1994). En bovinos y ovinos, el ovario tiene forma de almendra. El ovario se constituye como un cuerpo ovoide en el que es posible distinguir una zona gruesa periférica, o corteza, y una zona interna o médula. La corteza esta recubierta por una lámina continua de epitelio denominado epitelio germinal que cuando alcanza el hilio ovárico se continúa con el mesotelio del repliegue peritoneal. Debajo del epitelio germinal hay una capa de tejido conectivo fibroso denominado túnica albugínea. La medula es la zona central del ovario, compuesta por tejido conectivo laxo con fibras musculares lisas y abundante inervación y vascularización. Los vasos sanguíneos de esta zona son muy tortuosos y de gran tamaño (Gázquez y Blanco, 2004). El ovario, a diferencia del testículo, permanece en la cavidad abdominal. Realiza tanto funciones exocrinas (liberación de óvulos) como endocrinas (esteroidegénesis). El ovario no funciona como una glándula de secreción interna, pero contiene el patrimonio genético, consistente en varios miles de folículos primordiales. 30 Figura 8.- Ovarios Inactivos durante anestro (20 x 15 x 15 mm). Pieterse MC (1999) Los ovarios, sometidos a la influencia y control de las hormonas gonadotropinas hipofisarias, son los responsables del ciclo estrual de la hembra. Los ovarios son además responsables del crecimiento y maduración de las células sexuales femeninas, denominadas óvulos. La función endocrina de los ovarios es la de producir hormonas sexuales denominadas estrógenos, necesarias para acondicionar el aparato reproductor para la recepción del macho y un acondicionamiento favorable para la fecundación del óvulo. Los estrógenos promueven y mantienen los caracteres sexuales secundarios. Son capaces de desarrollar una glándula endocrina temporal denominada corpus luteum, 31 (cuerpo lúteo) que secreta la hormona progesterona, responsable de preparar al endometrio para la implantación y nutrición del cigoto (Squires, 2003). Las hormonas ováricas son producidas por dos estructuras cíclicas, folículo y cuerpo lúteo, responsables de todas las modificaciones del aparato genital femenino que se producen durante el ciclo estrual Los elementos cíclicos ováricos tienen una vida breve, contenida complejamente en el arco del ciclo estrual. En cada ciclo se forma, indiferentemente en el ovario derecho o izquierdo, un folículo del cual deriva un cuerpo lúteo, continuando de esta forma durante toda la vida sexual si no aparecen gestaciones o factores patológicos. Los dos ovarios son interdependientes y funcionan al unísono como si se tratase de un único órgano (Quintela et al, 2006) 1.2: CICLO ESTRUAL. Todas las hembras pertenecientes a los mamíferos, desde el inicio de la pubertad se caracterizan por presentar ciclos estruales, llamados así debido a que la parte del ciclo que se puede detectar visualmente es el estro ó celo. En la vaca el ciclo dura entre 17 y 24 días, sin embargo, 20 y 21 días es lo más común. La actividad sexual tiene lugar en la pubertad o madurez sexual que en la novilla comienza aproximadamente a los 12 meses de edad, y está estrechamente correlacionada con la actividad funcional endocrina de los ovarios. El ciclo estrual se caracteriza por tener dos fases, estas son denominadas de acuerdo a las estructuras anatómicas responsables de los diferentes periodos 32 que componen el ciclo; de este modo hay una fase folicular durante la cual ocurren dos periodos del ciclo; el proestro y el estro. La segunda fase se le denomina fase luteal, ya que esta estructura es en parte la responsable de la presentación de otros dos periodos en el ciclo, el metaestro y el diestro. La sucesión de eventos que ocurren durante el ciclo estrual, así como los eventos subsecuentes que siguen a cada ciclo, dependen del resultado de la intervención en el manejo de los animales. En otras palabras si la vaca es inseminada o servida por el macho resultara en una gestación. Por otro lado, si no ocurre la gestación o existen factores que impiden la concepción los pasos subsecuentes y los tiempos en que estos ocurren varían considerablemente (figura 9) Figura 9. Eventos alternos que pueden ocurrir durante el ciclo estrual. 33 1.2.1: Fase folicular. Los folículos ováricos son las unidades básicas de la biología reproductiva femenina. Consisten en una acumulación de células haploides que son toscamente esféricas que se encuentran en el interior del ovario, rodeando un ovocito (Quintela et al.,2006). Estas estructuras se activan periódicamente e inician el proceso de crecimiento y desarrollo para culminar, generalmente, en la ovulación de un solo ovocito viable. Estos ovocitos son envueltos por una capa de células granuladas encerradas en una matriz extracelular —la membrana folicular principal o lámina basal— que constituye el folículo ovárico. Los folículos ováricos con mayor crecimiento que son visibles a simple vista son a menudo llamados folículos de Graaf (en honor de Regnier de Graaf) (Squires, 2003). Desde el nacimiento, algunos de ellos inician el desarrollo en sucesión hasta convertirse en folículos cavitarios de 10 mm de diámetro, después sufren una regresión y desaparecen sin dejar rastro (Calderón, 2011) Al nacimiento una capa de células foliculares rodea los oocitos primarios en el ovario para formar los folículos primordiales (Gázquez y Blanco, 2004). El proceso de maduración del folículo se denomina foliculogénesis. Una vez el folículo ovárico se ha desarrollado, ejerce las siguientes funciones básicas: Mantiene, nutre y madura al ovocito y lo libera en el momento adecuado. 34 Proporciona sostén hormonal al feto hasta que la placenta pueda asumir esta función. Una vez que el ovocito es expulsado del ovario recibe el nombre de óvulo Esta fase da inicio al ciclo estrual y abarca dos periodos: el proestro que dura de 2 a 4 días y el estro cuya duración varia de 12 a 18 horas, mientras que durante el proestro se sucede el crecimiento de una onda folicular ovulatoria y un ovocito dominante. El periodo del estro es la única fase en la cual la vaca presenta cambios observables en su conducta y el único momento durante el ciclo en el cual acepta la estimulación del toro y la monta. Solo se puede visualizar el estro durante 8 a 12 horas, y en casos excepcionales, hasta 18 horas (menos de un día) (Eli, 2005). Esta fase es de corta duración, pero de gran importancia para la reproducción. Durante el proestro, un folículo de Graaf inicia su crecimiento final que lo va a llevar en forma normal a la ovulación, en este folículo se establece una gran secreción de estrógenos, los cuales poco a poco van produciendo los signos del estro o celo. Estos estimulan cambios en el comportamiento en los machos como respuesta ferohomónica y coinciden con la fase de aceptación de la hembra hacia el macho. Como consecuencia se sucede la cópula, monta o servicio, característica de esta fase. Además, los estrógenos estimulan internamente al hipotálamo (en el sistema nervioso central) al producir la hormona liberadora de gonadotropinas (GnRH), que a su vez va a estimular a la hipófisis anterior para descargar la hormona luteinizante (LH) responsable de la 35 ovulación del folículo después de terminado el celo (metaestro) y de liberar un ovocito que al unirse con un espermatozoide (fecundación) será el punto de partida de la preñez (Eli, 2005). 1.2.2: Desarrollo folicular. Al nacimiento, los ovarios en mamiferos contienen gran cantidad de foliculos primarios (cerca de 500,000 en vacas ) que gradualmente crecen y maduran a medida que el animal madura. Estos foliculos primarios consisten en un ovocito rodeado de una capa simple de celulas granulosas y tejido intersticial, capaz de mantener al óvulo suspendido en la primera etapa de la division meiótica . Conforme el folículo crece , el ovocito aumenta en diámetro y es rodeado por la zona pelúcida. (Gazquez y Blanco, 2004) Los ovocitos o células germinales femeninas están incluidos en el tejido conjuntivo laxo de la corteza, por debajo de la capa o túnica albugínea. Cuanto más joven es la hembra, mayor cantidad de ovocitos tiene, ya que nace con todos los ovocitos que va a poseer durante toda su vida. En cada ciclo sexual, un pequeño numero de ovocitos, entre 5 y 30, dependiendo de la especie, evolucionan hacia folículos para ser expulsados. No obstante, solo un reducido numero concluye el desarrollo y son expulsados del parénquima ovárico. Los otros quedan detenidos en diferentes fases de desarrollo y degeneran por un proceso de atresia folicular. El número de folículos disminuye progresivamente 36 a lo largo de la vida, y en la fase ultima de inactividad ovárica son casi imposibles de distinguir, aunque algunos pueden persistir La gran mayoría de los foliculos sufren atresia despues de la maduracion, ya que solo un limitado numero de ovulaciones ocurren (una vaca o vula un promedio de 300 foliculos en un periodo de 15 años). El crecimiento de folículos hasta 3 mm en diametro es independiente de FSH, mientras que FSH es requerida para el crecimiento de los foliculos de 3 a 10 mm en diametro (Driancourt, 2001). Los ovocitos se localizan mayoritariamente en la corteza y se distribuyen de forma homogénea por toda la corteza. A medida que van madurando los folículos ováricos se acercan a la medula, donde existe una mayor vascularización, sin embargo, cuando van a ser expulsados del ovario, tienden a aproximarse de nuevo a la zona cortical (Driancourt, 2001). El folículo primordial es a primera fase de la evolución folicular del ovocito y esta integrado por un ovocito recubierto por una capa única de células foliculares planas, que se establecen como un epitelio simple plano rodeado por una nítida membrana basal. En conjunto, el folículo primordial llega a medir aproximadamente 40 nanómetros de diámetro (Squires, 2003). El ovocito integrante del folículo primordial mide unos 20 nanómetros de diámetro. Tiene un núcleo esférico vesiculoso y de gran tamaño, de situación excéntrica con respeto al citoplasma y un nucléolo muy desarrollado. 37 Este tipo de folículo se pude catalogar como folículo en reposo. El paso de un folículo primordial en desarrollo a un folículo primario en desarrollo implica una serie de cambios en el ovocito, en el epitelio folicular y en el tejido conectivo que lo rodea. El inicio del desarrollo viene marcado por un aumento del tamaño del ovocito acompañado por la transformación de las células epiteliales foliculares desde su forma plana a células cubicas. Se sigue de una gran actividad mitótica del epitelio folicular que se transforma en un epitelio estratificado de células que reciben el nombre de células de la granulosa. La lamina basal que recubría el folículo aumenta de grosor y se convierte en la lamina limitante externa del folículo (Driancourt, 2001). En el ovocito ocurren una serie de cambios tanto en tamaño y numero como en la distribución de los orgánulos. En el límite entre el ovocito y las células de granulosa se desarrolla un espacio en el que se proyectan las microvellosidades del ovocito y las células de la granulosa, este espacio se denomina zona pelúcida. Otro cambio notable ocurre en las células de la teca, que se diferencian en dos zonas: una interna muy vascularizada y adosada al folículo (teca interna, cuyas células son de carácter secretor), y una externa, constituida principalmente por tejido conectivo (teca externa) (Gázquez y Blanco, 2004). En la zona de la granulosa, las células inician la secreción de liquido folicular que es vertido a unas cavidades que forman ellas mismas a la vez que se 38 desarrollan los canales intercelulares de la granulosa. En este intantste de producción folicular se inicia la fase de folículo secundario. Los espacios intercelular es aumentan tanto en numero como en tamaño, dando lugar al antro folicular o folículo antral (Diskin y Sreenan, 2000). Las células de la granulosa próximas al ovocito constituyen el cumulus oofurus u ovígero, una prominencia en el interior de la cavidad folicular, donde se formará la corona radiada, que consiste en un grupo de células granulosas dispuestas alrededor de ovocito. Una vez que se formo la corona radiada, entre las células del cumulus oofurus se relajan los espacios intercelulares de forma que el ovocito, junto con la zona pelúcida y la corona radiada se separan y se integran al interior del antro, constituyéndose el folículo terciario o de Graaf, que consiste en el folículo dispuesto para la ovulación (Diskin y Sreenan, 2000). Las gonadotropinas juegan diferentes roles, incluyendo el control y desarrollo de los folículos ováricos, la ovulación y la formación y función del cuerpo lúteo, así como la regulación de la producción de hormonas gonadales (Squires, 2003) Las gonadotropinas, la hormona luteinizante (LH) y la folículo estimulante (FSH) que son liberadas en la pituitaria anterior juegan un papel fundamental en la formación y maduración de folículos. La liberación de hormonas gonadotrópicas es facilitada por la hormona liberadora de gonadotropinas (GnRH) producida en el hipotálamo. La GnRH es enviada a la pituitaria anterior 39 o hipófisis, a través de los vasos del conducto hipotalámico-hipofiseal. Tanto GnRH, como las gonadotropinas son liberadas en forma pulsátil, y la frecuencia y amplitud de estos pulsos afectan de manera importante las funciones biológicas (Diskin y Sreenan, 2000). Las variaciones en la liberación pulsátil de GnRH tienen un efecto diferencial sobre la producción de LH y FSH. Muchos factores externos afectan la actividad generadora de pulsos en el sistema nervioso central y por lo tanto inciden en las actividades del sistema reproductivo. Estos factores incluyen nutrición, estrés, amamantamiento, presencia del macho, estación del año y claves visuales y olfatorias. La inhibina, la activina y la folistatina (proteína ligadora de activina) son producidas por las gónadas y regulan la liberación de FSH por la pituitaria. La inhibina reduce la producción de FSH, mientras que la activina estimula su producción independientemente de GnRH. Las folistatinas pertenecen a una familia de glicoproteínas monoméricas que se unen a activina y previenen el estímulo para la producción de FSH (Squires, 2003). 40 Dominante. Figura 10. A. Ovario con un folículo dominante. Loeza, 2011. Figura 11. Múltiples folículos en ambos ovarios como en una vaca o novilla durante el proceso de superovulación. Bartolome J (2006) 41 1.2.3: Fase lútea. La fase lútea o del cuerpo lúteo (CL) del ciclo abarca dos periodos: metaestro y diestro. El metaestro dura de 2 a 3 días y se caracteriza por ser el momento en el cual sucede la ovulación, mientras que el diestro es la fase más larga del ciclo (13 a 15 días). En el mismo lugar en donde se produjo la ovulación se va a desarrollar un nuevo elemento glandular llamado cuerpo lúteo. De los 21 días del ciclo, la fase lútea abarca de 15 a 18 días Después de la ovulación, las celulas de la teca degeneran mientras que las de la granulosa sufren hipertrofia y se luteinizan a traves de las células de luteina. Estas células producen progesterona, la cual inhibe la secrecion de GnRH del hipotálamo y por lo tanto disminuye la secrecion pulsátil de LH. El CL se desarrolla rapidamente y la producción de progesterona se incrementa al inicio del ciclo (dias 3 a 12 en la vaca) y se mantiene constante hasta el dia 15 a 16, cuando la regresión (luteólisis) se inicia a menos que la fertilización ocurra. La presencia de un CL funcional durante la fase luteal evita la ovulación, y que ningún folículo que madure durante la fase luteal inicie la atresia (Driancourt, 2001). Los estrógenos actúan en el útero incrementando los receptores para estrógenos y oxitocina. Si la fertilización e implantación no ocurren, niveles altos de progesterona y oxitocina del ovario estimularán al útero a secretar prostaglandinas F2α (PGF2α), que provoca regresión del CL al interferir la acción de LH sobre al CL e incrementar la producción de oxitocina por el 42 ovario. Una nueva fase folicular entonces se inicia conforme el folículo madura hasta su ovulación (Wiltbank, 1998). En la ausencia de gestación, la hembra madura pasa por una serie de ciclos reproductivos continuos, dentro de los cuales un grupo de folículos ováricos maduros (fase folicular), hacen que la hembra se manifieste receptiva a la monta (estro o calor), y el folículo dominante ovula y es formado un cuerpo lúteo (CL), lo que da inicio a la fase lútea. El número de folículos ovulados y el CL formado es una característica de especies y algunas veces hasta de razas dentro de una especie. Si la fertilización del huevo y la implantación del embrión no ocurre, el CL regresa (luteólisis) y el ciclo se repite (Cuadro 1) (Hafez, 2005.) 43 Cuadro 1. Características del tracto reproductor en vacas no gestante durante el ciclo estrual. Etapa del ciclo estral y anestro Duración y hallazgos Diestro Dura de 11 a 15 días. Cuerpo lúteo funcional ( tamaño variable) Útero Normal (flácido) Folículos de 4 a 10 mm( normalmente solo se detecta el dominante) Dura 3 a 4 días. Útero Edematoso. Cuerpo lúteo en regresión, más pequeño y se siente más compacto Folículo dominante mayor a 10 mm. Dura entre 6 y 24 horas. Receptividad sexual (Celo o calor) Turgencia Uterina Difícil detectar estructuras lúteas. Folículo ovulatorio > 10 mm. (frágil) Presencia de moco al palpar. Dura entre 3 y 4 días Ovulación Útero edematoso al inicio y flácido al final. Dificultad para palpar estructuras ováricas (cuerpo hemorrágico). Regresión del CL anterior e inicio del crecimiento del siguiente. Folículos < 10 mm. Moco Sanguinolento Duración Variable Depende de fin zootécnico Útero Normal Ausencia de estructuras lúteas Folículos entre 4 y 10 mm. Proestro Estro Metaestro Anestro Calderón, 2011. Feromonas Estrés Nutrición Claves visuales/olfatorias 44 Sistema nervioso central Amamantamiento Estación Figura 12. Regulación hormonal del ciclo estrual Desarrollo propio. CAPITULO 2: GESTACIÓN. 2.1 OVULACIÓN. 45 La ovulación está señalada por la dehiscencia del folículo, cuando este ha llegado a su máximo desarrollo y estalla, dejando salir al ovocito, que normalmente es recogido por el pabellón de la trompa, que se encuentra en la zona de ovulación, congestionada y dotada de movimientos vermiculares. Después de que el periodo de celo cesa, el ciclo sexual termina, para volver a renovarse en el momento oportuno; o bien, si hubo fecundación, continúa el ciclo reproductor (Vatti, 1992). Una vez que se ha producido la ovulación, el óvulo sale del ovario hacia el oviducto. La fecundación de este óvulo ocurre específicamente en la zona ámpula-istmo del oviducto. 2.2 FECUNDACIÓN La fecundación se efectúa generalmente en el pabellón de la trompa o en el oviducto y los óvulos fecundados continúan su descenso hacia el útero, en el cual se desarrollan dando lugar a los nuevos individuos, que permanecen en el hasta su nacimiento. Esto ocurre en los casos normales; pero hay numerosos factores que intervienen para impedir o limitar la fecundación creando estados de esterilidad o fertilidad disminuida ; también pueden intervenir interrumpiendo el curso normal de la gestación y causando el aborto. Estos factores pueden ser físicos, alimentarios, ambientales u originados por enfermedades generales o de los órganos genitales y por lesiones y/o defectos del ovulo o del espermatozoide. A veces, por estas mismas causas o por otras menos evidentes, el producto de la copula no sigue su desarrollo normal, sino que se interrumpe o perturba en uno o más órganos, en cualquier momento, dando lugar a formas anormales o monstruosas (teratológicas). Otras veces, la preñez 46 llega a su término en condiciones tales que el producto de la copula no puede ser parido naturalmente, porque existen causas de distocia, o sea, ―un parto difícil‖ (Vatti,1992). El huevo fecundado pasa alrededor de tres días en el oviducto antes de migrar al útero. Esta migración se produce por contracciones del oviducto y por movimientos de los cilios que recubren su interior (Thibault et al., 2001). Después de la copula o de la fecundación artificial, cuando el espermatozoide encuentra el ovulo, se inicia la preñez o gestación, o sea, el periodo fisiológico durante el cual se organizan en el útero materno los nuevos individuos capaces de llevar luego una vida independiente; este periodo dura desde el momento del apareamiento hasta el nacimiento de la cría. 2.3 PERIODOS DE GESTACIÓN. Se considera que existen dos periodos en el estado de preñez: Progestativo y Gestativo, en cada uno de los cuales se desarrollan fenómenos ovulares y uterinos, que contribuyen a crear el estado de simbiosis nutritiva entre madre e hijo, necesaria para la vida y el desarrollo del embrión (Vatti, 1992). 2.3.1 Periodo progestativo. Durante el periodo progestativo, el ovulo libera el folículo, y es recibido por el pabellón de la trompa y recorre el oviducto. Una vez que el ovulo ha llegado al 47 útero, queda libre por aproximadamente cincuenta días implantándose luego (Vatti, 1992). Antes y durante el proceso de implantación el riesgo de muerte embrionaria es alto. Algunos investigadores cuantifican las pérdidas embrionarias antes del día 15 entre un 8% y un 25% en programas de Inseminación Artificial y otros autores citan casos de hasta el 40% de mortalidad embrionaria luego del reconocimiento del útero materno. En caso de no poder implantarse el ovulo, podrá esperar, sin dañarse que se produzcan en el endometrio las modificaciones necesarias para su anidación, y se habla entonces de anidación diferida (Hafez, 2005) 2.3.2 Periodo gestativo. El período gestativo en una hembra bovina, varía entre los 270 días y los 295 días, siendo el promedio de 282 días. El cigoto se forma por la unión de un ovulo y un espermatozoide, evento que normalmente se realiza en el oviducto. En los días siguientes una serie de divisiones originan una mórula o hasta un blastocito para luego viajar hasta el lecho uterino en donde hay secreciones ricas en nutrientes, con capacidad de permitir la alimentación y ulterior desarrollo del embrión (Vatti, 1992). 2.4 DESARROLLO DE LAS MEMBRANAS EMBRIONARIAS Y FETALES Y DE LA PLACENTA. 48 La placenta está constituida por unas membranas que se forman después de la fecundación y a medida que el feto se va desarrollando. Esta estructura está formada por dos membranas llamadas: Amnios y Alantoides. La primera es aquella que está mas cerca al feto y lo envuelve; la segunda membrana o sea la alantoides es la más externa. Hacia los siguientes días de la fecundación, la masa celular interna se ha desarrollado en forma de un disco de células ectodérmicas poliédricas, separado del trofoblasto polar por un espacio que se convertirá en la cavidad amniótica. En relación con la superficie interna del disco, se han diferenciado algunas células endodérmicas aplanadas. En los días siguientes las células ectodérmicas forman un disco de células cilíndricas, en continuidad con las células aplanadas que tapizan la cavidad amniótica. Las células endodérmicas forman una capa bien definida de células cúbicas relacionadas con la superficie inferior del ectodermo embrionario y, junto con ellas forman el disco embrionario bilaminar. Mientras están teniendo lugar estos cambios, las células mesoblásticas se diferencian en relación interna del trofoblastos, y estas células mesoblásticas proliferan para dar origen al mesodermo extraembrionario (Hernandez y Zavala, 2007). La cara interna del mesodermo extraembrionario, que mira hacia la cavidad del blastocito, forma una membrana bien definida de células mesoteliales aplanadas, que se continúa con el borde del endodermo del disco embrionario. El espacio encerrado por el endodermo y la membrana mesotelial, es el saco 49 vitelino primitivo. Las células trofoblásticas, con su revestimiento de mesodermo extraembrionario constituyen el corion. Como el corion rodea completamente el embrión en vías de desarrollo y sus membranas, También se le denomina la vesícula coriónica. La expansión del corion va acompañada por un aumento en el mesodermo extraembrionario, en el cual pronto aparecen pequeñas cavidades. Estas se une y quedan establecido un celoma extraembrionario, como un espacio que eventualmente separa el saco vitelino y el amnios. Mientras se esta desarrollando el celoma extraembrionario el endodermo originado a partir del disco embrionario crece alrededor de la cara interna de la membrana mesotelial del saco vitelino primario para formar un saco vitelino secundario. Figura 13.Calcificación Normal. Depósitos normales de calcio en el corion al día 60. Drost M, 2010. 2.4.1Desarrollo de la alantoides. 50 La alantoides se desarrolla como un divertículo de la pared caudal del saco vitelino, y este lugar de origen pasa a situarse a nivel entre el intestino posterior y el saco vitelino definitivo. La alantoides crece en el mesodermo del tallo de fijación, en el cual se desarrollan vasos sanguíneos que mas tarde se convierte en las arterias umbilicales y la vena umbilical única 2.4.2 Desarrollo del amnios y del cordón umbilical. El amnios aparece como un desdoblamiento de la masa celular interna. El tamaño de la cavidad aumenta rápidamente y se reviste de células laminares, procedentes de la cara interne del trofoblasto relacionado con ella, y por células ectodérmicas que crecen a partir de los márgenes del disco embrionario. El amnios está inicialmente adherido al corion por un tallo de conexión muy amplio del mesodermo extraembrionario. Con la extensión del celoma extraembrionario, dentro del mesodermo del tallo de de fijación, el amnios queda separado de la cara interna del corion por el celoma extraembrionario, excepto en relación con el extremo caudal del embrión. Aquí la adherencia del disco embrionario y el amnios al corion persiste constituyendo el tallo de fijación definitivo (DesCôteaux et al ,2009). Con el desarrollo de los pliegues cefálico, caudal y lateral, y con el crecimiento y diferenciación de la forma embrionaria, la unión entre amnios y el ectodermo del embrión va quedando situada progresivamente sobre su cara ventral. Así queda establecido un gran ombligo. En las etapas iniciales de su desarrollo, el ombligo trasmite el conducto vitelino, asas de intestino y posiblemente el 51 alantoides, todo ello flanqueado por la comunicación entre los celomas intra extraembrionarios, a medida que el amnio se expande, viene a envainar el tallo de fijación del conducto vitelino intestinal y el celoma extraembrionario, y la región contenida dentro de la vaina tubular de amnios resultante es el cordón umbilical (DesCôteaux et al ,2009). El amnios forma un saco cerrado el cual, está lleno de un líquido acuoso, denominado líquido amniótico que proporciona un ambiente acuático de sostén en el cual el embrión es libre de moverse y desarrollarse. Figuras 14.Placas epiteliales normales en el lado fetal del amnios. Drost M ,2010. 52 2.4.3 Líquidos fetales. Entre las membranas de la placenta se encuentran líquidos, que se denominan según su localización: Líquido amniótico que se halla entre el amnios y el feto; es el líquido donde flota el feto, es de color gris claro, opaco y de consistencia viscosa. El líquido alantoideo es aquel que está entre la membrana amnios y la alantoides, presenta un color claro y consistencia acuosa. Estos líquidos cumples con las siguientes funciones: a) Proteger al feto contra golpes, deshidratación y cambios de temperatura; b) Permitir el crecimiento del feto y sus movimientos sin causarle daño al útero; c) Permitir la dilatación del cérvix en el momento del parto; d) Aumentar la lubricación de la vagina después de rotos los sacos que protegen al feto, facilitando el paso de éste a través del útero. 2.5 PLACENTOMAS. Los placentomas son botones o placas que se presentan en los bovinos y que permiten la unión entre el útero y la placenta. Estos están formados por una parte materna, llamada carúncula y una parte placentaria llamada cotiledón. La unión entre la carúncula y el cotiledón forma un placentoma. 53 CAPÍTULO 3: DIAGNÓSTICO DE GESTACIÓN. 3.1 INTRODUCCIÓN. La función reproductiva del bovino es uno de los aspectos que más repercuten en la eficiencia económica del sistema de producción del hato ganadero. Siendo uno de los aspectos que requieren mayor atención cuando se quiere tener una producción eficiente. Para ello debe hacerse un diagnostico general del estado reproductivo del hato, no sin antes conocer el manejo propio de la finca; esto es el tipo de praderas, carga animal, manejo de praderas, calidad del suelo, manejo sanitario, tipo de programa reproductivo (monta natura, Inseminación artificial o transferencia de embriones) con el fin de llegar a un diagnóstico objetivo y de esta forma direccionar la toma de decisiones que conlleven a optimizar la productividad del hato (Velázquez et al, 2011) Las herramientas que tiene el médico veterinario para obtener información sobre el estado reproductivo , las cuales se describen en la figura de los animales en la actualidad son varias, entre ellas se encuentran las pruebas inmunológicas (Hormonas y sustancias asociadas a la preñez), retorno al estro y métodos clínicos como la palpación transrectal tradicional en donde exige un adiestramiento por parte del clínico para no errar en el diagnóstico y la ultrasonografía, la cual es una técnica diagnostica directa en tiempo real en la que se emplea ondas de sonido de alta frecuencia para producir imágenes que permite mayor información del aparato reproductivo de la hembra en aspectos fisiológicos normales y patológicos (Velázquez et al, 2011) 54 Figura 15. Clasificación de técnicas de diagnostico de gestación. 3.2 ASPECTOS DE IMPORTANCIA PREVIOS AL DIAGNÓSTICO DE GESTACIÓN. Durante la reproducción, la hembra recibe mayor atención que el macho y existen varias razones para ello; ante todo, la hembra representa el resultado final de la reproducción; representa a su vez, la unidad reproductora y, finalmente, hay mayor proporción de hembras que machos (Perez, 2011) Debido a esto, es importante contar con suficiente información acerca de los eventos reproductivos de la hembra. El clínico afronta los siguientes problemas y preguntas, para obtener las repuestas deberá acudir a los registros de la unidad productora: ¿Cuándo fue el último parto de esta vaca? ¿Se le ha detectado en celo recientemente? ¿Cuando recibió por ultima vez servicio? (ya sea por inseminación artificial o monta natural). 55 ¿Ha abortado esta vaca? ¿ Ha presentado alguna vez algún flujo anormal? ¿Su hato ganadero se encuentra certificado como libre de tuberculosis y brucelosis? Contar con esta información antes de realizar la evaluación reproductiva, ya sea por ultrasonografía o por palpación transrectal, permitirá tener mayor certeza en el diagnóstico (Pérez, 2011) 3.2.1 Inspección visual. El valor del examen visual en la hembra es muy discutible en vista de la situación oculta del útero, ovarios y otras partes importantes del tracto genital dentro de la cavidad pélvica y abdominal. Sin embargo, la observación de las siguientes características puede proporcionar datos acerca del animal; a saber: Conformación general: Condición corporal (evaluada en una escala del 1 al 5) Conformación de los genitales externos: Constituido por la vulva y el diafragma pélvico. El aspecto general y tono de estas estructuras indican cambios asociados no solo a ciertos estados fisiológicos normales, si no también a ciertas condiciones patológicas. Descargas vulvares: Reflejan condiciones normales o patológicas. Pueden observarse directamente como tal, o indirectamente en forma de costras que se forman en la cola o muslos, también pueden observarse adheridas a la comisura ventral de la vulva o acumuladas en el suelo. Estado de la glándula mamaria: En los periodos preparto y posparto inmediatos, se observa ordinariamente edema y crecimiento de la glándula mamaria. Una ubre pequeña regresiva en un animal no grávido sugiere insuficiencia para amamantar. Comportamiento general del animal: Deben anotarse signos de estro, hiperestro, bramido y rascado en el suelo. 56 CAPITULO 4: DIAGNÓSTICO DE GESTACION POR ULTRASONOGRAFÍA. 4.1 INTRODUCCIÓN. La ultrasonografía se basa en las diferencias de impedancia acústica entre los tejidos, obteniendo imágenes y colores diferentes según la ecogenicidad de los mismos. Emplea ondas de sonido de alta frecuencia para producir imágenes de los tejidos blandos y órganos internos, lo cual es posible visualizar a través de la pantalla del ecógrafo. La aplicación de la ultrasonografía en las especies bovina y equina data de los años 80, sin embargo su desarrollo y perfeccionamiento para el estudio de los eventos reproductivos se ha acelerado en la presente década. El uso de la técnica de ultrasonografía en reproducción bovina se incrementa cada día a través del veterinario clínico y el especialista en biotecnología de la reproducción, ya que su utilización es demandada cada vez más por los ganaderos y los centros científicos, debido a su precisión, y a que su aplicación confirma o desestima la valoración realizada por palpación transrectal, constituyendo un medio diagnóstico de certeza y confirmativo en la dinámica de las ondas foliculares, desarrollo del cuerpo lúteo, la determinación del estado de gestación precoz. Otra gran ventaja que nos ofrece la ultrasonografía es la posibilidad de determinar el sexo los fetos a partir del día 57 basándose en la migración del tubérculo genital (próximo al ombligo en macho y detrás de la cola e hembra). A su vez también permite identificar aquellas vacas vacías con 57 patologías en el tracto reproductivo y monitorear la actividad ovárica con alta precisión (Kumar, 2009). La ultrasonografía es una técnica de diagnóstico por imagen sobre la base de la emisión de ultrasonidos y la recepción de ecos. Estos ecos se producen por la reflexión de los ultrasonidos a nivel de los distintos tejidos. Cuanto mayor sea la reflexión, mayor intensidad tendrán los ecos, pero menor cantidad de ultrasonidos serán capaces de seguir avanzando y mandar información. Los tejidos mas densos, son por lo tanto mas ecogénicos, dan tonalidades mas claras y los menos densos tonalidades mas oscuras. Los extremos serían el hueso (―refleja‖ todo el sonido) y los líquidos (totalmente anecoicos) (Rupérez, 2004). En el formato de imagen llamado modo B, estos ecos van e ser presentados como puntos de brillo, que serán tanto más brillantes cuanto mayor sea la reflexión, y serán en una posición proporcional al tiempo que han tardado en ser recibidos. La imagen ultrasonográfica se corresponde con el conjunto de puntos de brillo, que representa un corte anatómico de la región examinada. Los órganos o tejidos serán híper, hipo o anaecogénicos, según la cantidad de ultrasonidos que reflejen. Sin embargo, en la imagen aparecen puntos de brillo que no corresponden con ecos producidos a nivel de estructuras reales del paciente, son los denominados artefactos, y es importante conocerlos y aprender a diferenciarlos de los ecos reales, para poder interpretar correctamente las imágenes (Díez, 1997). 58 Figura 16. Entrada del transductor vía transrectal. Pieterse, 1999. 4.2 Principios básicos de la ultrasonografía. El ecógrafo o aparato de ultrasonografía utiliza ondas de sonido de alta frecuencia, cuya magnitud de medida es el megaherts ( MHz ), 1 MHz = 1’000 000 de ondas de sonido por segundo, para producir imágenes de órganos internos y de tejidos blandos. El ecógrafo está integrado por la consola y el transductor. La consola está compuesta por el monitor, los mandos y el teclado, y en su interior posee los mecanismos que transforman las señales eléctricas provenientes del transductor en imágenes visualizables en la pantalla del monitor. El transductor posee una gran cantidad de pequeños cristales piezoeléctricos, cuya vibración por el paso de la corriente eléctrica produce la emisión de ondas que se transmiten a través de los tejidos en diferentes ángulos e intensidad. La ultrasonografía se fundamenta en el principio impulso - eco donde los impulsos viajan a través de los tejidos a una velocidad constante hasta 59 encontrarse una superficie reflectante, que envía de regreso parte de ellos a la fuente emisora. Las ondas de sonido tienen las características siguientes: • Período: es el tiempo que demora en completarse un ciclo. • Amplitud: es la altura de la onda, equivalente a la intensidad o volumen del sonido, y se mide en decibelios ( dB ). • Velocidad: depende del medio que el sonido atraviese, en tejido blando es de 1 540 m/s. • Frecuencia: es el número de ciclos o períodos por segundo ( entre 2 y 10 MHz). • Longitud: es la distancia que la onda recorre en un segundo, o sea, 0,3 - 1,5 mm en el caso de los ultrasonidos. En correspondencia con el tejido escaneado, el color de las imágenes se traduce en distintas tonalidades de grises desde el blanco hasta el negro, donde se puede precisar imágenes con zonas híper ecogénicas - más blancas en el monitor - anecogénicas - negras o hipo ecogénicas - oscuras. Los líquidos ofrecen una imagen en negro, pero los gases, músculos, huesos y estructuras sólidas se muestran en blanco. Los límites entre dos tejidos adyacentes de distintas densidades se denominan interfase, las cuales nos posibilitan delimitar los órganos y tejidos objeto de investigación; mientras las densidades nos propician evaluar los cambios normales o anormales de los órganos correspondientes. 60 4.2.1 Tipos de ecógrafos. Los equipos ultrasonográficos utilizados en bovino son conocidos como escáner de modo B y tiempo completo con transductores lineales o sectoriales de 3,5, 5,0 o 7,5 MHz. Modo B indica la modalidad de brillo en el que la imagen es un corte bidimensional del órgano que se analiza. Por su parte, tiempo completo expresa que los impulsos se transmiten sucesivamente para conformar una visión instantánea de los tejidos examinados. Los ecógrafos sectoriales trabajan con un transductor sectorial y generan una imágen del tipo piramidal. Los ecógrafos lineales funcionan con transductores lineales generando imágenes de tipo rectangular. Los transductores lineales son usados más frecuentemente en reproducción bovina, ya que el recto tiene una amplia superficie plana. La ventaja de los transductores de sector es que necesitan una pequeña superficie de contacto. En la actualidad los ecógrafos emplean transductores convexos que son de frecuente aplicación en la tecnología de aspiración folicular y obtención de ovocitos para la fertilización in vitro. Figura 17 y 18. Imágenes del tipo lineal y piramidal. Drost, M. 2010 61 Figura 19 Ejemplo de dos tipos diferentes de ultrasonógrafos. Las sondas lineales tienen más superficie de contacto, las hay externas y transrectales. Para la práctica de ecografía en la reproducción de vacas es más conveniente una sonda lineal transrectal, esta misma sonda puede ser también aplicada para ecografía externa del aparato reproductor de las ovejas, cerdas y perras, por lo que se puede decir que es la sonda más versátil y amortizable económicamente. Figura 20.Realización de evaluación reproductiva con ultrasonógrafo de transductor lineal. 62 En la vaca es recomendable utilizar sondas lineales de 5,0 MHz, aunque los ovarios, útero y gestaciones hasta los 40 días se ven mejor con las sondas de 7,5 MHz,. Se aconseja trabajar con sondas de una sola frecuencia, que poseen mejor calidad de imágenes que las multifrecuencias. 4.3 Modo de utilización del ecógrafo. En el diagnóstico y valoración ultrasonográfica del sistema reproductor de la vaca es imprescindible lograr imágenes de alta calidad, disminuyendo la proporción de artefactos, por lo que la preparación de la hembra a examinar y de las condiciones de trabajo y protección contribuye notablemente a obtener una mayor precisión en la interpretación de dichas imágenes. En la práctica de rutina, la ultrasonografía se realiza en forma parecida a la exploración del sistema reproductor por vía transrectal; generalmente no es necesario vaciar la entrada del recto de su contenido de heces fecales, pero sí es recomendable hacerlo en estado de gestación de poco tiempo o en caso de vacas difíciles de realizar la ultrasonografía. Previamente a la introducción de la sonda debemos efectuar una breve exploración transrectal con el propósito de conocer la ubicación del útero y de los ovarios, pues no es recomendable palpar y realizar ultrasonografía simultáneamente ya que el operario debe concentrar su atención en la observación y valoración de las imágenes registradas en la pantalla del ecógrafo. Es importante precisar la importancia de lograr un buen 63 contacto del transductor con la mucosa transrectal para obtener imágenes de mejor calidad. La sonda se introduce por vía transrectal sujeta entre los dedos pulgar, índice y corazón y se sitúa sobre la localización del útero y ovarios, desplazándola suavemente; con movimientos controlados del transductor se logra una buena sucesión de imágenes correspondientes a los distintos cortes de los órganos o tejidos examinados - escaneados. 4.4 EXAMEN ULTRASONOGRÁFICO DEL SISTEMA REPRODUCTOR 4.4.1 Ultrasonografía del Útero El útero se examina en toda su dimensión con cortes transversales, longitudinales y oblicuos. Si los cuernos están vacíos es relativamente fácil su identificación mediante la visualización en la pantalla de redondeles de 2 a 4 cm de diámetro, pero si la vaca está en celo, entonces la luz uterina se observa con exudados, apreciándose una imagen de estrella oscura (anecogénica) en toda la longitud del cuerno. En la ultrasonografía del útero es fundamental el análisis de los cambios morfológicos durante el ciclo estral de la vaca. El incremento de volumen es evidenciado por el aumento de vasodilatación y edema y por la acumulación de líquido intrauterino, en el cérvix y vagina. El espesor del útero comienza a aumentar 3 a 4 días antes de la ovulación y disminuye después de esta hasta los 3 a 4 días del ciclo, luego permanece sin cambios durante el diestro (Quintela, 2006). 64 El líquido intrauterino comienza a ser visible a los 3 a 4 días previos a la ovulación y disminuye hasta los días 3 a 6 del ciclo. El mayor acúmulo de fluido coincide con la máxima producción de mucus en las fases de estro y metaestro. Mediante el transductor de 5,0 MHz se ha determinado la coincidencia del número de secciones transversales y la forma de los cuernos, confirmando la teoría de que el útero de la vaca está muy contorneado en el momento de máxima concentración de progesterona. La evaluación de la forma y tamaño uterino puede convertirse en indicador que refleja la presencia de progesterona o estrógeno circulante. La ultrasonografía es una técnica precisa en el diagnóstico de gestación, su mayor impacto consiste en la realización de una evaluación precoz y de alto porcentaje de certeza del concepto en el claustro materno, principalmente a partir del día 23 de gestación, lo cual nos permite incrementar la eficiencia reproductiva, programar aproximadamente las fechas de partos y la atención de las vacas próximas a parto (Stroud, 1994). 4.4.2 Ultrasonografía de los folículos ováricos. En el examen ultrasonográfico de los ovarios, los folículos se muestran a través de imágenes no ecogénicas de color negro en forma redondeada o en estructuras irregulares debido a la compresión de los folículos adyacentes, al cuerpo lúteo y a la compresión de los folículos por el estroma ovárico. Las medidas obtenidas de los folículos corresponden a las dimensiones del antro folicular y no incluye el diámetro de la pared ( Pieterse, 1991). 65 Los folículos preovulatorios se muestran como estructuras redondeadas anecogénicas de 1,5 a 2,5 cm o 15 - 17 mm (Calderón, 2010). La determinación de la dinámica de las ondas foliculares mediante ecografía es uno de los resultados de mayor impacto en la biotecnología de la reproducción bovina. El inicio de una onda folicular se caracteriza por la formación de un gran número de folículos simultáneamente, selección del folículo dominante y atresia de los folículos más pequeños, recesivos o subordinados. En ausencia de luteólisis el folículo dominante detiene su crecimiento, comienza su regresión y da paso a una nueva onda folicular. El día cero del ciclo es el primer día que desaparece el folículo pre ovulatorio y coincide con el surgimiento de la primera onda folicular. En la mayoría de las vacas y novillas se ha comprobado que tienen dos o tres ondas de crecimiento foliculares. En hembras con 2 ondas, estas se inician los días 0 y 10 del ciclo, mientras que en los de 3 ondas, comienza los días 0, 9 y 16. El folículo dominante es ovulatorio en la segunda onda en vacas con 2 ondas y en la tercera en animales de 3 ondas (Chaffaux, 1982) Figura 21. Ovarios en el Día 0 del Ciclo Estral. Día 0 = estro. El ovario izquierdo activo muestra un CL con regresión (funcional) y 2 folículos. 1 = folículo, 2 = cuerpo lúteo, 5 = estroma ovárico. Pieterse MC (1999) 66 4.4.3 Ultrasonografía del cuerpo lúteo. El cuerpo lúteo (CL) se muestra evidente en imágenes ecográficas alrededor de los 2 - 3 días posteriores a la ovulación. Esta estructura es hipoecogénica en la vaca, algo oscura y redondeada con 1,5 a 3,5 cm de tamaño en correspondencia con los estadios del CL hemorrágico, CL maduro o CL en regresión (Fissore, 1986) En investigaciones realizadas, entre el 30 y 80 % de los CL presentan cavidad central de 2 a 20 mm de diámetro con zona anecogénica oscura, probablemente conformada por el líquido folícular del folículo que originó al CL, y rodeada por tejido luteal; en estos casos, los CL son fisiológicos. La concentración de progesterona y el porcentaje de gestación no muestran diferencias significativas en vacas con CL con cavidad en comparación con los que tienen CL compacto. En hembras súper ovuladas también podemos evaluar la presencia de cuerpos lúteos (CL), pero cuando la respuesta es superior a 10 ovulaciones por ovario es difícil precisar el número de ellos. 4.4.4 Diagnostico de gestación por ultrasonografía. En la actualidad el uso de la técnica de ecografía para el diagnóstico precoz de la gestación o determinación temprana del feto es cada vez más sistemático 67 entre los veterinarios clínicos. Las investigaciones al respecto revelan imágenes de la dinámica embrionaria y fetal desde 3,5 - 4,0 mm alrededor del día 20 hasta 64,5 - 67,5 mm a los 2 meses de preñez. La morfología del embrión se transforma de una fina línea a una forma de herradura entre los días 20 a 25, pero luego se aprecia en forma de ele mayúscula. (Lewis, 2004). Figura 22. Gestación de 21 Días. El CL maduro (izquierda) y el pequeño paquete de fluido uterino (derecha) 21 días después del servicio documentado indican una posible preñez. Sin embargo, el embrión todavía no se ve así es que no es sabio hacer un diagnóstico de preñez tan temprano. Drost, M. 2010. 68 Trabajos realizados por Pierre et al. (1997) mencionan que es difícil detectar el embrión antes del día 20 post fertilización, sin embargo, el día 21 se notan los latidos cardíacos. En la práctica ecográfica a partir del día 25 es posible observar el cuerpo embrionario, mientras los latidos del corazón nos indican que vive. En este momento también es posible realizar las mediciones correspondientes, comprobar si su desarrollo es normal y conocer de la presencia de uno o más embriones. El diagnóstico precoz de la gestación necesita un mínimo de experiencia y especial cuidado; sobre todo debemos confirmar posteriormente la preñez, ya que existe una tasa normal de reabsorción embrionaria. La ecografía no es una técnica que sustituye el control de la gestación por palpación transrectal, que con experiencia es confiable, rápido y económico, pero si es una ayuda valiosa (Calderón, 2010). Los ultrasonidos de tiempo real - modo B - constituyen un medio confiable para el diagnóstico de gestación en bovinos a partir del día 26 en adelante, ya que se puede localizar y explorar el útero mediante la sonda o transductor con relativa facilidad en un tiempo mínimo (Quintela et al, 2006) Las investigaciones demuestran que entre los días 26 y 33 posterior a la inseminación artificial o servicio , existe una sensibilidad del 97,7% y una especificidad de 87,8%, por lo cual es también un método fiable para el diagnóstico de hembras no gestantes. En la práctica es importante determinar la presencia de un cuerpo lúteo funcional y la evaluación del embrión junto con 69 la visualización de los latidos cardíacos. La frecuencia del corazón disminuye de 188 latidos/minuto el dìa 20 de la preñez a 145 latidos/minuto aproximadamente el día 26 y luego se mantiene prácticamente constante hasta los 2 meses (Rupérez, 2004). Figura 23. Gestación de 28 Días. El embrión se puede ver a la izquierda. Longitud corona-grupa (CRL) = 9 mm. Un CL maduro es visible en el ovario ipsilateral. (Colloton, 2002). 70 Figura 24. Gestación de 29 Días. El embrión en desarrollo está delineado y parcialmente rodeado de fluidos fetales en este corte transversal del cuerno uterino grávido. (Colloton, 2002). Figura 25. Gestación de 31 Días. Preñez de 31 días. El embrión tiene una longitud corona-grupa de 11 mm. (Colloton, 2002).. 71 Figura 26. Gestación de 31 Días / Útero. Corte transversal del cuerno uterino. El embrión de 31-días es delineado por el fluido que lo rodea. Bartolome J (2006) Figura 27. Preñez de 35 días. El embrión tiene una longitud corona-grupa de 16 mm. (Colloton, 2002). 72 Figura 28. Esta es una preñez de 40 días. Note la delgada membrana amniótica rodeando el embrión. El fluído alantóico rodea la vesícula amniótica. (Colloton, 2002). Figura 29. Gestación de 41 Días. El embrión está rodeado de la vesícula amniótica. El fluido a la derecha es el fluido alantoico. El CL de preñez se muestra en el panel derecho. (Colloton,2002). 73 Figura 30. Gestación de 45 Días. A la derecha un feto de 45 días. Note la membrana amniótica delgada. El feto tiene una longitud corona-grup (CRL) de 29 mm. (Colloton, 2002). Figura 31. Gestación de 54 Días. Esta es una preñez de 54-días. El feto tiene una longitud corona-cola (CRL) = 48 mm. (Colloton, 2002). 74 Figura 32. Esta es una preñez de 60-días. Para esta etapa se puede determinar el sexo del feto. El tubérculo genital es visible a la izquierda. Diámetro de la cabeza fetal = 17 mm. Colloton J, 2006 Figura 33. Esta es una preñez de 68 días con una vista longitudinal de la cabeza fetal. La longitud de la cabeza = 29 mm. Colloton, 2006. 75 Figura 34. Cabeza Fetal - 71 Días. La densidad ósea está aumentando gradualmente y es más fácil de visualizar. (Colloton, 2002). Figura 35. Feto normal de 80 días en el cuerno izquierdo de una vaca Holstein. En el cuerno derecho había una vesícula amniótica vacía. Había un CL en el ovario izquierdo y no había CL en el ovario derecho. Bartolome J (2009) 76 Es posible observar gestaciones de menos de 18 días con un transductor de 7,5 MHz y de 18 a 20 o más con 5,0 MHz; sin embargo no es recomendable realizar diagnóstico de certeza antes de los 27 días. En estos casos la imagen no es ecogénica y corresponde al líquido amniótico y alantoideo. Alrededor de los días 25 - 27 se puede distinguir el embrión como un punto blanco (ecogénico) dentro de una zona negra (anecogénica). El líquido alantoideo se incrementa rápidamente después del día 28 y se extiende por todo el cuerno gestante. Por su parte, la membrana amniótica se distingue nítidamente en las imágenes ecográficas posteriores a los 30 días de preñez (Pierre et al., 1997). El error diagnóstico por ecografía es mínimo cuando se adquiere cierta experiencia. Diagnosticar una vaca gestante es fácil, por lo tanto, donde debemos tener un máximo de precisión es en el examen de una hembra vacía. Siempre es recomendable tener en cuenta los siguientes elementos: • Ciertas vacas anéstricas con útero flácido retienen líquido intrauterino. Y en estos casos la ecografía de los ovarios nos indica la ausencia de estructura luteal. • Algunas vacas en la fase estral acumulan líquido de celo en la curvatura mayor del útero, siendo las imágenes similares a una gestación precoz. La ecografía de los ovarios nos revela la presencia de un folículo pre ovulatorio y ausencia de cuerpo lúteo. 77 • En los casos de piometras, su contenido francamente purulento es más ecogénico que los líquidos que acompañan la preñez con un punteado blanco intenso. • En el diagnóstico de reabsorción fetal se aprecian imágenes con menos líquidos, falta de viabilidad, rotura de membranas fetales y granos ecogénicos flotando dentro del líquido, que corresponden a restos de las membranas y del feto. La reabsorción ocurre en un 5-6 % de las vacas que se diagnostican por ecografía entre los 27 y 90 días (Rupérez, 2004). • El diagnóstico de la mortalidad embrionaria y fetal se sustenta en indicios tales como la observación de las membranas fetales sin feto, cuernos uterinos sin feto y sin metritis; presencia de fetos sin latidos cardíacos, ni pulso en el cordón umbilical, sin movimiento en general y de aspecto y desarrollo anormales (Pierre et al., 1997). 78 CAPITULO 5: DIAGNÓSTICO DE GESTACIÓN POR PALPACIÓN TRANSTRANSRECTAL 5.1 INTRODUCCIÓN El diagnóstico consiste en la evaluación clínica del aparato genital mediante un examen a través del recto, el cual se utiliza como si fuera un guante, aprovechando la posición paralela de los genitales y del recto. El diagnóstico de gestación se basa en la observación al tacto de cambios a nivel del útero, lugar donde se asienta la gestación en la vaca (Salas, 2008) . De ahí que algunos de los signos secundarios del diagnóstico se apoyan en la detección de una asimetría de los cuernos uterinos (el gestante aumenta de tamaño, a partir de los 30 días), la fluctuación de líquidos fetales y un menor tono (el gestante es más blando y gelatinoso).Para determinar que una hembra bovina se encuentra gestante o vacía, se debe examinar a través de la palpación el útero completo, es decir cuernos y cuerpo 5.2 SIGNOS POSITIVOS DE PREÑEZ. El diagnóstico precoz positivo se basa en 4 signos: tres de ellos ligados a la detección de las membranas placentarias fetales que lo rodean y otro, al propio feto. Para un diagnóstico de gestación temprano y preciso en hembras bovinas se requiere conjuntar la detección de algunos signos como son: Presencia de Cuerpo lúteo Membrana fetal deslizable (MFD) La vesícula amniótica Asimetría en los cuernos del útero 79 Figura 36. Procedimiento para identificación de membrana fetal deslizable. Drost, M. 2010 Figura 37. Identificación amniótica. Drost M. 2010. de vesícula Fig. 38. Un presunto diagnóstico de gestación por palpación transrectal puede ser realizado con base en el hallazgo de la asimetría de los cuernos y la presencia de fluido en el cuerno más grande del mismo lado donde hay un cuerpo lúteo totalmente desarrollado. Esto es particularmente válido en novillas. Drost, M. 2010. 80 A partir de los 28 a 30 días del servicio es posible detectar el escurrimiento de la membrana corioalantoidea y el deslizamiento de la vesícula amniótica dentro del lumen uterino. No existe unión de las membranas fetales en las áreas interplacentomales, en las cuales se pellizca ligeramente la pared uterina para comprobar el escurrimiento de la membrana corioalantoidea. Una parte del líquido placentario llena parcialmente el lumen uterino, lo que favorece que la vesícula amniótica se deslice suavemente entre el dedo pulgar e índice, dando una sensación característica en caso de una preñez temprana. Esta sensación es similar a la de deslizar un cordón tenso y delgado entre los dedos. Es sólo a partir de los 75 días que es posible detectar la presencia y desarrollo de los placentomas, al igual que practicar el balotaje interno para detectar la presencia del feto. 5.3 PROCEDIMIENTO. La práctica de la palpación requiere de un equipo sencillo y poco costoso. Es conveniente que el profesional trabaje con guantes plásticos de palpación para evitar la suciedad y el contagio de enfermedades infecciosas. El equipo veterinario se completa con un guante tipo industrial en la otra mano, botas de hule, overol y/o delantal impermeable, agua de preferencia caliente y lubricante para el guante de palpar (Calderón, 2011) El examen genital se inicia identificando el cérvix, lo cual es imprescindible para orientarse en el espacio pélvico y ubicar los cuernos uterinos hacia delante y los 81 ovarios hacia ambos lados. El cérvix destaca en el eje medio como una estructura cilíndrica, dura, irregular y más o menos gruesa, deslizando la mano por debajo del ilion y sobre el piso de la pelvis. En caso de no ser localizada, se continúa el deslizamiento a mayor profundidad, sobre el borde pélvico o descendiendo hacia la cavidad abdominal hasta que se localice. En esta fase es habitualmente necesaria la retracción del útero hacia la cavidad pelviana para facilitar la exploración genital. Los genitales se retraen tirando del cérvix hacia atrás, colocándolo de manera que descanse entre el dedo pulgar, el índice y el ilion. Luego la mano se desliza hacia delante y alrededor del cuerno cercano, fijándolo de forma similar a como hizo con el cuello, ubicando el ligamento intercornual ventral y retrayendo el útero, tirándolo hacia atrás. En caso que el útero no se puede agarrar directamente, se debe ubicar el ligamento ancho y retraerlo parcialmente aplicando tracción en el ángulo formado por su unión al útero. En la mayoría de los casos, el uso de esta técnica previene que el útero se envuelva bajo el ligamento ancho. Después que se tiene en esta posición, se palpa la longitud total del cuerno cercano utilizando en forma habitual los dedos pulgar e índice. Los otros dedos permanecen alrededor de ese cuerno; el dedo pulgar se coloca entre los cuernos y luego por debajo del cuerno más alejado; a continuación, los dedos pueden girarse por encima de la superficie dorsal de ese cuerno, pudiéndose palpar en esta posición en su longitud total. Esta técnica no requiere que el útero se retraiga tan completamente como sucede cuando el ligamento intercornual ventral se usa para la tracción en el método alternativo (Kumar, 2009). 82 Figura 39. Procedimiento de palpación transrectal. Calderón, 2011. Se debe encontrar al menos uno de los signos positivos de preñez antes de seguir con el proceso. Si ha ocurrido un tiempo considerable después del parto, o es una hembra nulípara, lo primero que se tiene que hacer es descartar a través de la palpación transrectal, la gestación mayor a 45 días, de haber duda por la presencia de un cuerpo lúteo, se debe hacer otra exploración en un periodo considerable, que de estar gestante permita realizar un buen diagnóstico. Las gestaciones mayores solo requieren: La palpación del feto La palpación de placentomas (cotiledones/carúnculas) Detección del frémito 83 (Wattiaux, 2010) 5.4 DIAGNÓSTICO DE GESTACIÓN TEMPRANA. Para la determinación de la gestación en etapas tempranas se tiene que tomar en cuenta la retracción del útero. El útero es retractable hacia la cavidad pélvica durante la gestación hasta los 75 días aproximadamente, la posibilidad de retraerlo, permite precisar más el diagnóstico, especialmente cuando esta caído hacia la parte baja de la cavidad abdominal. Para iniciar la palpación temprana de una gestación lo primero que hay que determinar, es la presencia del cuerpo lúteo, ya que ne caso de no identificarse, se descarta la posibilidad de gestación (Wattiaux, 2010) Se debe verificar que exista retractilidad del útero hacia la pelvis además de la presencia del cuerpo lúteo. De existir presencia de cuerpo lúteo, se continúa con el examen del útero, para determinar si existe asimetría en los cuernos uterinos, aunque muchas veces esta se detecta antes de determinar la presencia del cuerpo lúteo. En una gestación de de entre 35 días (vaquillas) y 45 días (vacas) normalmente, el cuerno lateral al cuerpo lúteo se debe sentir ligeramente más grande al opuesto (Zemjanis, 1980) 84 1 Figura 40. Hallazgos (35 – 40 días) 1.- Asimetría en cuernos uterinos 2 Presencia de cuerpo lúteo 2 Al ser detectada la asimetría, se debe buscar sentir la presencia de liquido (algunas veces se detecta desde los 28 días) en el cuerno más grueso, esto es relativamente fácil, ya que las paredes del útero se van haciendo más delgadas. La presencia de líquido no es determinante para dar a una hembra bovina como gestante, como ejemplo se puede mencionar que en caso de piometras se detecta líquido sin haber gestación (Kumar, 2009) Fig. 42. Retracción indirecta. El cuerno uterino es Fig.41. Retracción directa puede realizarse si el ligamento intercornual esta accesible para alcanzarlo y desenrollar los cuernos atrapado con los dedos palpado y recorrido caudalmente hasta alcanzar el ligamento intercornual . 85 5.5 HALLAZGOS A LA PALPACIÓN TRANSRECTAL DURANTE LA GESTACIÓN. 30 dias: El signo positivo es la membrana fetal deslizable (MFD) que se puede percibir desde los 28 días. Para ello, usando la técnica de palpación con cambio de posición de la mano, desplazaremos los dedos a través de los cuernos uterinos, sintiendo una tercera estructura, como cuando nos tocamos en la pierna, la piel, el interior y el pantalón, la piel es la equivalente a la membrana fetal. El síntoma es la presencia de líquido en el cuerno uterino dónde hemos sentido la MFD, lo cual no es fácil de palpar, pero con mucha concentración se puede lograr. A veces, debido a una onda folicular, los cuernos se tornan tónicos, confundiéndose con un diagnóstico de no gestación prediciendo de ésta manera un próximo calor. Para personas con poca experiencia, es aconsejable no deslizar los dedos con brusquedad, por el peligro de producir hemorragia en la vesícula amniótica, con la consecuente reabsorción del embrión (Lewis, 2004) 35 dias: El cuerno grávido mide 2.5 cm. de diámetro en su parte más ancha. La vesícula amniótica, signo positivo, se puede percibir, deslizando los dedos a través del cuerno asimétrico, como una protuberancia flotante. Las paredes de los cuernos están delgadas y se siente la presencia de líquido, éste es el 86 síntoma de preñez. Los cuernos permanecen en la cavidad pélvica y el cérvix, punto de referencia, es móvil, permitiendo hacer el cambio de posición de la mano. La membrana fetal deslizable, MFD, mide de 45 a 61 centímetros de largo y abarca ambos cuernos, es palpable a ésta edad con relativa facilidad, deslizando los cuernos entre los dedos. Figura 43. Medidas de la Mano. El promedio de las medidas de la mano de un hombre y una mujer para evaluar el tamaño del tracto reproductivo o del feto por via transrectal. La LCC (longitud de la corona a la cadera) es de aproximadamente 9 cm a los 2 meses, 22 cm a los 4 meses, 44 cm a los 6 meses, de 80 cm a los 8 meses, y de 100 cm a los 9 meses. The Drost Project, 2010. A los 38 días se produce la unión de los cotiledones con las carúnculas, formando así los placentomas, siendo ésta la edad de la gestación que implica un mayor riesgo de producir reabsorción embrionaria, por consiguiente es necesario tener mucho cuidado con la manipulación de ambos cuernos. 87 Cuadro 2. Criterios para diagnóstico de gestación por palpación transrectal en vacas en los días 28 a 58 de gestación. (Román et al, 2009) Etapa gestación (días) 28-31 Deslizamiento Vesícula amniótica Tamaño fetal Placentomas Arteria uterina Cabeza fetal Hilo localizado en 1 cuerno Posición del útero Cérvix, Pelvis ½ dedo ancho 7 mm. Cérvix, Pelvis 1 dedo ancho 15 mm. Cérvix, Pelvis 48 2 dedos ancho 35 mm. Cérvix, Pelvis 52 3 dedos Ancho 55 mm. 58 4 dedos ancho 75 mm. 35 42 Pequeño cordón en 1 cuerno Es aquí donde cambia le denominación del conceptus, siendo hasta el día 38 embrión y feto a partir del día 39. 42 días: El cuerno grávido mide 4 cm. de diámetro; se percibe no solamente la presencia de líquidos sino la membrana fetal deslizable. 88 45 días: Continúa la asimetría uterina en y el feto tiene la forma y tamaño de un limón persa o una pelota de ping pong en vaquillas. En la parte ventral del cuerno grávido se palpa la banda de tejido conectivo que contiene las venas, las arterias y los nervios que irrigan e inervan esta parte del útero (Calderón,2011). 49 días: El cuerno grávido mide 5 CMS de diámetro; el feto ahora se palpa con facilidad. El cuerno gestante, en un porcentaje alto de las veces, gira 180 grados sobre su eje, colocándose el no preñado encima, confundiéndose muchas veces el diagnóstico con un embarazo de 30 días, por omitir las dos reglas de oro de la reproducción: " no se puede decir que una vaca esta vacía a menos que se hayan recorrido los dos cuernos en toda su longitud y no se puede decir qua una vaca esta preñada a menos que se haya palpado un signo positivo de preñez‖ ( Kumar, 2009). 60 días: El cuerno grávido mide 6 cm. de diámetro; el feto se palpa fácilmente al igual que la membrana fetal deslizable, MFD. Con mucha concentración es posible percibir los cotiledones que miden 0.5 centímetros de diámetro y las paredes del cuerno grávido se tornan cada vez más delgadas. El cérvix continúa siendo móvil, permaneciendo en la cavidad pélvica y la mejor manera de palparlo es ahuecando la mano para poder acunar el cuerno que tiene el feto (Wattiaux, 2010). 89 Figura 44. Conceptus. Día 55 La membrana corioalantoidea se removió sobre la vesicular amniótica Fuente Drost project Figura 45. Feto al Día 60 El feto es del tamaño de un ratón. La vesícula amniótica esta perdiendo su turgencia sobre el feto, esto se puede sentir directamente por palpación. Pieterse MC (1999) 90 Figura 46. Conceptus Normal al Día 70. Un feto de 70 días esta localizado en el cuerno derecho. Las tijeras están apuntando al cuerpo del útero. El arreglo de cuatro líneas de cotiledones es fácilmente identificable. Existen aproximadamente 15 cotiledones por fila por cuerno, para un total aproximado de 120. Drost M (1982) 70 días: Comienza el descenso del cuerno grávido hacia la cavidad abdominal y deslizando la pared del mismo entre los dedos se logra palpar los cotiledones que miden 0.75 cm. de diámetro. El signo positivo son los cotiledones y se pueden medir para calcular el tiempo de gestación, además el feto se palpa fácilmente (Wattiaux, 2010). Figura 47. Conceptus de 2.5 meses. Las membranas corio-alantoideas sobre la vesícula amniótica han sido removidas. Aun visualmente, se puede apreciar que la vesícula se ha tornado ligeramente flácida. Los cotiledones pequeños son también visibles. Drost M (1982) 91 Figura 48. Conceptus normal al dia 80. El feto de 80 días esta localizado en el cuerno derecho, es del tamaño de una rata pequeña. La placenta cotiledonaria esta demarcada por la cuatro filas de cotiledones. Las arterias cotiledonaria y las venas convergen a lo largo de la curvatura menor del utero para conectarse con los vasos umbilicales. Drost M (1982) 80 días: Tamaño de los cotiledones: 1.0 CMS. Continúa el descenso; el cérvix comienza a ser fijo por el contrapeso del contenido de la preñez. Muchas veces el ligamento ancho del útero impide una manipulación correcta de los cuernos, para solucionar este inconveniente se debe desenrollar el cuerno gestante, que está oculto debajo del mismo ligamento (Kumar, 2009). 90 días: Tamaño de los cotiledones: 1.5 CMS. Continúa el descenso. El cérvix está un poco más fijo y el cuerno grávido se encuentra generalmente en el reborde pélvico. La arteria media uterina mide entre 0.8 y 1.5 CMS de diámetro, mientras que en las vacas vacías mide la mitad y se debe evitar confundirla con la arteria femoral que siempre permanece fija (Kumar, 2009). 92 En vacas muy grandes se puede dificultar el diagnóstico por la distancia entre el contenido de la gravidez y la entrada del recto (Calderón, 2010) En palpadores primerizos, es un error común confundir la vejiga con una preñez de 90 días (Calderón, 2010). 100 días: Tamaño de los cotiledones: 2.0 CMS. El descenso continúa. Aún se puede delimitar el cuerno grávido. 120 días: Tamaño de los cotiledones: 2.5 CMS. Sigue el descenso; todavía se puede diferenciar el cuerno grávido del no grávido. El cérvix está fijo y los cotiledones se palpan mejor colocando la mano con la palma extendida hacia abajo yéndose contra el reborde pélvico, como buscándole la ubre a la vaca (Wattiaux, 2010). 93 Cuadro 3. Criterios para diagnóstico de gestación por palpación transrectal en vacas en los días 60 a 115 de gestación (Román et al, 2009). Etapa Gestació n (dias) 60 Deslizamient o Membrana fetal Cordón en 2 cuernos 90 Tamañ o fetal Ancho mano sin pulgar, 90 mm. Ratón Placento mas Frémito Cabeza Fetal Posición del útero Empieza descenso Ancho mano con pulgar 105 mm. 65 80 Vesícula Amniotic a 1 dedo ancho 15 mm. Cordones grandes en 2 cuernos Tamaño de chicharo s 3 mm. Solo 1 lado. Rata 2 dedos ancho, 35 mm. Descendiend o 3 dedos ancho 55 mm. Descendiend o Descendiend o 100 Moneda pequeña 4 dedos ancho 75 mm. 115 Moneda mediana Ancho mano sin pulgar 94 150 días: Cuando la gestación es de 5 meses, el volumen es mayor, pero se dispersa mas en la cavidad abdominal, el feto aun puede sentirse aunque se encuentra en descenso hacia la parte ventral del abdomen. El crecimiento de los cotiledones continúa y tienen un tamaño similar al de las corcholatas de refresco (aproximadamente 2.5 cms.) (Calderón, 2011) Al finalizar el quinto mes de preñez el útero está en el piso de la cavidad abdominal. Se debe de tener especial atención en no confundir los ovarios con cotiledones de 3.0 cms (Wattiaux, 2010). 180 días: A ésta edad de la gestación el útero está completamente descendido, por lo que el mejor indicador con el que se cuenta en esta etapa de la gestación son los cotiledones que miden 4.0 cms de diámetro y aún es posible palpar el feto. El tamaño del feto asemeja al de un perro mediano Un movimiento importante a realizar en gestaciones de 150, 180 y 210 días, es dirigir la mano no solamente por el centro de la cavidad abdominal sino por el lado izquierdo y por el derecho (Kumar, 2009). 95 Figura 50. Tamaños Fetales. A los 2 meses de gestación el feto es del tamaño de un ratón, a los 3 meses del tamaño de una rata, a los 4 meses es como un gato pequeño, al 5 mes como un gato grande, y a los seis meses como un perro Beagle. Drost M (1982) Figura 51. Gestación de 150 días 96 Figura 52. Gestación de 6 meses 210 dias: El tamaño de los cotiledones es de 5.0 cms. La arteria media uterina mide 1.25 cms de diámetro (Calderón, 2011) Hacia finales de los 210 días y comienzo de los 225 el feto comienza el ascenso, permitiendo que se palpe fácilmente y mide de 60 a 80 cms de largo ( Kumar, 2009). 240 días: El tamaño de los cotiledones es de 6.0 cms. La arteria media uterina mide 1.50 cms de diámetro. El feto se encuentra en la parte media de la cavidad pélvica y mide de 70 a 90 cms de longitud. En el octavo mes, el feto se detecta con mucha facilidad, casi al introducir la mano (Calderón, 2011) 97 270 días: El tamaño de los cotiledones es de 8.0 cms. La arteria media uterina mide 2.0 cms de diámetro. El feto se encuentra completamente en la cavidad pélvica, palpándose generalmente las manos del mism o al entrar al recto de la vaca Figura 53. Posición normal de la cría parto. al Figura 54. Membranas fetales normales al o cerca del término. Note las 4 filas de aproximadamente 15 cotiledones cada una por cuerno, y el muñón umbilical y los vasos cotiledonares. Drost M (1978) 98 CAPÍTULO 6: PARÁMETROS Y REGISTROS REPRODUCTIVOS. 6.1 INTRODUCCIÓN. La fertilidad del hato ganadero ha sido medida estudiando distintas características reproductivas en las vacas, lo cual ha derivado en la existencia de diferentes métodos o normas para apreciar el estado reproductivo del ganado. Estos métodos van desde la obtención de parámetros simples como el intervalo entre partos hasta índices más complejos desde el punto de vista de su estructura, las cuales al incluir un mayor numero de parámetros o medidas, buscan encontrar un reflejo más fiel de la fertilidad real y comparable entre los distintos ambientes y tipos animales. Aun así, resulta difícil que los profesionales, técnicos o investigadores, de distintas escuelas coincidan con señalar y utilizar los mismos parámetros o y ambientes índices, en su definición y amplitud correcta. 6.2 REGISTROS REPRODUCTIVOS. Requisitos indispensables e imprescindibles para evaluar la eficiencia reproductiva son la implementación y adecuada utilización de los registros reproductivos. Un alto porcentaje delas unidades de producción aun en la actualidad en nuestro medio, no lleva registros continuos y adecuados, de producción y reproducción, lo cual dificulta la evaluación de los hatos. Los registros productivos son la base para la evaluación de la eficiencia reproductiva. 99 Algunas características importantes que deben poseer los registros son la sencillez y facilidad en el manejo de los datos, capacidad para capturar la información necesaria, flexibles, de modo que permitan aumentar o disminuir el numero de datos o animales, pero fundamentalmente deben ser objetivos, duraderos y económicos. Cada vaca debe tener un número individual de identificación, y la tarjeta o registro productivo en la que se anotan todos los eventos reproductivos usando abreviaturas. Los principales eventos que se deben de registrar son: Ultimo parto Condiciones del parto Condición corporal al parto (de ser posible, registrar peso en kgs) Exámenes realizados, ya sea palpación transtransrectal (PR) o ultrasonografía (US) Peso y sexo de cría al nacimiento Calores y servicios, especificando si se trata de monta natural (MN) o inseminación artificial (IA) Condición gestante o no gestante, y de ser gestante, una fecha aproximada de parto. 100 Cada evento se debe de registrar con fecha y, de ser necesaria, alguna observación de importancia (Tratamiento suministrado, recomendaciones de atención y cuidado). La entrada de datos deberá ser regular, correcta, ya sea en la introducción al servicio, fechas de servicio o de retornos en celo, diagnóstico de preñez o de problemas reproductivos, identificación de los toros, semen, inseminador, o en su defecto fecha y causa de desecho (Roman et al, 2009). Todos los datos anteriores al igual que el de otros eventos de la vida productiva de los animales, son los que nos permitirán evaluar la eficiencia reproductiva; de ahí que es necesario resaltar la importancia de el manejo correcto de los registros productivos, lo que permitirá la toma de decisiones correctas, y orientar de manera mas segura los procedimientos a seguir para mantener o mejorar la eficiencia reproductiva en los hatos ganaderos. 101 6.3 PARÁMETROS REPRODUCTIVOS. En la siguiente tabla se encuentran los principales parámetros reproductivos y sus valores ideales. Cuadro 4. Cálculo de parámetros reproductivos. (Román et al, 2009) Parámetro Cálculo Meta Edad a primer servicio Peso a primer servicio Edad a primer parto Peso a primer parto Intervalo parto 1er celo Intervalo parto 1er servicio Días abiertos Intervalo entre partos Servicios por concepción Fertilidad Gestación Gestación Efectiva Vacas gestantes al DG Desecho por reproducción Gestantes con < 3 servicios Edad a 1er servicio/total de vaquillas Peso a 1er servicio de vaquillas Edad a 1er parto/total de vaquillas Peso a 1er parto/total de vaquillas Días a primer celo/total de vacas Días a primer servicio/ total de vacas Días parto a concepción/total de vacas Días entre dos partos/total de vacas Servicios preñadores / total Vacas preñadas/vacas servidas x 100 % celos detectados x % fertilidad Vacas gestantes/ expuestas x 100 Gestantes al DG/diagnosticas x 100 Desecho reproduct/total desecho x 100 Gestantes < 3 servicios/ total gest x 100 Vacas con retención/total partos x 100 Abortos/ total preñeces x 100 Desecho involuntario/total de vacas x 100 Desecho total / total de vacas x 100 Menor a 15 meses. Mayor a 340 kg 24 meses 545 kg Menos de 45 días Menos de 60 días Menos de 100 días Menos 380 días Menos de 2.0 Mayor a 50 % Mayor a 50 % Mayor a 50 % Mayor a 85 % Menor a 6 % Mayor a 85 % Retención placentaria Abortos Desecho involuntario Desecho total Menor a 10 % Menor a 6 % Menor a 15% 25 – 30 % CONCLUSIONES 1. El manejo reproductivo es un factor primordial para elevar o mantener la productividad en cualquier unidad de producción pecuaria. 102 2. El diagnóstico de gestación es una herramienta mínima y básica para el manejo reproductivo óptimo de los animales. 3. Existen dos alternativas accesibles para el diagnostico de gestación en los bovinos; palpación transrectal y ultrasonografía. 4. Se establecieron las prácticas más importantes, así como los hallazgos y características más importantes que un estudiante, ganadero o técnico deberá conocer para hacer un correcto diagnostico de gestación. 5. El material contenido en el presente manual permite que el usuario se capacite con mayor facilidad, toda vez que además de la teoría, el material gráfico complementa el proceso. LITERATURA CITADA 103 Bartolome, J.A. Endocrinología y fisiología de la gestación y el parto en el bovino. Taurus, Año 11, Nro 42, 20-28. ISSN 1515-3037 Calderón, R. Técnicas de diagnóstico del estado reproductivo de las hembras bovinas por palpación rectal. UNAM,2011. Pp 5- 19. Chaffaux, S. Evolution de I'image Échographique de produit de conception chez la vache. Bull. Acad. Vét. Fr.,55:213-221. Colloton, J. 2002. Pictorial Guide to Ultrasonographic Pregnancy Diagnosis in the Bovine. Steuart Laboratories and Bovine Services, LLC. Pp 10- 35. DesCôteaux L, Colloton J, Gnemmi G. 2009 Practical atlas of ruminant and camelid reproductive ultrasonography. Ames (IA): Wiley-Blackwell; 2009. DeJarnette, M. Nebel, R. "Select Sires." Select Sires: Select Reproductive Solutions. Consultado el 10 Oct 2011. http://www.selectsires.com/programs/docs/reproductive_anatomy.pdf>. 104 Díez, Natalia. (1997). Fundamento de la ecografía. En: Tamayo, M. et al. 5° Curso Práctico de Reproducción en Vacuno - Cursos Veterinarios Práctico de Navarra, Facultad de Medicina Veterinaria, UNAH, La Habana, Cuba. Diaz T, Pancarci SM, Drost M, Schmitt EJ, Ambrose JD, Fredriksson WE, Thatcher WW. (2001). Effects of the persistent dominant follicle on the ability of follicle stimulating hormone to induce follicle development and ovulatory responses. J. Dairy. Sci. 84:88-99 Diskin, M.G. and Sreenan, J.M. 2000. Expression and detection of oestrus in cattle. Reproduction Nutrition Development 40, 481–491. Driancourt, M.A. (2001) Regulation of ovarian follicular dynamics in farm animals. Implications for manipulation of reproduction. Theriogenology 55, 1211–1239. Drost, M. 2010. Visual Guide for Bovine Reproduction. The Drodt Project. http://www.drostproject.org/sp_bovrep/guide.html Eli, M.2005.Manual de reproducción en ganado vacuno. Zaragoza. Ed. Servet 105 Fissore, R.A. The use of ultrasonography for the study of the bovine reproductive tract. II. Non pregnant, pregnant and pathological conditions of the uterus, Anim. Reprod. 1986, 12: 167-177. Fricke P.M.2011. When to identify non-pregnant lactating dairy cows using transrectal ultrasonography and why. University of Wisconsin- Madison. American Dairymen. Enero 2011.pp 1-5. Garrido , Angel. "Engormix." La Reproduccion en el Sistema Doble Proposito.. N.p., n.d. Web. 1 Oct 2011. <http://www.engormix.com/MA-ganaderiacarne/genetica/articulos/reproduccion-sistema-doble-proposito-t2885/p0.htm>. Gázquez A., Blanco, A. 2004.Tratado de Histología Veterinaria. Masson, ED Barcelona, España.:.. pp 381-399. Green C. 2011. Pregnancy Checks: Why frequency and method matter. Genex Cooperative Inc. Consultado en agosto del 2011 http://genex.crinet.com/page3702/PregChecksWhyFrequencyAndMethodMatter 106 Hafez, E.S.E. y B. Hafez. Reproducción e inseminación artificial en animales.. 7. McGraw Hill, 2005. 17-30. Hernández J, Zavala J. 2007 Reproducción Bovina (1ra Ed.). UNAM. Hickley, G. 1990. Pregnancy diagnosis in dairy cattle: Present status and future prospects. Cornell Vet., 80 (4): 299-302. Lewis R. Pregnancy checking transrectal palpation versus ultrasound. Gelbvieh guide,Spring. 2004. Magnasco R. P., Martín Magnasco y G. Domínguez. 2005. Más allá del tacto rectal. En Sitio Argentino de Producción Animal. Consultado Agosto de 2011. http://www.produccionanimal.com.ar/produccion_bovina_de_leche/produccion_bovina_leche/100tacto.pdf Pérez Martínez, M. Romano, M. 1996. "Interacción inmunoendocrina en el útero: El papel de las hormonas esteroides sexuales.." Ciencia Veterinaria. 192-196. 107 Pierre, M., Martínez, B. y Méndez, MJ. 1997. Uso de la ecografía en la reproducción del ganado vacuno. Frisona Española - Temario del Criador Enero/Febrero 1997, pág. 114-118. Pieterse, MC. 1999. El ultrasonido en la reproducción bovina: aplicaciones en diagnóstico y tratamiento. Taurus 1 (1). Pp 10- 26. Purohit G . 2010. Methods Of Pregnancy Diagnosis In Domestic Animals: The Current Status. WebmedCentral REPRODUCTION 1(12):WMC001305. pp 5-15. Quintela,L. Diaz,C. Herradón, P. Peña, M. Becerra, J.2006. Ecografía y reproducción en la vaca. Universidad de Santiago de Compostela. Santiago de Compostela, España. Pp 10-50. Román, H. Ortega, L, Hernández, L. Diaz, E. Espinosa, JA. Nuñez, G. Vera, HR. Medina, M. Ruiz, F. Producción de leche de bovino en el sistema de doble propósito.Centro de Investigacion regional golfo centro.2009.Pp 121-144. Rupérez R (2004), Aplicación de la ecografía en la reproducción bovina, Artículos del Colegio de Veterinarios de la Provincia de Buenos Aires,Argentina. 108 Rutter B., A. Russo. 2002 Fundamentos de la fisiología de la gestación y el parto de los animales domésticos. Editorial Eudeba Argentina pp.15-16 Salas G.2008. Evaluación reproductiva en bovinos: Una práctica para mejorar la eficiencia del hato. Manual práctico. Universidad Michoacana de San Nicolas de Hidalgo. Morelia, Mex. pp. 5-12 Sisson, S., Grossman, JD., Getty, R. 2005. Anatomía de los animales domésticos. 5ta. Ed. En español, reimpresión 2005. Editorial Masson S.A. Barcelona, España. Pp1040-1057. Stroud, B.K. (1994). Clinical applications of bovine reproductive ultrasonography. The Continuing Education Article 7, Texas. Squires, E. J. 2003. Applied animal endocrinology, CABI International Publishing. USA. Thibault, C, Levassaur, M.C.2001. La reproduction chez les mamifères et l’homme. Ed. Ellipses. Paris, Francia. pp 367- 376. 109 Wattiaux A. 2010. Palpación rectal en Vacas. Instituto Babcock para la Investigación y Desarrollo Internacional de la Industria Lechera Universidad de Wisconsin-Madison Wiltbank, M.C. 1998 .Information on regulation of reproductive cyclicity in cattle. In: Williams, E.I. (ed.) Proceedings of the Thirty-first Annual Conference of the American Association of Bovine Practitioners. Frontier Printers, Spokane, Washington, pp. 26–33. Wisnicky, W, L. E. Cassida. 1948. A manual method for diagnosis of pregnancy in cattle. J. Am. Vet. Med. Assoc. 113:451 110