Download análisis de mutación del gen braf en carcinoma papilar de tiroides

SAEM 2013
COMUNICACIONES ORALES
ANÁLISIS DE MUTACIÓN DEL GEN BRAF EN CARCINOMA PAPILAR DE TIROIDES
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Ilera, V.1; Dourisboure, R.2; Colobraro, A.3; Silva Croome, M.C1.; Olstein, G.4; Zunino, A.1;
Lowenstein, A.1; Reyes, A.1; Gauna, A1.
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División Endocrinología; 2Sección Biología Molecular, División Laboratorio Central; 3División Anatomía Patológica;
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División Cirugía; Hospital General de Agudos José María Ramos Mejía. - Urquiza 609. 1221 CABA. Argentina [email protected]
Introducción: La mutación puntual del oncogen BRAF en el codón 600 está implicada en la tumorigénesis del
carcinoma papilar de tiroides (CPT). Constituye la alteración genética más común del CPT y ha sido reportada
sólo en ciertas variantes del mismo. La presencia de la mutación parece asociarse con parámetros implicados en
un mayor riesgo de persistencia o recurrencia de la enfermedad.
Objetivos: 1) Analizar en estudio preliminar la prevalencia de la mutación del oncogen BRAF en pacientes
operados por CPT. 2) Describir características clínicas, anatomopatológicas y estadificación en los pacientes con
CPT en relación a la presencia o ausencia de la mutación. 3) Analizar la evolución a corto plazo en relación a la
mutación.
Material y métodos: estudio prospectivo en 13 pacientes consecutivos operados en nuestro hospital por CPT
entre noviembre de 2011 y agosto de 2012. Se realizó análisis de mutación de BRAF en la pieza quirúrgica a partir
de muestras ≤ 0.5 × 0.5 × 0.5 cm de tejido nodular y tejido adyacente no nodular en fresco. Se extrajo ADN y se
amplificó según técnica de ARMS PCR (Amplification Refractory Mutation System- Polymerase Chain Reaction)
para detectar el alelo mutado. El producto amplificado se corrió en gel de agarosa para analizar el patrón de
bandas. Al momento de realizar el estudio genético el operador desconocía el diagnóstico anatomopatológico de las
muestras. Se efectuó secuenciación directa del gen en 4 muestras. Se consignaron datos clínicos, anatomopatológicos
y de evolución de los pacientes.
Resultados: Se incluyeron 9 mujeres y 4 hombres, edad promedio 42.38 años. Se realizó tiroidectomía total
en todos los casos y todos fueron CPT: 9 variante clásica, 2 variante folicular, 1 esclerosante difuso y 1 cribiforme.
Según TNM 8 fueron estadio I, 4 estadio II y 1 estadio III. Se realizaron 24 análisis para detección de mutación
del BRAF. Dicha mutación estuvo presente en 10 de 13 CPT (77 %) y la misma estuvo ausente en todas las
muestras de tejido adyacente no tumoral respectivo. El análisis por secuenciación directa confirmó los resultados
de ARMS PCR en todas las muestras en que fue efectuado (2 con mutación presente y 2 ausente). Seis pacientes
BRAF+ tuvieron PAAF previa categoría Bethesda VI, 3 Bethesda V y 1 Bethesda III. De los pacientes BRAF-,
dos fueron categoría Bethesda V y uno Bethesda VI. Los pacientes con BRAF mutado presentaron mayor edad al
diagnóstico de CPT vs aquéllos con BRAF no mutado (47.7 ± 12.7 vs 24.7 ± 8.1 años, p < 0.01). Nueve de 10 CPT
con mutación de BRAF correspondieron a la variante clásica a diferencia de 0/3 en los BRAF negativos (p<0.02).
Al año de la cirugía, 5 pacientes BRAF+ presentaban evidencia bioquímica y/o estructural de persistencia de
enfermedad, vs 1 paciente BRAF negativo. Conclusiones: 1) Se encontró una prevalencia elevada de mutación
del gen BRAF en esta población de pacientes operados por CPT. 2) La mutación estuvo ausente en las muestras
de tejido adyacente no tumoral. 3) Más del 90 % de los pacientes con mutación del BRAF presentaron la variante
clásica del papilar, a diferencia de los BRAF negativos. 4) Los pacientes BRAF positivo presentaron mayor edad
al diagnóstico de la enfermedad. 5) Las citologías de alto riesgo en la PAAF diagnóstica estuvieron presentes en
ambos grupos de pacientes. 6) La evaluación al año del tratamiento no evidenció diferencias en la evolución entre
los pacientes con presencia o ausencia de la mutación.