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PRRS: el virus per se Enric Mateu Centre de Recerca en Sanitat Animal (CReSA) Dep. Sanitat i d’Anatomia Animals Universitat Autònoma de Barcelona (UAB) Simposio PRRS México 2012 El origen del virus del PRRS GenoKpo 2 GenoKpo 1 1990 1980s 19?? GenoKpo 2 2006 1988-­‐91 El virus del PRRS hoy GenoKpo 2 GenoKpo 1 GenoKpo 1 GenoKpo 2 GenoKpo 2 GenoKpo 1 Fam. Arteriviridae Gº Arterivirus Estructura del virus del PRRSV An,cuerpos neutralizantes CMI CMI An,cuerpos neutralizantes En discusión* GP5-­‐ Permite la entrada del virus GP4-­‐ Forma un trímero con la GP2 y la GP3 CMI An,cuerpos neutralizantes Proteína M – Muy conservada en un mismo geno@po. Forma un heterodímero con la GP5 An,cuerpos neutralizantes GP3-­‐ Forma un trímero con la GP2 y la GP4 CMI Proteína N An,cuerpos neutralizantes GP2-­‐ Forma un trímero con la GP3 y la GP4 Protein E-­‐ Codificada por la ORF2 (¿especificidad de célula diana?) *Van Breedam et al. 2011. Vaccine 29: 246-­‐257 Leng et al. 2012. Vet Microbiol, June 25 Proteína ORF5a. Descubierta recientemente. Aprox. 50 nm Las dianas del virus del PRRS son los macrófagos y las células dendríKcas Porcine sialoadhesin M Heparan sulphate GP5 GP3 GP3GP3
GP4 E GP2 CD163 Fuente: modificado a par@r de Dokland T. 2010. Virus Res, 154: 86-­‐97. Hasta hoy, los macrófagos (pero no los monocitos) y las células dendrí@cas mieloides (per no las del pulmón) son las dianas conocidas del virus. Las células dendrí@cas plasmocitoides parecen ser refractarias. Estrategia replicaKva de los Arterivirus van Dinten, L. C. et al. 2000. J. Virol. 74(11):5213-5223
PosiKve sense ssRNA ORF5 La diversidad genéKca del virus del PRRS aumenta con el Kempo (y con los datos) USA: Similitud media 93.7% 2002 Europa: Similitud media 95.4% Forsberg et al. 2002. Virology 299: 38–47. Key et al. 2002. Virology 299: 38–47. ORF5 GenoKpo 1 GenoKpo 2 Shi et al. 2010. Virus Res, 154:7-­‐17 Fuente: Li et al. 2010. Virus Res, 154: 7-­‐17. Hoy 7
99 100 60
12 0
OBR 2 07
18 2
1
R
10
OB
180 BR14 11
51
O
6
423 MO2 10
7H BR4 05
53
4O O8 05
43
M
2H VB 04
03 AV 11 06
O 9
3N
02 HM BR
7
7O
11
Sonora 1
(OBR)
01
US-like
Sonora 8
(OBR)
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426OBR33 10
99
424OBR13
10
69
429OBR
97
28 10
75
077HM
O13 0
430O
6
BR3
1 10
42 7
O
419 BR5 1
0
O
99
031 BR17
10
01 HMO8
5
05
10 NAV
97
4
2
09 OBR 05
5
99
02 OB 1 06
10 9HM R5 0
40 3O O9 6
5O BR
0
BR 2 0 5
6
2
10
Grupos cepas PRRSV en Sonora (datos Lab. Dr. Jesús Hernández, CIAD AC) 04 0
7
1
BR R23 10
O
3 B
0
19
01 13O BR 24 1
06
4 7O BR
10 -20
41 2O R347 US
41 5OB 813
6
US-like
42 Q47
40
56
D
O1
M
0
H
1
2
R3
12
6
OB
06
98 9
420 MO1
P
H
c-AT
4
2
1
410I6ngelva
B6R
9
O
9
7
0A9Y65
06
US-20
7937
7
59 100 67 100
4
Q
D
Vaccine80
1 06
58
105HMO
related
61
102HMO9 06
87
DQ
4
EF 778071
7 H
53
60 9 U MO
S- 1
03
VR 20006
AF
23 6
1
08
32
4H 764
6
M
AY
O5 5 IL
615 072
92
794 HM 8 06
AT O1
-20 06
79
DQ4 18
05
778 3NA
0
V
7
6
US- 07
DQ4
59
2
7829
1 US 006
-200
6
DQ47
3474
KR
010OB
R 5 04
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99
04
96
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10
0
60
100
97
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140NAV4 07
99
50
99
55
62
95
60
55
53
9
55 1
Sonora 6
(HMO)
99
91
65
84 0
86 68
44 O
AF
THBR
18
-26 0
42
01 6
12
2
SG
Sonora 7
(OBR)
046HMO4 06
JQ828963 CN-2012
EF517962
JQ828962 CN
100
JQ8289 CN-2012
Asian
JF920 65 CN-2012
64
DQ4 780 CN-20
7825
08
7 US
A F3
-200
394
6
A F3
93 I
98 99
O
3
073 9500
11 HMO NC
6
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10
1
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10
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0
Sonora 2
02
01 4HM O9
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(HMO)
0H MO 0
5
M 9
05
O
6
05
Sonora 3
04
4 05
O
M O4 06
8H M
4 03
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0 4H AV B 05
06 14N VV JP
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5
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0
AB HMO 5 05
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1
10
10
039 HMO 06
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H
6
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H
100 MO13 06
55
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O3 06
57
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98
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76
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98
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10
6H
M
O
1
06
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O
4
06
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MO2
05
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M
O
2
033
HMO 06
0
8
2
1
0
5
H
003 MO10
05
00 HMO
4
2
00 HMO 03
02 2HM 10 0
3
7H O9
M
O1 03
60
4
74
US-like
25 10
98
392HMO
24 10
58
O
M
H
100 1
389
9
0
4
6
86
O
M
H
8
9
8
0
3
O23 9
M
7
6
H
0
386
O9 9
HM
0
369 MO6 0
H 29 106
7
4
4
R 0
OB S-2 12
42829 U H-20 02
9900 99
1
3
78 10 T -20
4
H
0
1
DQ 487 6 T
8
1
30 10
JN 971
BR R6 06
2
O
2 B 6
AY
40 9O BR
39 9O
06
JN
(HMO)
Sonora 4
(HMO)
Sonora 5
(NAV)
Burgara et al. 2012 (en preparación) Fuente: Darwich et al. 2011. Vet Microbiol, 150: 49-­‐62. Modificado a par,r de F. Osorio, Univ. Nebraska La respuesta inmune adaptaKva al virus del PRRSV es poco común Viremia AnKcuerpos totales Carga vírica AnKcuerpos neutralizantes Células productoras de IFN-­‐γ Fase temprana (aguda) Los an@cuerpos aparecen a los 7-­‐14 días. No son protec@vos La respuesta de IFN-­‐γ, se desarrolla lentamente Los an@cuerpos neutralizantes (AN) (21-­‐28 dpi) son escasos, incluso puede que no se desarrollen. Desvanecimiento de la respuesta inmune(t?) 0
1 2 Cerdas: días Lechones: semanas a meses en función de la cepa de virus y el individuo +/-­‐5 meses
Virus presente en tejidos linfoides durante semanas o meses tras el cese de la viremia 1 año
Probablemente, parte de la anormal respuesta al virus del PRRS se debe a las proteínas no estructurales del virus ORF1a ORF1b RF2 2b O
ORF3 ORF4 5a ORF5 ORF6 En el proceso de replicación vírica se sinte@zan dos poliproteínas que no se encuentran en el virión y que intervienen en el proceso de replicación. Estas poliproteínas están codificadas por la ORF1a y 1b. nsp1 nsp2 nsp11 Las poliproteínas son cortadas por diversos enzimas y dan lugar a 14 proteínas no-­‐estructurales Diversas proteínas no-­‐estructurales interfieren con la respuesta innata de interferón alfa y deTNF-­‐alfa ORF7 Diferentes cepas de genoKpo 1 causan una evolución virológica disKnta pero probablemente también existe un componente individual Cepa 3262 Cepa 3267 Fuente: Diaz et al. 2012. Vet Res, 43:30 Protección homóloga y heteróloga Experimento 2 Cepa A (3262) Cepa B (3267) Cepa A (3262) d0 15 21 1ª inoculación 35 42 63 70 77 d84 91 dpi (d7) 2ª inoculación 14 cepa A A-­‐A 4 cepa A (homologo) 6 controles (placebo) A-­‐B 4 cepa B (heterólogo) Respuesta humoral y celular C1-­‐B 2 cepa B 98 dpi (d14) Necropsia Protección homóloga y heteróloga Experimento 2 Cepa B (3267) d0 Cepa A (3262) 15 21 1ª inoculación 35 42 63 70 77 Cepa B (3267) d84 91 dpi (d7) 2ª inoculación 8 cepa B B-­‐B 4 cepa B (homólogo) 3 controles (placebo) B-­‐A 3 cepa A (heterólogo) Respuesta humoral y celular C2-­‐A 3 cepa A 98 dpi (d14) Necropsia Resultados del desago homólogo y heterólogo a 84 días post-­‐
inmunización Fuente: Diaz et al. 2012. Vet Res, 43: 30 Fuente: Diaz et al. 2012. Vet Res, 43: 30 La suscepKbilidad a la neutralización de cada cepa es variable. Los grupos de cepas con suscepKbilidad similar no se correlaciona con los epítopos de neutralización de la GP3, GP4 o GP5 Fuente: Marqnez-­‐Lobo et al. 2011. Vaccine 29:, 6928-­‐6940 Fuente: Diaz et al. 2012. Vet Res, 43: 30 Lo que tengo que recordar 1.  El virus del PRRS es muy diverso genética y antigénicamente
2.  La diversidad genética del virus influye en la virulencia y en la
diversidad antigénica
3.  No se puede predecir la virulencia o la protección en base a la
secuenciación de un solo gen, pero esto es muy útil
epidemiológicamente
4.  El virus del PRRS es capaz de afectar la respuesta inmune en
puntos críticos de la misma
5.  La variabilidad genética de los cerdos puede contribuir también a
una mayor o menor “resiliencia”
6.  La protección homóloga suele ser mejor, pero no siempre.
7.  Probablemente tanto los anticuerpos neutralizantes como la
inmunidad celular contribuyen a la protección pero no sabemos
exactamente en qué manera.
El grupo de PRRS en CReSA Con financión de : Laila Darwich Ivan Díaz Proyecto PoRRSCon 7º Programa marco de la Unión Europea Marga Marjn Enric Mateu Proyecto CSD-­‐0007 PORCIVIR – Ministerio Ema Pileri de Economía y Compe@@vidad (España) Joan Pujols Joaquim Segalés Proyecto RTA-­‐2011-­‐00199-­‐00 – INIA Ferran Soldevila (España) Estudiantes de doctorado (2008-­‐12) Alexel Burgara (CIAD-­‐AC) Mariona Gimeno Liudmila Kutzemseva Irene Rodríguez (Univ. De Córdoba) Colaboraciones en México: Dr. Jesús Hernández, CIAD AC, Hermosillo (Sonora, Mexico) Gracias por su atención
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