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norma
española
UNE-EN ISO 9308-1
Diciembre 2014
TÍTULO
Calidad del agua
Recuento de Escherichia coli y de bacterias coliformes
Parte 1: Método de filtración por membrana para aguas con
bajo contenido de microbiota
(ISO 9308-1:2014)
Water quality. Enumeration of Escherichia coli and coliform bacteria. Part 1: Membrane filtration method
for waters with low bacterial background flora. (ISO 9308-1:2014).
Qualité de l'eau. Dénombrement des Escherichia coli et des bactéries coliformes. Partie 1: Méthode par
filtration sur membrane pour les eaux à faible teneur en bactéries. (ISO 9308-1:2014).
CORRESPONDENCIA
Esta norma es la versión oficial, en español, de la Norma Europea EN ISO 9308-1:2014,
que a su vez adopta la Norma Internacional ISO 9308-1:2014.
OBSERVACIONES
Esta norma anula y sustituye a las Normas UNE-EN ISO 9308-1:2001 y
UNE-EN ISO 9308-1:2001/AC:2008.
ANTECEDENTES
Esta norma ha sido elaborada por el comité técnico AEN/CTN 77 Medio ambiente
cuya Secretaría desempeña AENOR.
EXTRACTO DEL DOCUMENTO UNE-EN ISO 9308-1
Editada e impresa por AENOR
Depósito legal: M 36863:2014
 AENOR 2014
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Índice
Prólogo...................................................................................................................................................... 6
0
Introducción ............................................................................................................................ 7
1
Objeto y campo de aplicación ................................................................................................ 7
2
Normas para consulta ............................................................................................................ 7
3
Términos y definiciones .......................................................................................................... 8
4
Fundamento ............................................................................................................................ 8
5
Aparatos y material de vidrio ................................................................................................ 8
6
Medios de cultivo y reactivos ................................................................................................. 9
7
Muestreo .................................................................................................................................. 9
8
8.1
8.2
8.3
Procedimiento ......................................................................................................................... 9
Preparación de la muestra ..................................................................................................... 9
Filtración ................................................................................................................................. 9
Incubación y diferenciación ................................................................................................... 9
9
Expresión de resultados ....................................................................................................... 10
10
Informe de ensayo ................................................................................................................. 10
11
11.1
11.2
Aseguramiento de la calidad ................................................................................................ 10
Generalidades ....................................................................................................................... 10
Ensayos de funcionamiento del agar cromogénico para bacterias coliformes
(CCA) ..................................................................................................................................... 11
Ensayos de funcionamiento del ensayo de oxidasa ............................................................ 11
11.3
Anexo A (Informativo)
Información microbiológica complementaria sobre las bacterias
coliformes .................................................................................................. 12
Anexo B (Normativo)
Composición y preparación de los medios de cultivo y reactivos ......... 13
Anexo C (Informativo)
Características de funcionamiento .......................................................... 15
Bibliografía............................................................................................................................................. 16
1
Objeto y campo de aplicación
Esta parte de la Norma ISO 9308 especifica un método para el recuento de Escherichia coli (E. coli) y bacterias
coliformes. El método se basa en la filtración en membrana, el posterior cultivo en un medio de agar cromogénico y el
cálculo del número de los microorganismos diana presentes en la muestra. Debido a la baja selectividad del medio de
agar de diferenciación, el crecimiento de la microflora acompañante puede afectar a la fiabilidad del recuento de E. coli
y bacterias coliformes, por ejemplo, en aguas superficiales y aguas de pozos poco profundos. Este método no es
adecuado para este tipo de aguas.
EXTRACTO DEL DOCUMENTO UNE-EN ISO 9308-1
Esta parte de la Norma ISO 9308 es especialmente adecuada para aguas con valores bajos de bacterias que produzcan
menos de 100 colonias totales sobre el agar cromogénico para bacterias coliformes en el recuento de coliformes (CCA).
Este tipo de aguas pueden ser agua potable, agua de piscina desinfectada, o agua tratada procedente de estaciones de
tratamiento de aguas potables.
Algunas cepas de E. coli que son negativas a la β-D-glucuronidasa, tales como Escherichia coli O157, no son
detectadas como E. coli. No obstante, como si son positivas a la β-D-galactosidasa, aparecerán como bacterias
coliformes en el agar cromogénico (CCA).
2
Normas para consulta
Los documentos indicados a continuación, en su totalidad o en parte, son normas para consulta indispensables para la
aplicación de este documento. Para las referencias con fecha, sólo se aplica la edición citada. Para las referencias sin
fecha se aplica la última edición (incluyendo cualquier modificación de ésta).
ISO 3696, Agua para uso en análisis de laboratorio. Especificación y métodos de ensayo.
ISO 7704, Calidad del agua. Evaluación de las membranas filtrantes utilizadas en los análisis microbiológicos.
ISO 8199, Calidad del agua. Orientaciones generales para el recuento de microorganismos en cultivo.
ISO 11133, Microbiología de los alimentos para consumo humano, alimentación animal y agua. Preparación,
producción, conservación y ensayos de rendimiento de los medios de cultivo.
ISO 19458, Calidad del agua. Muestreo para el análisis microbiológico.
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