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Ensayos y métodos utilizados
Versión 03
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Fecha de Actualización: 30/01/2017
Observación: El tiempo de entrega del resultado de los análisis comprende desde que inicia el ensayo hasta la
elaboración del Reporte de Resultado, en días hábiles y bajo condiciones normales de operación del laboratorio.
MUESTRAS DE ALIMENTOS
Unidad Microbiología de Alimentos
 Las muestras de rutina que ingresen a la Unidad Microbiología de Alimentos los dos últimos días hábiles de la
semana, el ensayo se inicia el primer día hábil de la semana siguiente, con excepción de :
- La muestras para el análisis de Vibrio cholerae por el método BAX System y las muestras de huevos para el
análisis de Salmonella spp, se procesan únicamente los días jueves.
 Cuando se solicitan varios análisis para una misma muestra, el tiempo de entrega del reporte de resultado
corresponde al análisis que requiere más días.
Ensayo
Escherichia coli
Método utilizado
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
Número Más Probable
5
Filtración en membrana
(ISO 9308-1)
Escherichia coli
Escherichia coli
Escherichia coli O157: H7
Escherichia coli productora de
Shiga toxina ( STEC)
Salmonella spp
Método Acreditado
Ver alcance http://www.eca.or.cr/acr_lab.php?t=e
Petrifilm (AOAC)
USDA / FSIS 5A.04
USDA / FSIS 5.09
USDA / FSIS 5B.05
USDA / FSIS MLG 4C.06
USDA / FSIS MLG 4.08
AOAC 2013.02
FDA BAM 5
Método Acreditado
Ver alcance http://www.eca.or.cr/acr_lab.php?t=e
Listeria monocytogenes
4
USDA / FSIS MLG 8A.05
USDA / FSIS MLG 8.09
AOAC 2003.12
3
2 – En caso de
resultado negativo
7 – En caso resultado
positivo
2 – En caso de
resultado negativo
5 – En caso de
resultado negativo
10 – En caso
resultado positivo
5 – En caso de
resultado negativo
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Ensayo
Método utilizado
FDA BAM 10
Recuento mesófilos aerobios
(leche UHT, leche evaporada)
Recuento Total Mesófilos
aerobios
Petrilfilm
AOAC 986.33 / AOAC 989.10
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
10 – En caso
resultado positivo
12
Petrifilm:
AOAC 990.12
AOAC 989.10
3
Recuento Hongos y Levaduras
Petrifilm
AOAC 997.02
6
Recuento de Staphyloccus
aureus
Petrifilm:
AOAC 2003.07
AOAC 2003.08
AOAC 2003.11
3
Estafilococos coagulasa
positiva
Bacillus cereus
Clostridium perfringens
ISO 6888-1:1999
Método Acreditado
Ver alcance http://www.eca.or.cr/acr_lab.php?t=e
FDA
USDA/FSIS MLG 13
5
6
2 - En caso de
resultado negativo
5- En caso de
resultado positivo
Filtración en membrana
(Directiva 98/83/CE)
Clostridium perfringens
Método Acreditado
Ver alcance http://www.eca.or.cr/acr_lab.php?t=e
4
Coliformes totales
Petrifilm:
AOAC 986.33
AOAC 989.10
AOAC 991.14
4
Coliformes fecales
Número Más Probable
5
Cronobacter sakazakii
BAX System PCR Assay for Enterobacter sakasakii
FDA
2 - En caso de
resultado negativo
5- En caso de
resultado positivo
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Ensayo
Método utilizado
Filtración en membrana
ISO 7899-2:2000
Enterococcus faecalis
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
4
Método Acreditado
Ver alcance http://www.eca.or.cr/acr_lab.php?t=e
Vibrio cholerae
Prueba de esterilidad
comercial
Serotipificación de Salmonella
spp
FDA
5
MFHPB-01 Compendium of Analytical Methods,
Volume 2, Gobierno de Canadá
20
Kauffmann-White
Promedio de 16
Unidad RECAT
(Residuos y Contaminantes en Alimentos de Origen Terrestre)
El tiempo de entrega de resultados de las muestras que ingresan a la Unidad RECAT, se refiere a días
hábiles a partir del día posterior a la fecha indicada en la programación anual de muestras.
Tiempo entrega de
Ensayo
resultado
Método utilizado
(días hábiles)
Plaguicidas
Determinación de Clembuterol
Lactonas Macrocíclicas
(Avermectinas)
Metales Pesados (cadmio y
cobre)
Cromatografía de gases / Cromatografía líquida
kit de ELISA
20
10
Cromatografía líquida de alta resolución (HPLC)
(Referencia: FSIS CLG-AVR.04)
Método Acreditado
10
Ver alcance: http://www.eca.or.cr/acr_lab.php?t=e
Absorción Atómica (A.A.)
(Referencia: FSIS MTL)
Método Acreditado para análisis de Cadmio
20
Ver alcance: http://www.eca.or.cr/acr_lab.php?t=e
Multiresiduos:
 Benzimidazoles
 Fenicoles
 Estilbenos
 Zeranol
HPLC – MS/MS
Referencia: Anagnostopoulos, K Liapis, S.
Haroutounian, G. Miliadis; Development of an
EasyMultiresidue Method for Fat-Soluble Pesticides in
Animal Products Using GasChromatography-Tandem
Mass Spectrometry. Food Analytical Methods, January
2014, Volume 7, Issue 1, pp 205-216.
10
Método Acreditado
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Ensayo
Método utilizado
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
Ver alcance: http://www.eca.or.cr/acr_lab.php?t=e
Antibióticos betalactámicos
Tamizaje
10
Especie animal
Inmunodifusión en gel
10
Sulfonamidas
AM I Randox.
Biochip
20
Antibióticos varios
AM II Randox.
Biochip
20
Tamizaje de Neogen
10
Ractopamina
Unidad RECAA
(Residuos y Contaminantes en Alimentos de Origen Acuático)
Ensayo
Método utilizado
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
Bases Volátiles Nitrogenadas
Microdifusión-titulación en placas Conway
Totales (Frescura)
Referencia: Conway and Alfred Byrne, A., 1933.)
8
Histamina por Kit de ELISA
(Tamizaje)
8
Histamina por HPLC-FLD
Inmunoensayo ELISA competitivo
Referencia: Veratox for Histamine, Marca Neogen
Cromatografía Liquida de Alta Resolución con
detector de fluorescencia (HPLC-FLD)
Referencia: El método de ensayo fue adaptado de:
Tracy, M., Pickering, M., Verhuls, T. Cation Exchange
Analysis of foods and Beverages for Biogenic Amines.
Food and Testing Analysis. 1995. / AOAC 977.13
Método Acreditado
10
Ver alcance: http://www.eca.or.cr/acr_lab.php?t=e
Marea Roja (Toxinas PSP)
Bioensayo en ratón
Referencia: AOAC 959.08
8
Marea Roja (Toxinas PSP)
HPLC/FLD (oxidación post columna)
Referencia: Método modificado AOAC Official Method
2011.02./Rourke, W. et al. AOAC Int. 2008, 91, 589–
597
15
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Ensayo
Mercurio
Mercurio
Sulfitos
Verde malaquita y verde
leucomalaquita
Método utilizado
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
Espectrometría Absorción Atómica-vapor frío (EAA)
Referencia: El método de ensayo fue adaptado de:
FSIS. 1991. Determination of mercury by atomic
absorption spectrophotometry.
Método Acreditado
Ver alcance: http://www.eca.or.cr/acr_lab.php?t=e
8
Descomposición térmica, amalgamación y
espectrofotometría de absorción atómica
Referencia: Milestone, DMA-80
Destilación por arrastre con vapor/titulación Redox
Referencia: Short Note No. 169/2014: Sulfur dioxide
determination in shrimps.
Determination of total sulfur dioxide according to the
patented BUCHI method.
Cromatografía Liquida de Alta Resolución con
detección por espectrometría de masas masas
(HPLC-MS/MS)
Referencia: El método de ensayo fue adaptado de:
Methode d’ identification et de confirmation des
residus de vert de malachite et son metabolite dans
les tissus par CL/SM-SM. PO2/29 AFSSA. Fougeres
8
10
15
MUESTRAS PARA DIAGNÓSTICO
Unidad Laboratorio de Bioseguridad – Área de Inmunología
Método utilizado
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
Anemia Infecciosa Equina
Inmunodifusión en Agar Gel
3
Influenza Aviar
Prueba de confirmación
Inmunodifusión en Agar Gel
7
Enfermedad Newcastle.
Inhibición de la Hemaglutinación
7
Leucosis Enzoótica Bovina
(LVB)
Inmunoenzimática ELISA
7
Rinotraqueítis Infecciosa
Bovina (IBR)
Inmunoenzimática ELISA
7
Ensayo
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Ensayo
Peste Porcina Clásica
Método utilizado
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
Inmunoenzimática ELISA
7
Unidad Laboratorio de Bioseguridad – Área Aislamiento viral
Ensayo
Método utilizado
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
Determinación del virus de la
Enfermedad Newcastle /
Influenza Aviar.
Aislamiento Viral en huevo embrionado y
hemoaglutinación
De dos meses a tres
meses
Enfermedad Newcastle /
Influenza Aviar. Exportación
Hemaglutinación y Aislamiento
2 semanas
Aislamiento Viral y Hemoaglutinación
4 semanas
Enfermedad Newcastle /
Influenza Aviar. Denuncia
Unidad Laboratorio de Bioseguridad – Área Patología
Ensayo
Encefalopatía Espongiforme
Bovina
(EEB)
Encefalopatía Espongiforme
Bovina
(EEB)
Rabia
Varias enfermedades
Método utilizado
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
Inmunohistoquímica
3 meses
Histopatologia
3 meses
Inmunofluorescencia directa
5
Histopatología
3 meses
Unidad Laboratorio de Bioseguridad – Área Biología Molecular
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Ensayo
Método utilizado
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)
Virus de la enfermedad de la
Mancha Blanca
Confirmación presencia de
Ácido nucleico de los virus
de la infección hipodermal y
necrosis hematopoyética
(IHHNV), Hepatopancreatitis
necrotizante HNP y por
hepatopancreatitis por
parvovirus (HPV)
Confirmación presencia de
Ácido nucleico de los virus
de la cabeza amarilla (YHV)
y Taura
Método Acreditado
5
Ver alcance: http://www.eca.or.cr/acr_lab.php?t=e
Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)
5
Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)
Método Acreditado
5
Ver alcance http://www.eca.or.cr/acr_lab.php?t=e
Detección de ácido nucleico
de Laringotraqueitis
infecciosa
Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)
5
Detección de ácido nucleico
del virus de Newcastle
Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)
5
Detección de ácido nucleico
de Micoplama gallisepticum
Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)
5
Detección de ácido nucleico
de Bronquitis infecciosa
Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)
5
Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)
5
Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)
5
Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) –RFLP
Secuenciación
7
Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)
secuenciación
5
Detección de ácido nucleico
de Influenza tipo A, H5, H7,
H9
Detección de ácido nucleico
del virus de Influenza Porcino
H1N1
Detección de ácido nucleico
de Pestivirus ( Peste Porcina
Clásica, enfermedad de las
fronteras, Diarrea Vírica
Bovina)
Detección de Morbillivirus
(Distemper canino,
Morbillivirus cetáceos,
enfermedades de los
pequeños rumiantes, rinder
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Ensayo
Método utilizado
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
Determinación de especie en
Peces
PCR-RFLP
Secuenciación
PCR mutiplex
5
Pruebas de paternidad en
bovinos
Determinación de Microsatelites
7 días a 2 meses
Pruebas de identidad en
bovino
Determinación de Microsatelites
7 días a 2 meses
pest)
Unidad Laboratorio de Bioseguridad – Área Diagnóstico Apícola
Ensayo
Método utilizado
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
Loque americana y Loque
europea en Abejas melíferas
Frotis y Cultivo tinción
Frotis y tinción - 3
Cultivo - de 7 a 15
Macerado de abdómenes
3
Disección de tráqueas
3
Observación directa
2
Prueba de frasco
3
PCR tiempo real
3
Parásitos internos en abejas
melíferas.
(Amebas , Nosema. etc)
Parásitos traqueales en
abejas melíferas. (Ácaros de
tráquea )
Pequeño escarabajo de la
colmena
Parásitos externos de abejas
( varroa)
Detección de virus de abeja
Unidad de Parasitología
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Método utilizado
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
Frotis Tinciòn Giemsa Wright.
4
Frotis directo con KOH
2
Tricomonas
Observación directa
3
Examen coproparasitológico
Prueba de Sheather
4
Flotación
Sedimentación (Baermann)
2
Ensayo
Hemoparásitos
Parásitos Externos ( Ácaros )
Parásitos internos
(gastrointestinales,
pulmonares hígado, etc.)
Unidad Microbiología Medico Veterinaria
Ensayo
Diagnóstico de Brucelosis
Método utilizado
Rosa de Bengala
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
7
(En caso de
resultado negativo)
4 – cuando ingresan
de 1 a 15 muestras
10- cuando ingresan
de 16 a 30 muestras
Diagnóstico de Leptospirosis
Microaglutinación
-cuando ingresan
más de 30 muestras
el personal de
laboratorio debe
coordinar con el
cliente el tiempo de
entrega de
resultados
Cultivo
15 semanas
Antrax
Cultivo y Tinción Gram
5
Brucella spp
Cultivo y Tinción Gram
15
Cultivo de Leptospiras
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Página 10 de 7
Método utilizado
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
Cultivo y Tinción Gram
5
USDA
10
Cultivo
Frotis, Tinción Ziehl Neelsen
Cultivo - 30
Frotis directo - 2
Estudio bacteriológico:
(Staphyococcus sp
Streptococcus sp,
Enterobacterias,etc)
Cultivo y Tinción Gram
5
Mastitis
Cultivo y Tinción Gram
Ensayo
Listeria spp
Salmonella spp
Tuberculosis
5
Paratuberculosis
Frotis
Tinción Ziehl Neelsen
2
Estudio bacteriológico ( Se
realiza cuando la muestra
está positiva a alguna
enfermedad)
API, PSA, BIOQUÍMICA, ETC.
10
Frotis directo y tinción Gram
2
Campylobacter
Unidades Laboratorios Regionales
Ensayo
Diagnóstico de Brucelosis (prueba
tamiz)
Diagnóstico de Brucelosis (prueba
confirmatoria)
Método utilizado
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
Rosa de Bengala
7
(En caso de
resultado negativo)
Ensayo inmunoabsorbente ligado a una
enzima (ELISA)
10
Leucosis Viral Bovina (LVB)
7
Rinotraqueitis Infecciosa Bovina (IBR)
7
Peste Porcina Clásica (PPC)
4
Anemia Infecciosa Equina (AIE)
Inmunodifusión en Agar Gel (IDAG)
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Ensayos y métodos utilizados
Versión 03
Página 11 de 7
Método utilizado
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
Frotis Tinciòn Wright Giemsa
3
Parásitos Externos ( Ácaros )
Frotis directo
2
Tricomonas y Campylobacter
Frotis directo y tinción Gram
3
Prueba de Sheather y Mc Master
4
Ensayo
Hemoparásitos
Examen coproparasitológico
MUESTRAS PARA MEDICAMENTOS
Unidad Control Biológico de Medicamentos
Método utilizado
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
Code of Federal Regulations
5
Referencias: The U.S. Pharmacopeia
5
Referencias: Pharmacopeia
22
Referencias: The U.S. Pharmacopeia, Real
Farmacopea Española
5
USDA
4
Titulación viral en huevos
Referencias: Code of Federal Regulations
14
Titulación viral en ratones
Referencias: Code of Federal Regulations
22
Referencias: The U.S. Pharmacopeia
5
Referencias: The U.S. Pharmacopeia, Real
Farmacopea Española, British Pharmacopeia
Veterinary, Code of Federal Regulation
16
Ensayo
Prueba de disociación bacteriana
Detección de Escherichia coli
Prueba de pirógenos o endotoxinas
Biopotencias
Contenido de formol
Detección de Salmonella sp
Prueba de esterilidad
Detección de Staphylococcus aureus
Referencias: The U.S. Pharmacopeia
5
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Ensayos y métodos utilizados
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Página 12 de 7
Método utilizado
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
Detección de Pseudomonas sp
Referencias: The U.S. Pharmacopeia
5
Prueba de viabilidad de Brucella
Referencias: Code of Federal Regulations
5
Prueba de inocuidad
Referencias: Code of Federal Regulations
10
Prueba de viabilidad de Antrax
Referencias: Code of Federal Regulations
4
Referencias: The U.S. Pharmacopeia, Code of
Federal Regulations
5
Referencias: The U.S. Pharmacopeia,
5
Ensayo
Recuento total bacteriano
Recuento de hongos
Unidad Constatación Química de Medicamentos
Para el tiempo de entrega del resultado de los análisis realizados en esta Unidad, se debe tomar en cuenta
que el inicio del ensayo de cada muestra no coincide con la fecha de ingreso, depende de la cantidad de
muestras que ingresen de acuerdo al muestreo oficial.
Método utilizado
Tiempo entrega de
resultado
(días hábiles)
USP
12
Determinación de Ingredientes
Activos
Técnica Cromatografía Líquida de Alta
Resolución
12
Determinación de Ingredientes
Activos Volátiles
Técnica Cromatografía de Gases
12
Determinación de Ingredientes
Activos
Técnica Espectrofotometría UltravioletaVisible
12
Técnica Titulación Acuosa/ No Acuosa
12
Espectrometría de Absorción Atómica
12
USP
12
Ensayo
Lectura de volumen
Determinación de Ácidos- Bases
Determinación de Minerales
Determinación de pH
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