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MEDIO DE CULTIVO Bacteriología General Catálogo 1228-P _ ___________________________________________________ AGAR DE HIERRO Y LISINA DOBLE MODIFICADO USO Para la identificación de enterobacterias, especialmente del Género Salmonella a partir de diversas muestras de alimentos. PRINCIPIO La peptona de gelatina y el extracto de levadura son la fuente de nitrógeno y proporcionan los factores de crecimiento necesarios para las bacterias. La dextrosa, lactosa y sacarosa son los carbohidratos fermentables. Los microorganismos que producen la enzima lisina descarboxilasa, descarboxilan el aminoácido lisina a cadaverina, liberando CO2; debido a la alcalinidad de la cadaverina el pH del medio se modifica desarrollando colonias transparentes. Las bacterias que no producen la enzima fermentan los carbohidratos produciendo una reacción ácida que se manifiesta por el vire del indicador púrpura de bromocresol desarrollando colonias amarillas. Las bacterias que producen H2S a partir del Tiosulfato de sodio presentan una coloración negra debido a la reacción del H2S con el citrato férrico de amonio. Las sales biliares inhiben bacterias Gram positivas, algunas especies de Proteus y bacilos coliformes. Sembrar el medio de cultivo con la muestra problema. Incubar 24 h a 35ºC. FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA Agar de Hierro y Lisina (Cat. 1015) Sales biliares Lactosa Sacarosa 34.0 1.5 10.0 10.0 Tiosulfato de sodio Citrato de hierro y amonio Novobiocina 6.76 0.3 0.016 pH 6.7 ± 0.2 PREPARACION Rehidratar 62.6 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullición durante 1 minuto para disolverlo por completo. NO ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE. Enfriar aproximadamente a 45ºC y agregar por filtración 0.016 g de Novobiocina disueltos en 5 ml de agua destilada. Homogeneizar suavemente y vaciar en cajas de Petri estériles. Conservar en refrigeración de 2º a 8ºC. MICROORGANISMO Salmonella typhi Salmonella typhimurium Salmonella arizonae Salmonella enteritidis Staphylococcus aureus Escherichia coli CONTROL DE ACTIVIDAD CEPA CRECIMIENTO ATCC 19430 Bueno, colonias pequeñas translúcidas ATCC 14028 Bueno, colonias pequeñas con centro negro y periferia transparente ATCC 13314 Bueno, colonias medianas con centro negro y periferia transparente ATCC 13076 Bueno, colonias medianas con centro negro y periferia transparente ATCC 25923 Inhibido ATCC 25922 Moderado, colonias amarillas con halo amarillo de precipitación de sales biliares BIBLIOGRAFIA Edwards and Ewing. Identification of Enterobacteriaceae. Burgess Publishing Co. Minneapolis. Minn. 1962 Mac Faddin. Media for isolation-cultivation-identification-maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Baltimore. 1985 PRESENTACION No. Cat 1228-P Preparado placa 90x15 mm individual No. Cat. 1228-PP DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F. Preparado paquete con 10 placas 3
