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_ MEDIO DE CULTIVO Bacteriología General Catálogo 1255 ___________________________________________________ BASE DE CALDO TETRATIONATO MODIFICADO (HAJNA Y DAMON) USO Para el enriquecimiento selectivo de microorganismos principalmente del género Salmonella a partir de diversas muestras de alimentos. PRINCIPIO La formulación según Hajna y Damon es una modificación del caldo de enriquecimiento de Kauffmann y Knox en la que se ha agregado extracto de levadura como nutriente adicional a la peptona. La dextrosa y el d-manitol favorecen el desarrollo de bacterias del género Salmonella. Al agregar la solución de yodo, justo antes de inocular la muestra, el tiosulfato de sodio pasa parcialmente a tetrationato de sodio; estas sales tienen efecto tóxico por la reacción con los grupos sulfhidrilo de las enzimas involucradas en la síntesis de la membrana y pared celular de las bacterias sensibles. Las bacterias reductoras de tetrationato como Salmonella y Proteus pueden multiplicarse con más facilidad. El carbonato de calcio regula el pH neutralizando el ácido que se va generando por la reducción del tetrationato. El cloruro de sodio mantiene el equilibrio osmótico. El desoxicolato de sodio actúa inhibiendo microorganismos Gram positivos. El verde brillante inhibe a los Gram positivos y a la mayoría de bacilos Gram negativos. Sembrar el Caldo Tetrationato con la muestra problema. Incubar 24 h a 35ºC. Los subcultivos para aislamiento pueden efectuarse en Agar para Salmonella y Shigella (1024-P), Agar de Mac Conkey (1019-P), Agar Verde Brillante (1028-P), Agar Desoxicolato y Citrato (1076-P), Agar Sulfito de Bismuto (1026-P) o Agar de Hierro y Lisina Doble Modificado (1228-P). Carbonato de calcio Cloruro de sodio Desoxicolato de sodio Extracto de levadura Dextrosa FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA 25.0 d-Manitol 5.0 Peptona especial 0.5 Tiosulfato de sodio 2.0 Verde brillante 0.5 pH 7.5 ± 0.2 2.5 18.0 38.0 0.01 PREPARACION Rehidratar 91.5 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullición durante 1 minuto para disolverlo por completo. Enfriar aproximadamente a 45ºC. Distribuir en tubos de ensayo estériles de 16x150 mm en volúmenes de 10 ml, agitando para homogeneizar el precipitado. NO ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE. Conservar en refrigeración de 2º a 8ºC. Antes de usarlo agregar a cada tubo 0.2 ml de una solución Yodo-yodurada agitando perfectamente. S OLUCION DE YODO Yodo en cristales 6.0 g Yoduro de potasio 5.0 g Agua destilada 20.0 ml DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F. 3 MEDIO DE CULTIVO Bacteriología General Catálogo 1255 _ ___________________________________________________ CONTROL DE ACTIVIDAD MICROORGANISMO Escherichia coli Salmonella typhimurium Staphylococcus aureus Salmonella typhi Proteus mirabilis CEPA ATCC ATCC ATCC ATCC ATCC 25922 14028 25923 19430 12453 RESULTADO CRECIMIENTO EN SUBCULTIVOS A las 24 horas Inhibido parcial o totalmente Bueno Inhibido Moderada recuperación Bueno BIBLIOGRAFIA American Public Health Association Recomended Methods for the Microbiological Examination of Foods. APHA, Inc. New York, 1960 Mac Faddin. Media for isolation-cultivation-identification-maintenance of medical bacteria. Williams & Wilkins, Baltimore. 1985 Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos. Sexta Edición pp 91, 1994 PRESENTACION No. Cat. 1255 1255-E 1255-A Deshidratado 1000 g Deshidratado 500 g Deshidratado 450 g No. Cat. 1255-TM 1255-TMP DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F. Preparado tubo 16x125 mm individual Preparado paquete con 10 tubos 3