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Materiales y Métodos 4.30 Disoluciones y tampones utilizados ⢠Solución de Tripsina-EDTA: 0,5 mg/ml Tripsina (Sigma), 0,016% etilendiaminotetraacetato sódico (EDTA; Merck), 0,001% rojo fenol (Merck), diluidos en PBS. ⢠Solución de X-gal: 5-Bromo-4-cloro-3-indolil-β-D-galactopiranósido 2% (X-gal, Roche) en dimetilformamida (Merck). ⢠Solución de IPTG: isopropil-β-D-tiogalactopiranósido en agua destilada. ⢠PBS (solución salina tamponada con fosfato): 137 mM NaCl, 2,7 mM KCl, 1,5 mM Na2HPO4, pH 6,8. ⢠PBS-T: PBS y 0,2% Tween 20. ⢠Tampón de resuspensión3D: 50 mM Tampón fosfato pH 7,8, 300 mM NaCl. ⢠Tampón A3D: 50mM Tampón fosfato pH 6,0, 500 mM NaCl. ⢠Tampón de diálisis B3D: 50mM Tris HCl, pH 7,5, 100 mM NaCl, 10% glicerol, 1 mM DTT y 1 mM EDTA. ⢠Tampón A2C: 20 mM Tris HCl pH, 8,0, 100 mM NaCl, 2 mM imidazol y 0,1% Tritón X100. ⢠Tampón de diálisis B2C: 50 mM Tris HCl; pH 7,4, 100 mM KCl, 20% glicerol, 1 mM DTT y 1 mM EDTA. ⢠TAE: 40 mM Tris acetato, pH 8,3, 1 mM EDTA. ⢠TB: 85 mM Tris HCl, 85 mM borato. ⢠TBE: 90 mM Tris base, 90 mM ácido bórico, 2 mM EDTA. ⢠TE: 10 mM Tris HCl, pH 8,0, 1 mM EDTA. ⢠Tampón Tris-Tricina: 200 mM Tricina, 200 mM Tris, 0,5% SDS. - 72 -