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Frecuencia de genes de virulencia sfa/foc y fyuA en Escherichia coli aislada de
adultos con infección del tracto urinario en Bucaramanga, Santander.
Frequency of virulence genes sfa/foc and fyuA in Escherichia coli isolated from adults with urinary tract
infection in Bucaramanga, Santander.
Libeth Yajaira Criado Guerrero1, Rolando Díaz Díaz2, Edward Poso3, Ana Elvira Farfán García4, Clara Isabel
González5, Ruth Aralí Martínez Vega6
Correspondencia: Libeth Yajaira Criado Guerrero. Calle 70 No. 55-210, Campus Universitario Lagos del Cacique, Universidad de Santander UDES,
Bucaramanga, Colombia. Teléfono: 6516500 Ext. 1371. Correo electrónico: [email protected]
Resumen
Introducción: Aproximadamente, el 80% de los casos de las infecciones del tracto urinario (ITUs) son causadas por Escherichia coli
uropatógenas (UPEC). La diversidad entre los patotipos de E. coli es debida a la presencia de genes específicos asociados a la virulencia.
La patogénesis por E. coli en ITUs ha sido poco estudiada en nuestra región, por lo que identificar los genes de virulencia en cepas de E.
coli permitirá ampliar el conocimiento de su patogénesis. Objetivo: Estandarizar la técnica de PCR para la identificación de los genes de
virulencia sfa/foc y fyuA y describir su frecuencia en las cepas de E. coli aisladas. Materiales y métodos: Se incluyeron sujetos de 18 o
más años, que consultaron de marzo a diciembre de 2015 a la E.S.E ISABU de Bucaramanga, Santander, con sintomatología urinaria a
quienes se les confirmó infección por E. coli en urocultivo (>105 UFC/ml). Se excluyeron mujeres embarazadas, pacientes con
urocultivos polimicrobianos, con diagnóstico de VIH o cáncer o con tratamiento inmunosupresor y pacientes con antecedente de uso de
sonda vesical en los últimos siete días u hospitalizados en las últimas 72 horas antes del día del inicio de los síntomas. Los urocultivos se
sembraron por el método del asa calibrada (0.01 ml) en agar sangre. Siembras adicionales se realizaron en agar Mc Conkey y en
cromogénicos específicos. La identificación de E. coli se realizó en el equipo Phoenix 100 de BD y en el medio SIM. Finalmente, cada
cepa se preservó a -80°C en caldo Luria con glicerol (15%) (DO550 1.8-2.0). La obtención del DNA bacteriano se realizó mediante el
método de lisis por ebullición. Se realizó PCR Multiplex, para la amplificación del gen fyuA se utilizaron los iniciadores F (5’CTCCGGAGAACTGGGTGCATCTTAC-3’) y R (5’-CGGAGGAGTAATTACAAACCTGGCA-3’), y para el gen sfa/focDE los
iniciadores F (5’-CTCCGGAGAACTGGGTGCATCTTAC-3’), R (5’-CGGAGGAGTAATTACAAACCTGGCA-3’). La denaturación
inicial fue a 94ºC por 2 min, seguido de 35 ciclos de 94ºC por 30 s, 59ºC por 30 s y 72ºC por 90 segundos. La extensión final fue a 65°C
por 10 minutos. El amplificado correspondió a un fragmento de 787pb y 410pb, respectivamente. En el análisis para las variables
categóricas se calcularon las frecuencias absolutas y relativas y para la edad se determinó el promedio y la desviación estándar (DE). Para
las comparaciones se utilizaron la prueba exacta de Fisher y la t de Student, respectivamente. Resultados: Se estandarizó la técnica de
PCR para la detección de los genes fyuA y sfa/foc. Durante el periodo se recolectaron 98 cepas de E. coli procedentes del mismo número
de pacientes. El 85,7% de éstos fueron mujeres, con un promedio de edad de 59 años (DE 19.2). En el medio SIM, el 75,5% (n=74) de la
cepas aisladas mostraron movilidad y el 77,6% (n=76) produjeron gas. El 67,4% (n=66) presentaron el gen fyuA, mientras que solamente
el 6,1% (n=6) tenían el gen sfa/foc. Todas las cepas que presentaron sfa/foc fueron positivas para fyuA (p=0.086). No hubo asociación
entre la presencia de estos genes y la motilidad o la producción de gas (p>0.05), tampoco entre los genes y edad o sexo. Conclusiones: La
frecuencia del gen fyuA es similar a lo reportado en Europa, pero la frecuencia del gen sfa/foc es menor a la reportada en Europa y Túnez.
Este es el primer reporte de la frecuencia de estos genes de virulencia en Santander y en Colombia.
Palabras clave: Escherichia coli; uropatógeno; genes; PCR. (Fuente: DeCS BIREME).
Citación: Criado LY, Díaz R, Poso E, Farfán-García AE, González C, Martínez RA. Frecuencia de genes de virulencia sfa/foc y fyuA en Escherichia coli aislada de adultos con
infección del tracto urinario en Bucaramanga, Santander. Rev. Fac. Cienc. Salud UDES. 2016;3(1.S1):32. http://dx.doi.org/10.20320/rfcsudes.v3i1.s1.p018
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se cite este manuscrito como la fuente de la primera publicación del trabajo.
1
Profesora, Programa de Medicina, Grupo de Investigación en Manejo Clínico –CliniUDES, Grupo de Investigación Salud Comunid-UDES, Facultad de Ciencias de la Salud.
Universidad de Santander UDES, Bucaramanga-Colombia.
Profesor, Programa de Bacteriología y Laboratorio Clínico, Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad de Santander UDES, Bucaramanga-Colombia.
3
Estudiante, Semillero de Enfermedades Infecciosas, Programa de Medicina, Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad de Santander UDES, Bucaramanga-Colombia.
4
Profesora, Programa de Bacteriología y Laboratorio Clínico. Grupo de Investigación en Manejo Clínico –CliniUDES-, Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad de
Santander UDES, Bucaramanga-Colombia.
5
Profesora, Escuela de Microbiología, Grupo de Inmunología y Epidemiología Molecular –GIEM-, Universidad Industrial de Santander, Bucaramanga-Colombia.
6
Profesora, Programa de Medicina, Grupo de Investigación Salud Comunid-UDES, Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad de Santander UDES, Bucaramanga-Colombia.
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