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Escherichia coli enterohemorrágica wikipedia , lookup

Transcript
Detección y caracterización de Escherichia coli
productor de toxina Shiga en alimentos
Epidemiología molecular de las infecciones por STEC
Bioq. Isabel Chinen
Servicio Fisiopatogenia, Departamento Bacteriología
Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas
ANLIS “Dr. Carlos G. Malbrán”
DEFINICION DE EHEC / STEC
 Cepas de E. coli productor de toxina Shiga (STEC) que
producen enfermedades severas en el hombre
pertenecen a la categoría de E. coli enterohemorrágico
(EHEC)
 EHEC es un subgrupo dentro de los STEC
 Factores de virulencia en cepas EHEC:
• Toxina Shiga (Stx1, Stx2, variantes de Stx1 y Stx2)
• Factores de adherencia: Isla de patogenicidad (LEE)
• Enterohemolisina (EHEC-Hly)
 Humanos: > 150 serotipos; 50 serotipos asociados a SUH
 Animales, alimentos, otros reservorios: > 200 serotipos
MANIFESTACIONES DE LA INFECCION POR
Escherichia coli PRODUCTOR DE TOXINA SHIGA
 Portación asintomática
 Diarrea acuosa
 Diarrea sanguinolenta
 Colitis hemorrágica
 Síndrome Urémico Hemolítico
Aunque la diarrea se autolimita en 1 semana, 5 – 10% de
los pacientes evolucionan a SUH
SINDROME UREMICO HEMOLITICO
 Anemia hemolítica microangiopática
 Insuficiencia renal aguda
 Trombocitopenia
Tasa de letalidad del 2 al 5%
VIGILANCIA DE SUH Y DIARREAS ASOCIADAS A STEC
Tipos de Estrategias
 Notificación obligatoria, inmediata e individualizada en Planilla C2 al
SNVS. Abril 2000 - Resolución N°346/00
 Vigilancia Centinela: Unidades Centinela con SUH como EVENTO
TRAZADOR DE ETA:
• 24 UC - 16 Jurisdicciones.
Ciudad de Buenos Aires (3), Córdoba, Corrientes, Chaco, Chubut,
Entre Ríos, La Pampa, Mendoza, Neuquén, Pcia. de Buenos Aires (5),
Río Negro, Salta, San Juan, Santa Fé (3), Tucumán, S. del Estero
 Sistema de Vigilancia de Laboratorios (SIVILA)
 Vigilancia molecular (PulseNet de América Latina y El Caribe)
 Programa de Enfermedades Emergentes – OPS
- Países del Conosur y Centroamérica.
SUH - ARGENTINA 2007
160
140
120
5.0
7.6
4.1
2.5
No. of Cases
100
10.2
3.4
80
60
40
20
0
0-12
months
0.9
13-24
months
25-36
months
37-48
months
49-60
months
≥ 61
months
19.2
7.6
25.7
9.6
38.0
12.8
24.7
Male
34.4
Female
14.0
38.0
31.6
22.2
15/100,000 niños
<5 años
120
100
80
No. of Cases
Incidencia
60
40
Ju
ne
ay
M
>20
0
Ju
ly
Au
gu
Se
st
pt
em
be
r
O
ct
ob
er
No
ve
m
De be
r
ce
m
be
r
105.2
20
Ap
ril
0-5
>5-10
>10-20
Ja
nu
a
Fe ry
br
ua
ry
M
ar
ch
9.7
SUH EN ARGENTINA
Alrededor de 300 a 400 casos nuevos por año
Tasa de notificación: 15 / 100.000 niños < 5 años, mas de
10.000 desde 1965
Pródromos: Diarrea 90%, sanguinolenta 75%
1ª causa pediátrica de IRA y 2ª causa de IRC
Responsable del 20% de transplantes renales
Evidencia de infección por STEC en el 40% de casos de SUH
- O157:H7 el serotipo prevalente
- Shigella dysenteriae Tipo 1 no aislada
STEC O157:H7
CODIGO ALIMENTARIO ARGENTINO
El 11 de mayo de 2004, se incluyó en el Código Alimentario
Argentino el art. 156 tris y se modificaron los art. 255 y 302.
Especificaciones microbiológicas
Productos preparados a base de carne picada una vez
cocidos:
ausencia de E. coli/g y ausencia de E. coli O157:H7/NM en 5
muestras de 65 g cada una
Carne picada fresca y chacinados frescos: E. coli máximo 5 x
102 UFC/g, y ausencia de E. coli O157:H7/NM en 5 muestras
de 65g cada una.
Metodología recomendada es la validada por USDA/FSIS.
Características de E. coli O157:H7
Posee la mayoría de las características bioquímicas de
la especie, con las siguientes diferencias:






No fermenta el Sorbitol o lo hace lentamente
No posee actividad de b-glucuronidasa
Temperatura óptima de crecimiento: 30-42ºC
Desarrolla pobremente a 44-45ºC
No desarrolla a temperaturas superiores a 45ºC
No desarrolla a temperaturas de –10ºC pero
sobrevive en productos congelados (-20ºC) sin
cambio en el número total de microorganismos por
períodos prolongados
 Es resistente a los cambios de pH (por Ej. Durante la
fermentación de embutidos
CRITERIOS PARA LA DETECCIÓN
DE STEC O157
 MORFOLOGIA DE LAS COLONIAS EN MEDIO SELECTIVO
 DETECCION DEL SEROGRUPO O157
 CARACTERISTICAS BIOQUIMICAS DISTINTIVAS
 DETECCION DE LA ENTEROHEMOLISINA
 DETECCION DE GENES (stx)
 PRODUCCION DE TOXINA SHIGA (Stx)
DETECCION DE STEC O157 EN ALIMENTOS
CONSIDERACIONES GENERALES
 TEMPERATURAS DE CRECIMIENTO
 BAJO NUMERO DE UFC EN ALIMENTOS
 BAJA DOSIS INFECTIVA (< 100 UFC/G)
Detección, aislamiento e identificación de Escherichia coli
O157:H7 de productos cárnicos
USDA / FSIS (2008)
 ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO
 TAMIZAJE
(-)
(+)
Positivo
potencial
 AISLAMIENTO
- AISLAMIENTO
MEDIOS SELECTIVOS
SEPARACION INMUNOMAGNETICA
- SEROAGRUPAMIENTO
Positivo
presuntivo
 CONFIRMACIÓN
PRODUCCION DE Stx / DETECCIÓN DE GENES stx
DETECCIÓN DE fliCH7
Positivo
IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA
confirmado
ETAPA DE ENRIQUECIMIENTO
 CONDICIONES DE INCUBACION
- TEMPERATURA Y TIEMPO
- SIN AGITACION
42 ± 0.1ºC / 15-22 h
 MEDIOS DE CULTIVO (suplemento antibiótico)
- ECm + novobiocina
- CTS + acriflavina
- CTSm + casaminoácidos + novobiocina
- CTS / AP + vancomicina, cefsulodina y cefixima
 TECNICA DE TAMIZAJE O157
De acuerdo a USDA/FSIS deben cumplimentar:
Sensibilidad: 98%
 Falsos negativos:  2%
 Especificidad:  90%
 Falsos positivos:  10%
 Eficiencia:  94%
Servicio Fisiopatogenia (LNR)
INEI-ANLIS “Dr. C.G. Malbrán”
Detección de STEC O157
Tamizaje. Métodos Rápidos
 ELISA
Premier - Meridian
TECRA
 Test de inmunocromatografía Inmunostat Card - Meridian
REVEAL - Neogen
RapidCheck O157- SDI
Singlepath GLISA - Merck
Lateral Flow System - Dupont
Métodos automatizados
Vidas ICE/ACE - Bio Mérieux
PCR Real Time
NucliSens - Bio Mérieux
Detección, aislamiento e identificación de Escherichia coli
O157:H7 de productos cárnicos
USDA / FSIS (2008)
 ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO
 TAMIZAJE
(-)
(+)
Positivo
potencial
 AISLAMIENTO
- AISLAMIENTO
MEDIOS SELECTIVOS
SEPARACION INMUNOMAGNETICA
- SEROAGRUPAMIENTO
Positivo
presuntivo
 CONFIRMACIÓN
PRODUCCION DE Stx / DETECCIÓN DE GENES stx
DETECCIÓN DE fliCH7
Positivo
IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA
confirmado
 AISLAMIENTO DE STEC
 Procedimiento de diagnóstico definitivo
 Métodos de cultivo
Cultivo directo en medios selectivos
Cultivo con enriquecimiento previo
 Métodos de inmunoconcentración
Separación inmunomagnética (Dynal, Neogen)
Inmunocaptura (TECRA)
miniVIDAS: método automatizado
AISLAMIENTO DE STEC
MEDIOS DE CULTIVO - STEC O157:H7/NM
Selectivos y/o diferenciales
SMAC
C-SMAC
CT-SMAC
Agar Sangre Triptosa
Cromogénicos
Agar O157:H7 ID
CHROMAgar O157
Fluorogénicos
MUG (4-metilumberiferil-β-D-glucurónido)
BCIG (5-bromo-4-cloro-3-indonil -β-D-glucurónido)
SEROAGRUPAMIENTO
Aglutinación directa en lámina
- Antisueros anti-O157 (Difco, INPB)
- Reactivos de látex (OXOID)
Detección, aislamiento e identificación de Escherichia coli
O157:H7 de productos cárnicos
USDA / FSIS (2008)
 ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO
 TAMIZAJE
(-)
(+)
Positivo
potencial
 AISLAMIENTO
- AISLAMIENTO
MEDIOS SELECTIVOS
SEPARACION INMUNOMAGNETICA
- SEROAGRUPAMIENTO
Positivo
presuntivo
 CONFIRMACIÓN
PRODUCCION DE Stx / DETECCIÓN DE GENES stx
DETECCIÓN DE fliCH7
Positivo
IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA
confirmado
Detección, aislamiento e identificación de
Escherichia coli O157:H7 en productos cárnicos
USDA / FSIS (2008)
CONFIRMACIÓN
• IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA
• SEROTIPIFICACIÓN CONFIRMATORIA O157:H7
Al menos uno de los siguientes criterios:
• PRODUCCION DE Stx
• DETECCIÓN DE GENES stx
• DETECCIÓN DE fliCH7
 CONFIRMACION DE STEC
Detección de STX
- Citotoxicidad en células Vero
-Métodos inmunológicos
• ELISA Meridian
• Test de inmunocromatografía Merck
• RPLA Denka Seiken
Detección de genes stx
- Hibridación
- PCR
Detección, aislamiento e identificación de Escherichia coli
O157:H7 de productos cárnicos
USDA / FSIS (2008)
 ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO
 TAMIZAJE
(-)
(+)
Positivo
potencial
 AISLAMIENTO
- AISLAMIENTO
MEDIOS SELECTIVOS
SEPARACION INMUNOMAGNETICA
- SEROAGRUPAMIENTO
Positivo
presuntivo
 CONFIRMACIÓN
PRODUCCION DE Stx / DETECCIÓN DE GENES stx
DETECCIÓN DE fliCH7
Positivo
IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA
confirmado
STEC no-O157
DETECCION DE STEC no-O157 EN ALIMENTOS
CONSIDERACIONES GENERALES
 PREVALENCIA DE STEC no-O157
EXISTEN > 200 SEROTIPOS DESCRIPTOS
 NO PRESENTA CARACTERÍSTICAS DISTINTIVAS
CRITERIO DE DETECCIÓN
oDETECCION DE GENES (stx)
oPRODUCCION DE TOXINA SHIGA (Stx)
Aislamiento e identificación de STEC no-O157 a partir de
muestras de alimento
Enriquecimiento de la muestra
65g de alimento + 585 ml Caldo Ec
Tratamiento en “Stomacher” durante 3 minutos
Incubación a 37ºC - 18 hs
Tamizaje por PCR MK+IAC
Templado:
- 1 ml de caldo enriquecido
- 150 ul de tritón/1% TE)
- PCR MK
(+)
( -)
Aislamiento
- Siembra en placas EMB Levine
Incubación a 37ºC – 18 hs.
Confirmación
- Identificación de la colonia STEC+
por PCR múltiple
-Identificación bioquímica
-Seroagrupamiento por
aglutinación en placa y PCR
-Caracterización de los factores de
virulencia eae/ehxA/saa por PCR
Tamizaje
PCR
MK + IAC
Primer
Secuencia del primer (5’-3’)
Nº de nucleótidos
Tamaño
del fragmento de
amplificación
(pb)
224 o 227
MK 1
TTTACGATAGACTTCTCGAC
20
MK 2
CACATATAAATTATTTCGCTC
21
Concentración de
trabajo del
reactivo
Concentración del
reactivo en
la mezcla
Volumen del reactivo en
la mezcla para una
determinación (l)
10X
1X
5
Mezcla dNTP
2,5 mM
0,1 mM
2
Cl2Mg
50 mM
1,5 mM
1.5
Primer MK 1
0,1 nmol/l
2 pmol/l
0,5
Primer MK 2
0,1 nmol/l
2 pmol/l
0,5
5 U/l
0,02 U/l
0,2
Reactivo
Buffer
Taq polimerasa
Templado
IAC
Agua Trid. estéril
Volumen Final
2
0,2UFC/ l
2
38,3
50
PCR MK + IAC para la detección de
stx1 y stx2 de Escherichia coli
300 pb
200 pb
100 pb
1
2
3
4
5
(+)
(-)
Leotta y col. Enviado a Int. J. Food Microbiol. 2006
cs
M
PCR MK para la detección de los genes stx1 y stx2
E. coli O145:NM stx2
E. coli O157:NM stx1/stx2
Carne con aditivo
1
10
Carne sin aditivo
102 103 1
10
Carne con aditivo Carne sin aditivo
102 103 1
E. coli ONT:H19 stx1
Carne con aditivo
0,01 0,1
1
1
102 103 1
10
102 103
+
- s/t M
+
- s/t M
E. coli O26:H11 stx1
Carne sin aditivo
10 0,01 0,1
10
Carne con aditivo Carne sin aditivo
10 0,1
1
10
102 0,1
1
10
102
STEC O157 y no-O157 DE ORIGEN
HUMANO. 1999-2007
CEPAS STEC
ORIGEN
O157
Nº (%)
no-O157
Nº (%)
SUH
371 (42,1)
148 (58,3)
DS
209 (23,8)
26 (10,2)
D
184 (20,9)
51 (20,1)
OTROS
116 (13,2)
29 (11,4)
TOTAL
880
254
STEC SEROTIPOS
 N = 1134
O157:H7
76%
O8:H19
0,3%
O145:NM
10%
O113:H21
0,3%
O26:H11
2%
O145:H25
0,3%
O111:NM
0,8%
O171:H2
0,3%
O174:H21
0,8%
O8:H16
0,2%
O103:H2
0,6%
O15:H27
0,2%
O91:H21
0,4%
O174:H28
0,2%
STEC O157 y no-O157 DE ALIMENTOS
2003-2007
STEC O157
Nº (%)
STEC no-O157
Nº (%)
STEC Totales
Nº (%)
49 (42,1)
167 (58,3)
216 (100)
 Hamburguesas, carne vacuna, carne picada, carne de cerdo,
embutidos.
 > 30 serotipos diferentes
 Asociados a casos humanos
O157:H7
O8:H19
O103:H2
O113:H21
O91:21
O174:H21
Stx types
80
80
70
70
40
Food
Non-Human
30
20
20
10
10
0
0
Stx types
NT
90
Stx
2c
Stx
2d
Stx
2/
St
x2
Stx
c
2/
St
x2
d
90
Stx
2
50
Human
Strains%
STEC O157
Stx
Stx
1c
1c
/S
tx 2
Stx
c
1c
/S
tx 2
d
60
Stx
1
NT
St
x1
St
St
x1
x1
c
c
/S
St
t
x
x1
2c
c
/S
tx
2d
St
x2
St
x2
c
St
x2
St
x2
d
/S
tx2
St
x2
c
/S
tx2
d
Strains%
Genotipificación de Stx
STEC no-O157
60
50
Human
40
Food
Non-Human
30
eae / ehxA de cepas STEC aisladas de
humanos y alimentos
Humanos
13%
Alimentos
9%
14%
5%
3%
52%
29%
75%
14%
5%
eae + / ehxA +
eae + / ehxA 29%
eae - / ehxA +
eae - / ehxA -
Fagotipos de STEC O157
35
30
Strains %
25
20
Humans
Food
15
10
5
0
2
4
8 14 24 26 31 32 39 45 49 47 54 71 73 87 NT
Phage Type
EPIDEMIOLOGÍA MOLECULAR EN TIEMPO REAL
 PFGE
•
•
•
•
Protocolos de CDC para PulseNet 24-h
Enzimas : XbaI and AvrII/BlnI
Cepa de referencia: S. Braenderup CDC#H9812
Programa informático: BioNumerics Ver. 4.6 (Applied Maths) 2007
 Bases de Datos 1988-2008
STEC O157
Nº de cepas: 1207
Nº de patrones XbaI-PFGE: 524
Patrones prevalentes XbaI-PFGE (17%)
AREXHX01.0011 (118 cepas)
AREXHX01.0022 (83 cepas)
STEC no-O157
Nº de cepas: 450
Nº de patrones XbaI-PFGE: 315
Patrones prevalentes XbaI-PFGE (7%)
AREXSX01.006 (15 strains)
AREXSX01.0124 (14 strains)
• Confirmación de brotes
• Detección de “Clusters”
Brotes difusos
RELACION CLONAL DE CEPAS DE E. coli O157
PERTENECIENTES A UN BROTE EN LA COMUNIDAD
NEUQUEN
Dice (Opt:1.50%) (Tol 1.5%-1.5%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-98.3%]
PFGE-XbaI
PFGE-XbaI
100
95
90
Nº Cepa
XbaI-PFGE
Genotipo Fagotipo Caso Edad Sexo Lugar Código de Brote
Stx
247/07 AREXHX01.0200
.
Stx2only
4
BD
2- 3
F
SM Andes
07NQEXH-3
255/07 AREXHX01.0200
.
Stx2only
4
BD
3- 11
M
SM Andes
07NQEXH-3
254/07 AREXHX01.0200
.
stx2 only
4
HUS 3- 6
M
SM Andes
07NQEXH-3
246/07 AREXHX01.0440
.
Stx2only
4
BD
1- 3
M
SM Andes
07NQEXH-3
HUS 1- 8
M
Neuquén
234/07 AREXHX01.0086
.
Stx2-Stx2vh-a 2
Localidad: San Martín de los Andes
Barrios: El Arenal, Oasis, Centro
Período: 24/02/07 al 03/03/07
Brote de E. coli O157 en un Jardín de Infantes
Entre Rios, Argentina. 2004
Figura 1: confirmación mediante PFGE del Brote
E. coli O157:H7 stx2 / stx2c (stx2vh-a) / eae / ehxA
XbaI-PFGE AREXHX01.0243
BlnI-PFGE AREXHA26.0064
PFGE-BlnI
N° cepa
Origen
Edad
Sexo
100
PFGE-BlnI
PFGE-XbaI
Dice (Opt:1.50%) (Tol 1.5%-1.5%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-98.3%]
63/04
64/04
65/04
99/04
SUH
DS
DS
Asintomático
3 a 10 m
2a4m
4 a 7m
2 años
M
M
F
M
Fecha de
aislamiento
27/01/04
30/01/04
02/02/04
12/02/04
Figura 2: control de excreción de STEC O26:HNT
E. coli O26:NT stx1 / eae / ehxA
XbaI-PFGE AREXSX01.0108
BlnI-PFGE AREXSA26.0069
100
Dice (Opt:1.50%) (Tol 1.5%-1.5%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-98.3%]
PFGE-XbaI
N° cepa
Origen
PFGE-BlnI
Fecha de
Semana
aislamiento epidemiológica
24/02/04
8/04
106/04 ctrol 1
Contacto
106/04 ctrol 2
Contacto
02/03/04
9/04
106/04 orig
Contacto
12/02/04
6/04
Brote Familiar. Neuquén – Agosto/Septiembre 2008
E. coli O157:H7 stx2 / stx2c (stx2vh-a) / eae / ehxA
XbaI-PFGE AREXHX01.0331
BlnI-PFGE AREXHA26.0083
Investigación del caso:
Caso: Niña de 10 meses
SUH (1ºM 25/08/08 y 2ºM 30/08/08)
Diarrea Sanguinolenta (3ºM 08/09/08)
Grupo familiar - 3 contactos asintomáticos: padre (1ºM 11/09/08), madre (1ºM 11/09/08) y tía
(1ºM 11/09/08).
Seguimiento de la excreción:
Caso: niña de 10 meses
Asintomática 27 días luego de la 1º M (4ºM 22/09/08)
Grupo familiar - 1 contacto asintomático: madre 7 días luego de la 1º M (2ºM 18/09/08).
100
Dice (Opt:1.50%) (Tol 1.5%-1.5%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-98.3%]
PFGE-XbaI
PFGE-BlnI
Nº
TM
Origen
Edad (a-m)
Sexo
1
2008-08-25
HUS
0- 10
F
1 2ºM
2
2008-08-30
2008-09-11
HUS
Contacto/padre
0- 10
29
F
M
3
3 2ºM
2008-09-11
2008-09-18
24
24
F
F
1* 3ºM
2008-09-08
Contacto/madre
Contacto/madre
BD
0- 10
F
1* 4ºM
2008-09-22
asintomática
0- 10
F
4
2008-09-11
Contacto/tía
20
F
RELACION CLONAL DE CEPAS DE E. coli O145
PERTENECIENTES A UN BROTE FAMILIAR
Caso SUH : Niña 20 meses
criterios diagnósticos negativos
Contacto hermana: 13 años
Contacto padre: 38 años
Contacto hermana: 15 años
E. coli O145:NM Stx2, Int-, EHEC-Hly
Contacto hermana: 4 meses
Dice ( Opt :1.50%) (Tol 1.5% -1.5%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%
-98.3%]
PFGE -XbaI
100
PFGE
-XbaI
N°Cepa
Patrón XbaI-PFGE
Origen
Procedencia
1104/06
AREXSX01.0006 Contacto/hermana Htal
. Prov. Heller/Neuquén
1105/06
AREXSX01.0006 Contacto/hermana Htal
. Prov. Heller/Neuquén
1106/06
AREXSX01.0006 Contacto/padre
Htal
. Prov. Heller/Neuquén
SUH POR CONSUMO DE HAMBURGUESAS
•
•
Caso: niña de 2 años atendida en el Hospital
Garrahan el 26 de abril de 2002, con diarrea
sanguinolenta que evoluciona a SUH
Alimento sospechoso: hamburguesas caseras
consumidas 48 horas antes del inicio de la
diarrea
•
Se aisló del coprocultivo y del alimento:



Escherichia coli O157:H7
eae/stx2+stx2vh-a/EHEC-hlyA, PT4
con idéntico patrón de XbaI-PFGE y
BlnI-PFGE
Rivas et al. EID 2003, 9: 1184-6
Comparación de patrones de PFGE de Argentina y USA
XbaI pattern EXHX01.0047
BlnI pattern EXHA26.0015
ARG = pattern 1 CDC = pattern 2
Relación genética de cepas STEC O157 por XbaI-PFGE.
Comparación de los resultados obtenidos por técnicas de
subtipificación y datos referentes a las muestras
(origen, lugar y fecha de toma de muestra)
Genotipo stx
XbaI Cluster Muestra
PT
Origen
TM
1
I 841/01 stx 1+stx 2+stx 2vh-a
4
HP
05/08/01
1
I 842/01 stx 1+stx 2+stx 2vh-a
4
HP
17/08/01
1
I 843/01 stx 1+stx 2+stx 2vh-a
4
HP
17/08/01
1
I 844/01 stx 1+stx 2+stx 2vh-a
4
HP
17/08/01
1
I 845/01 stx 1+stx 2+stx 2vh-a
4
HP-C 17/08/01
4
I 511/02 stx 2+stx 2vh-a
4
HC
29/04/02
4
I 512/02 stx 2+stx 2vh-a
4
HC
30/04/02
5
NR 514/02 stx 2+stx 2vh-a
8
HC
29/04/02
stx
2vh-a
6
II 335/02
4-14
HC
25/04/02
7
II 335/02 D stx 2+stx 2vh-a
2
HC
25/04/02
8
II 325/02 stx 2+stx 2vh-a
2
HC
11/04/02
9
NR 470/02 stx 1+stx 2vh-a
14
HC
29/04/02
2
III 869/01 stx 2+stx 2vh-a
4-16
HC-C 27/08/01
2
III 872/01 stx 2+stx 2vh-a
4-16
HC
27/08/01
2
III 888/01 stx 2+stx 2vh-a
4-16
HP
27/08/01
3
III 334/02 stx 2+stx 2vh-a
4-16
HP
25/04/02
3
III 336/02 stx 2+stx 2vh-a
4-16
HC
25/04/02
stx
2+stx
2vh-a
3
III 458/02
rdnc-87
HC
29/04/02
3
III 870/01 stx 2+stx 2vh-a
4-16
HC-C 27/08/01
3
III 871/01 stx 2+stx 2vh-a
4-16
HP-C 27/08/01
HP: Hamburguesa de pollo
HP-C: Hamburguesa de pollo-Cocida
TM: Toma de Muestra
Local
A
A
B
C
D
E
F
G
H
H
I
J
K
D
SD
D
H
L
B
B
HC: Hamburguesa de carne
HC-C: Hamburguesa de carne-Cocida
SD: Sin Dato
CONCLUSIONES
 La recuperación de cepas con idéntico patrón XbaI-PFGE, PT y
genotipo stx de muestras obtenidas:
En diferentes locales
fuente única de contaminación
En distintas fechas
persistencia en la fuente de origen
En muestras crudas y cocidas,
y en el mismo local
falla en el proceso de
cocción o contaminación
cruzada
 La recuperación de cepas con diferente patrón XbaI-PFGE, PT y
genotipo stx de muestras obtenidas:
En el mismo local
diferentes cepas circulantes
CONCLUSIONES
STEC O157 y no-O157 son detectados en
enfermedad humana, en el reservorio animal y en
alimentos
Es importante fortalecer la vigilancia del SUH e
infecciones por STEC mediante:
- Integracción de las diferentes áreas
- Implementación de metodologías sensibles de diagnóstico
tanto en laboratorios clínicos como de bromatología.
- Implentación de PFGE en tiempo real
- Consolidación de la base de datos
Muchas Gracias!