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Morfología de la colonial • Forma – – – – – – Puntiforme Circular y ovalada Filamentosa Irregular Rizoide fusiforme • Elevación – – – – – – – Plana Elevada Convexa Pulvinada Umbonada Montañosa crateriforme Las colonias son masas visibles de células que se forman por división de una o varias células. El desarrollo de colonias sobre superficies de agar permite al microbiólogo identificar las bacterias porque las especies forman a menudo colonias con una forma y aspecto característico. El tamaño, forma, textura y color de una colonia es propio de cada organismo. La morfología de la colonia de una bacteria puede variar según el medio en que crezca la bacteria. • Márgen – – – – – – Entero Ondulado Lobulado Erosionado Filamentoso rizado Left: Escherichia coli cells. Right: E. coli colonies on EMB Agar. Morfología y crecimiento de las colonias Pigmentos de la colonia • • • • Depende de las especies Depende del medio de cultivo Depende de nutrientes Muy variado – – – – – – Blancas Cremas Amarillas claras y brillantes Anaranjadas Rosas claras y brillantes etc. Colonias de bacterias Serratia marcescens Cultivada en Agar MaConkey Pseudomonas aeruginosa Cultivada en Agar Tripticasa-soja Shigella flexneri Cultivada en Agar MacConkey Colonias de Bacillus subtilis que han crecido en medios con pocos nutrientes Fijación y tinción de células • Fijación – Fijación con calor • Fija estructuras externas de la célula. – Fijación con químicos • Fija estructuras internas de la célula. • Tinción – Aumenta visibilidad – Aumenta características morfológicas – Conserva para estudios futuros – Varios tipos Cont. • Tipos de tinciones: – Simple • un solo colorante • determina tamaño, forma y arreglo – Diferencial • clasifíca bacterias en grupos (ej. Gram +, -) – Negativa • detecta cápsula o membrana externa – De esporas • detecta presencia de estructuras de supervivencia – De flagelos • Aumenta grosor del flagelo(s) Transferencia aséptica Consiste en una serie de procedimientos que evitan la contaminación durante la manipulación de los cultivos y de los medios de cultivo estériles. Es uno de los primeros métodos que tiene que dominar un microbiólogo. a.Se calienta el asa de siembra hasta incandescencia y se deja enfriar b. El tubo se destapa c. Se pasa el extremo del tubo por la llama d. Se extrae la muestra con el asa esterilizada e. Se vuelve a flamear la boca del tubo y la muestra se deposita en un medio estéril f. Se vuelve a tapar el tubo y se calienta el asa de nuevo al final Estirilización y técnicas de asepcia • Estirilización – Proceso por el cual se elimina todo tipo de vida de medios o material. • Técnicas de asepcia – Evitar contaminación – Posibles patógenos (riesgo humano) – Descartar apropiadamente Obtención de cultivos puros 2. Siembra en estrías Se esteriliza el asa y luego se toma una muestra del tubo Crecimiento de colonias confluentes al comienzo de la siembra por estría Colonias aisladas al final de la siembra por estría 1. Dilución y siembra por extensión en superficie Se realiza una siembra por estría en una placa de agar con medio estéril. Después de una estría inicail Se hacen estrías en ángulo 3. Dilución y siembra en profundidad
