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Lab. 3 Bacteriología
BIOL 3052
Instructora Suheidy Valentín
Bacterias



Células procariotas
Son muy
pequeñas, miden
desde 0.2 a 10 μm.
Reproducción
asexual


Fisión binaria
Conjucación
Bacterial Cell Components
Árbol filogenético de los Dominios
The Phylogenetic Tree of Life based on Comparative ssrRNA
Sequencing.The rooted Tree lands the prokaryotes in two Domains, Archaea and
Bacteria. At a taxonomic level, organisms at the tips of the Archaeal branches
represent Orders; the tips of the bacterial branches are Phyla. The most important,
best known, and diverse groups branching off of the Bacterial limb are the
Cyanobacteria, Proteobacteria and Gram positives.
¿Cómo se clasifican?
Forma y arreglo de las células
 Morfología de la colonia
 Tipo de locomoción
 Pigmentos de la colonia
 Tinciones
 Requisitos nutricionales
 Secuencias moleculares de DNA y

RNA
Forma de las células

Pared celular





Esta hecha de
Peptidoglucano
Es porosa
Provee protección
Dá forma
Puede tener una
segunda
membrana sobre
la pared celular
• (provee toxicidad)
Formas y arreglos celulares

Formas







Bacilos
Cocos
Espirilos
Vibrio (forma de coma)
Cuadrados
Estrellas
Chromatium vinosum, Thiospirillum jenense, Thiopedia rosea
Arreglos






Solas
Pares
Tétadras
Octadas
Cadenas
Paquetes
Rhodospirillum rubrum, Rhodobacter sphaeroides, Rhodomicrobium vannielii
Chlorobium limicola, Prosthecochloris aestuarii, Pelodictyon clathratiforme
Morfología de la colonia

Forma







Elevación








Puntiforme
Circular y ovalada
Filamentosa
Irregular
Rizoide
fusiforme
Plana
Elevada
Convexa
Pulvinada
Umbonada
Montañosa
crateriforme
Márgen






Entero
Ondulado
Lobulado
Erosionado
Filamentoso
rizado
Left: Escherichia coli cells. Right: E. coli colonies on EMB Agar.
Tipo de locomoción

Estructuras proteicas:

Pili
• Estructuras de
anclaje

Flagelos
• Uni-,bi-, o multiflagelado
• Dispersión por el
hábitat
• Migran hacia
nutrientes
• Los alejan de
ambientes adversos
Tipos de movimiento

Taxis

Movimiento que responde a diversos
estímulos
• Quimiotaxis
• Fototaxis
• Magnetotaxis
Pigmentos de la colonia




Depende de las especies
Depende del medio de cultivo
Depende de nutrientes
Muy variado






Blancas
Cremas
Amarillas claras y brillantes
Anaranjadas
Rosas claras y brillantes
etc.
Fijación y tinción de células

Fijación

Fijación con calor
• Fija estructuras
externas de la
célula.

Fijación con
químicos
• Fija estructuras
internas de la
célula.

Tinción




Aumenta
visibilidad
Aumenta
características
morfológicas
Conserva para
estudios futuros
Varios tipos
Cont.

Tipos de tinciones:


De esporas
• detecta presencia
de estructuras de
supervivencia
Diferencial
• clasifíca bacterias
en grupos (ej.
Gram +, -)
Negativa
• detecta cápsula o
membrana
externa
Simple
• un solo colorante
• determina
tamaño, forma y
arreglo



De flagelos
• Aumenta grosor
del flagelo(s)
Requisitos nutricionales

Nutrientes

Medios de cultivo
Macroelementos
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•


Carbono
Oxígeno
Hidrógeno
Nitrógeno
Azufre
Fósforo
Potasio
Calcio
Magnesio
Hierro
Oligoelementos
•
•
•
•
•
•
Manganeso
Cinc
Cobalto
Molibdeno
Níquel
Cobre

Consistencia
• Medios sólidos (agar)
• Medios semi-sólidos
• Medios líquidos
(caldos nutritivos)

Tipos
• Medios selectivos
• Favorece
crecimiento de una
bacteria particular
• Medios diferenciales
• Distingue entre
grupos
• Se observan
reacciones
Secuencias moleculares
Phylogenetic tree of Bacteria
Estirilización y técnicas de asepcia

Estirilización


Proceso por el cual
se elimina todo tipo
de vida de medios o
material.
Técnicas de
asepcia



Evitar contaminación
Posibles patógenos
(riesgo humano)
Descartar
apropiadamente
A. Investigar las carac. de las bacterias



Objetivos:
Observar y describir la morfología de las
colonias y de las bacterias individuales.
A. Morfología de las colonias
Teoría:
Colonia crece de una bacteria
Cada colonia tiene carac. Específicas
Ver fig.13.1 de la separata para describir las
carac. de las colonias.
A. Investigar las carac. de las bacterias

1.
2.
3.
4.
5.
Ocasionalmente colonias de hongos
pueden contaminar los platos de bacterias
Procedimiento:
Limpiar el área de trabajo con desinfectante
Se utilizara el microscopio
Utilizar los medios que se le van a proveer,
mantenerlos CERRADOS!
Examinar las colonias individuales anotar la
inf. en la tabla 13.1
Utilizando los términos de la fig.13.1
seleccionar cuales describen las colonias.
B. Morfología de las Cél. Individuales


Objetivo:
Examinar las laminillas de bacterias que
ilustran las 3 formas básicas de las
bacterias en adición se examinaran y
describiran las bacterias de la boca.
Teoría:
Las bacterias se pueden clasificar en 3
formas básicas: bacilos, coco, espirilos
Placa de los dientes
B. Morfología de las Cél. Individuales
1.
2.
Procedimiento:
Utilizar el microscopio para observar las
formas de las bacterias y luego dibujarlas
Para conocer las formas de las bacterias
encontradas en los dientes, se va ha
preparar una laminilla de la placa:
a.
b.
c.
Laminilla limpia
Coloque una gota de agua en la laminilla,
dejela secar al aire
Utilizando un palillo de dientes raspe sus
dientes cerca de las encías, luego se mezcla
con la gota de agua
Mezclar y tratar de esparcirlo en la
laminilla dejar que seque
e. cuando este seca la laminilla,
aguantarla con el pinche de ropa y
pasarlo por encima del mechero sin
pegarlo a la flama
f. colocar la laminilla en una bandeja y
aplicar de 2a3 gotas de cristal violeta
g. Dejarlo por un min.
h.lavar con agua de las botellitas en la
bandeja
Secar con papel especial no raspar.
3.Observar la forma de la bacteria en el
microscopio.
d.
C. Identificar bacterias del Ambiente
Procedimiento
1.Escoger el ambiente para realizar muestreo. Puede ser
del aire, agua, superficie etc. No se debe hacer del
cuerpo
a. Hacer una hipótesis del crec. De las bact. En ese
ambiente
2.Utilizar platos de agar para su muestra
3.Se descartan los hisopos, identificar en el plato el
ambiente seleccionado
4. Sellarlos con parafina y luego encubarlos por 24h a25°C
5. Observar los resultados
D. Control de Crecimiento Bacteriano
Procedimiento
1. Identificar el plato de agar con el núm. De
sección, la bacteria y el agente a utilizarse.
2. Preparar el plato con la bacteria:
3. Añadir el desinfectante, antiseptico al plato con
discos empapados del agente, un cuadrante es
el control.
4.La siguiente semana observar la sensitividad del
antibiótico y los otros agentes. Medir el diámetro
de la zona de inhibición.
5. Sellarlos con parafina y luego encubarlos a 37°C
6. Anotar los resultados en una tabla.
Ejemplo
1. Control
2. Lysol
3. Alcohol
4. Clorox
Observar resultados (zona de
inhibición)
1
2
3
4