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Bacterias sin pared y
Bacterias intracelulares obligadas
Objetivo
Conocer las principales características biológicas
de los Mycoplasmas, Chlamydias y Rickettsias, su
capacidad para producir infecciones, las
posibilidades diagnósticas y las medidas
profilácticas
1
Mycoplasmas - Taxonomía
Clase
Mollicutes
Familia
Mycoplasmataceae
Géneros
Mycoplasma
Ureaplasma
Especies
M. pneumoniae
M. hominis
U. urealyticum
2
Mycoplasmas - Características generales
• No poseen pared celular (Bacterias carentes de pared celular)
• Poseen esteroles en su membrana celular
• Requerimiento de lípidos complejos preformados
(colesterol)
• Anaerobios facultativos y algunos anaerobios estrictos
• Son pleomórficos (esféricos hasta filamentosos)
• Pueden desplazarse por movimiento ameboide en medios
líquidos
• Pueden existir como saprófitos o producir enfermedades
• Genoma pequeño
• Resistencia natural a los beta lactámicos
3
FACTORES DE VIRULENCIA
•
•
•
•
•
•
Proteína P1 (Mycoplasma pneumoniae)
P50 y P100 (Mycoplasma hominis)
Glicopéptido sulfatado
Fosfolipasa (Ureaplasma urealyticum)
Disminución de la actividad macrofágica
Nucleasas
4
Mycoplasma pneumoniae
• El determinante de patogenicidad es la producción de peróxido
de hidrógeno que produce la muerte de las células epiteliales por
mecanismos desconocidos.
• Coloniza las vías respiratorias superiores
• Se adhiere a las células de la mucosa respiratoria inferior.
• Produce neumonía atípica primaria
• Se propaga por contacto directo de hombre a hombre
• Afecta a todas las edades y suelen producirse brotes familiares
5
M. pneumoniae - Diagnóstico
• Cultivo a partir de secreciones respiratorias: no es muy utilizado
pues se necesitan medios especiales, muy enriquecidos y con
inhibidores para otras bacterias.
• Detección de anticuerpos en el suero del paciente: puede
hacerse por ELISA, aglutinación de látex o inmunofluorescencia
indirecta
• Los síntomas y los datos epidemiológicos contribuyen mucho al
diagnóstico etiológico
6
M. hominis y U. urealyticum
• Son flora habitual del aparato génitourinario.
• Su determinante de patogenicidad es la producción de
amoníaco a partir de la urea (U. urealyticum) y de la arginina
(M. hominis)
• Pueden producir inflamación oportunista tanto en el hombre
como en la mujer.
• Las manifestaciones son uretritis en el hombre y vaginosis en
la mujer por asociación con otras bacterias.
• Pueden producir complicaciones en el hombre, la mujer y en
el recién nacido.
7
DIFICULTADES DIAGNÓSTICAS
• No se colorea al Gram
• Necesitan medios especiales (ricos, antibióticos,
suero equino)
• Método comercial costoso
• Medio de cultivo artesanal
- Obtención del suero equino
• Limitaciones presupuestarias
8
Mycoplasmas urogenitales - Diagnóstico
• Cultivo a partir de secreciones genitales: no es muy utilizado
pues se necesitan medios especiales, muy enriquecidos y con
inhibidores para otras bacterias.
• Detección de anticuerpos en el suero del paciente: puede
hacerse por ELISA o inmunofluorescencia indirecta.
• Los síntomas y los datos epidemiológicos contribuyen mucho al
diagnóstico etiológico
9
Chlamydias - Taxonomía
Familia
Chlamydiaceae
Géneros
Chlamydia
Especies
C. psittaci
C. pneumoniae
C. trachomatis
Biovar LGV (linfogranuloma venéreo)
Biovar TRIC (Tracoma-conjuntivitis de inclusión)
10
Chlamydias - Características generales
•
•
•
•
•
•
•
Parásitos intracelulares obligados
Son incapaces de sintetizar ATP
Por mucho tiempo se los consideró virus
Estructura de pared de gramnegativas
Son cocoides e inmóviles
No observables con Gram por su pequeño tamaño
Poseen dos formas biológicas:
– Cuerpo elemental (CE): infectivo y no replicante
– Cuerpo reticulado (CR): no infectivo y replicante
11
Chlamydias - Ciclo vital
Cuerpo elemental infectante
Ingreso por endocitosis
Endososoma
Lisosomas
Lisosomas
Núcleo
Eliminación de la progenie
Formación del cuerpo de inclusión
Transformación en cuerpo reticulado
Multiplicación del CR
12
Chlamydias - Patologías
Especie
Patología
Transmisión
C. trachomatis
Biovar LGV
Linfogranuloma
venéreo
Sexual
C. trachomatis
Biovar TRIC
Tracoma
Conjuntivitis
Infecciones genitales
Contacto directo
Sexual
Durante el nacim.
C. pneumoniae
Neumonía atípica
Respiratoria
C. psittaci
Psitacosis
Aves al hombre
13
Chlamydias - Diagnóstico
• MÉTODOS DIRECTOS
–
–
–
–
Cultivo en líneas celulares
Observación con Lugol y Giemsa (Cuerpos de inclusión)
Detección por Inmunofluorescencia directa o ELISA
Detección por PCR
• MÉTODOS INDIRECTOS
– Detección de anticuerpos por IFI o ELISA
14
Inmunofluorescencia
La sensibilidad y especificidad de la IF
con el uso de anticuerpo
monoclonales para el MOMP
(Mayor Outer Membrane Protein) de
C. trachomatis es del 80-90% y
98-99 % respectivamente.
La IF tiene mayor sensibilidad que la
EIA ya que permite detectar de 10
a 100 cuerpos elementales.
Ventajas:
• Se independiza del transporte
• Se puede utilizar para una gran
variedad de muestras
• Tiene alta especificidad
• Se puede utilizar como método
confirmatorio de otros métodos
cuando existen discrepancias.
Desventajas
• Necesita de un microscopio de
fluorescencia de gran resolución
15
PCR
Las técnicas moleculares (PCR)
tienen hasta un 96% de
sensibilidad.
Detectan en forma directa el
ADN bacteriano.
Permite detectar 1 cuerpo
elemental presente en la
muestra
Ventajas
• Se independiza del transporte
• Se pueden utilizar muestras
no invasivas (Ej. Orina)
• Muy alta sensibilidad y
especificidad.
Desventajas
• Se pueden tener falsos
negativos por presencia de
inhibidores
• Alto costo
16
Rickettsiales y Legionellales - Taxonomía
Familias
Rickettsiaceae
Coxiellaceae
Géneros
Rickettsia
Ehrlichia
Coxiella
Especies
R. rickettsii
C. burnetii
R. prowasekii
R. typhi
E. chaffeensis
17
Rickettsiales - Características generales
•
•
•
•
•
•
Parásitos intracelulares obligados
Son incapaces de sintetizar ATP
Estructura de pared de gramnegativas
Pueden ser cocoides, bacilares o pleomórficas
No observables con Gram por su pequeño tamaño
Habitan en artrópodos hematófagos que actúan como vectores
o huéspedes primarios.
18
Rickettsia y Coxiella - Patogenicidad
• Estas bacterias infectan eritrocitos, células retículoendoteliales y
epitelio vascular.
• Penetran a la célula huésped induciendo la endocitosis
• Rickettsia abandona el endosoma y se reproduce en el citoplasma
mientras que Coxiella se reproduce en el endolisosoma luego de la
fusión del endosoma con el lisosoma.
• Finalmente la célula del huésped estalla, liberando organismos
nuevos.
• Además de los efectos de la lisis celular el huésped padece los
efectos de la toxicidad de la pared.
• Los síntomas aparecerán en función del tejido afectado (epitelio
pulmonar, endotelio vascular o monocitos circulantes)
19
Epidemiología
Agente
Vector
Reservorio
Transmisión
Patología
Manifestación
Garrapatas
Roedores,
perros,
zorros
Picadura del
artrópodo
Fienre
manchada
Vasculitis
Fiebre
R. prowazekii
Piojos
Hombre
Heces del
artópodo
Tifus
epidémico
Vasculitis
Fiebre
R. typhi
Pulgas
Roedores
Heces del
artópodo
Tifus
endémico
Vasculitis
Fiebre
E. chaffeensis
Garrapatas
Animales
salvajes
Picadura del
artrópodo
Erliquiosis
Enfermedad
febril
inespecífica
C. burnetii
Garrapatas
(sólo en los
animales)
Animales
salvajes y
domésticos
Inhalación de
polvo
contaminado
Fiebre Q
Neumonía
atípica
R. rickettsii
20
Diagnóstico
• MÉTODOS DIRECTOS
–
–
–
–
Cultivo en líneas celulares
Observación con Giemsa (Excepto para Coxiella)
Detección por Inmunofluorescencia directa en las muestras
Detección por PCR
• MÉTODOS INDIRECTOS
– Detección de anticuerpos por IFI
• IgG > 1/128 e IgM > 1/32
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