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Procariontes. Estudios morfológico y comparativo de bacterias Objetivo Conocer las principales características biológicas de las bacterias. Su capacidad para producir infecciones, las posibilidades diagnósticas y las medidas profilácticas 1 2 Cianobacterias • Las cianobacterias (Cyanobacteria, gr. κυανός kyanós, "azul"), antiguamente llamadas algas verdeazuladas. Comprende las bacterias capaces de realizar fotosíntesis oxigénica. • Son los únicos procariontes que llevan a cabo ese tipo de fotosíntesis, por ello también se les llamó oxifotobacterias Prof. Laura irene Piccoli. Microbiología General FaCENA UNNE 3 Cianobacterias • Las cianobacterias fueron designadas durante mucho tiempo como algas cianófitas . • Las cianobacterias más comunes son unicelulares cocoides (esferoidales), con cápsula mucilaginosa, o formando filamentos simples. • Los filamentos pueden aparecer agregados en haces, envueltos por mucílago, o de una manera que aparenta ramificación. Prof. Laura irene Piccoli. Microbiología General FaCENA UNNE 4 Rhizobium Es un género de bacterias gramnegativas del suelo que fijan nitrógeno atmosférico. Pertenece a un grupo de bacterias fijadoras de nitrógeno que se denominan colectivamente rizobio. Viven en simbiosis con determinadas plantas en su raíz, después de un proceso de infección inducido por la propia planta, a las que aportan el nitrógeno necesario para que la planta viva y esta a cambio le da cobijo. Prof. Laura irene Piccoli. Microbiología General FaCENA UNNE 5 Célula bacteriana Prof. Laura irene Piccoli. Microbiología General FaCENA UNNE 6 Conceptos básicos • • • • • • • Organización del material genómico 1 solo cromosoma No asociado a histonas ARNm sintetiza sobre el DNA Reproducción Fisión binaria Estabilidad genética Prof. Laura irene Piccoli. Microbiología General FaCENA UNNE 7 Conceptos básicos • • • • • • • • • Contenido celular No membrana nuclear No mitocondrias No REP Movimiento Reptación, filamentos axiales, flagelos Envolturas Pared celular Ribosomas Prof. Laura irene Piccoli. Microbiología General FaCENA UNNE 8 Conceptos básicos • • • • • • • Tamaño y forma Composición química Estructuras bacterianas Esenciales: MCP, Citoplasma, Ribosomas, ADN Facultativas: Capsulas, Flagelos, Fimbrias, Pillus Prof. Laura irene Piccoli. Microbiología General FaCENA UNNE 9 Tamaño Prof. Laura irene Piccoli. Microbiología General FaCENA UNNE 10 Cocos Prof. Laura irene Piccoli. Microbiología General FaCENA UNNE 11 Cocos en acumulos Prof. Laura irene Piccoli. Microbiología General FaCENA UNNE 12 Cocos en cadenas Prof. Laura irene Piccoli. Microbiología General FaCENA UNNE 13 Prof. Laura irene Piccoli. Microbiología General FaCENA UNNE 14 Bacilos Gram positivos Prof. Laura irene Piccoli. Microbiología General FaCENA UNNE 15 Espiroquetas Prof. Laura irene Piccoli. Microbiología General FaCENA UNNE 16 Mycoplasmas - Características generales • NO POSEEN PARED CELULAR (Bacterias carentes de pared celular) • Poseen esteroles en su membrana celular • Requerimiento de lípidos complejos preformados (colesterol) • Anaerobios facultativos y algunos anaerobios estrictos • Son pleomórficos (esféricos hasta filamentosos) • Pueden desplazarse por movimiento ameboide en medios líquidos • Pueden existir como saprófitos o producir enfermedades • Genoma pequeño • Resistencia natural a los beta lactámicos 17 FACTORES DE VIRULENCIA • Capacidad de adherirse a los epitelios mediante glicoproteinas: •Proteína P1 (Mycoplasma pneumoniae) •P50 y P100 (Mycoplasma hominis) • Glicopéptido sulfatado • Fosfolipasa (Ureaplasma urealyticum) • Disminución de la actividad macrofágica • Nucleasas • No se conoce la producción de toxinas • No son intracelulares 18 Mycoplasma pneumoniae • El determinante de patogenicidad es la producción de peróxido de hidrógeno que produce la muerte de las células epiteliales por mecanismos desconocidos. • Coloniza las vías respiratorias superiores • Se adhiere a las células de la mucosa respiratoria inferior. • Produce neumonía atípica primaria • Se propaga por contacto directo de hombre a hombre • Afecta a todas las edades y suelen producirse brotes familiares 19 M. pneumoniae - Diagnóstico • Cultivo a partir de secreciones respiratorias: no es muy utilizado pues se necesitan medios especiales, muy enriquecidos y con inhibidores para otras bacterias. • Detección de anticuerpos en el suero del paciente: puede hacerse por ELISA, aglutinación de látex o inmunofluorescencia indirecta • Los síntomas y los datos epidemiológicos contribuyen mucho al diagnóstico etiológico 20 M. hominis y U. urealyticum • Son flora habitual del aparato génitourinario. • Su determinante de patogenicidad es la producción de amoníaco a partir de la urea (U. urealyticum) y de la arginina (M. hominis) • Pueden producir inflamación oportunista tanto en el hombre como en la mujer. • Las manifestaciones son uretritis en el hombre y vaginosis en la mujer por asociación con otras bacterias. • Pueden producir complicaciones en el hombre, la mujer y en el recién nacido. 21 DIFICULTADES DIAGNÓSTICAS • No se colorea al Gram • Necesitan medios especiales (ricos, antibióticos, suero equino) • Método comercial costoso • Medio de cultivo artesanal - Obtención del suero equino • Limitaciones presupuestarias 22 Chlamydias - Características generales • • • • • • • Parásitos intracelulares obligados Son incapaces de sintetizar ATP Por mucho tiempo se los consideró virus Estructura de pared de gramnegativas Son cocoides e inmóviles No observables con Gram por su pequeño tamaño Poseen dos formas biológicas: – Cuerpo elemental (CE): infectivo y no replicante – Cuerpo reticulado (CR): no infectivo y replicante 23 Chlamydias - Ciclo vital Cuerpo elemental infectante Ingreso por endocitosis Endososoma Lisosomas Lisosomas Núcleo Eliminación de la progenie Formación del cuerpo de inclusión Transformación en cuerpo reticulado Multiplicación del CR 24 Determinantes antigénicos • LPS: Específico de género • MOMP (proteína mayor de la membrana externa): Contiene epítopes específicos de género, especie, subgrupo y serovariedad. 25 Patogenia • C. trachomatis sintetiza proteínas “de stress” que se expresan en la membrana de la célula huésped. La reacción inflamatoria y cicatrizal desencadenada contra estas proteínas explica la obstrucción tubaria en infecciones genitales, y la ceguera en el tracoma. 26 Chlamydias - Patologías Especie Patología Transmisión C. trachomatis Biovar LGV Linfogranuloma venéreo Sexual C. trachomatis Biovar TRIC Tracoma Conjuntivitis Infecciones genitales Contacto directo Sexual Durante el nacim. C. pneumoniae Neumonía atípica Respiratoria C. psittaci Psitacosis Aves al hombre 27 Chlamydias - Diagnóstico • MÉTODOS DIRECTOS – Cultivo en líneas celulares – Observación con Lugol y Giemsa (Cuerpos de inclusión) – Detección por Inmunofluorescencia directa o ELISA – Detección por PCR • MÉTODOS INDIRECTOS – Detección de anticuerpos por IFI o ELISA 28 Rickettsiales - Características generales • • • • • Parásitos intracelulares obligados Son incapaces de sintetizar ATP Estructura de pared de gramnegativas Pueden ser cocoides, bacilares o pleomórficas No observables con Gram por su pequeño tamaño • Habitan en artrópodos hematófagos que actúan como vectores o huéspedes primarios. 29 Rickettsia y Coxiella - Patogenicidad • Estas bacterias infectan eritrocitos, células retículoendoteliales y epitelio vascular. • Penetran a la célula huésped induciendo la endocitosis • Rickettsia abandona el endosoma y se reproduce en el citoplasma mientras que Coxiella se reproduce en el endolisosoma luego de la fusión del endosoma con el lisosoma. • Finalmente la célula del huésped estalla, liberando organismos nuevos. • Además de los efectos de la lisis celular el huésped padece los efectos de la toxicidad de la pared. • Los síntomas aparecerán en función del tejido afectado (epitelio pulmonar, endotelio vascular o monocitos circulantes) 30 Epidemiología Agente Vector Reservorio Transmisión Patología Manifestación Garrapatas Roedores, perros, zorros Picadura del artrópodo Fienre manchada Vasculitis Fiebre R. prowazekii Piojos Hombre Heces del artópodo Tifus epidémico Vasculitis Fiebre R. typhi Pulgas Roedores Heces del artópodo Tifus endémico Vasculitis Fiebre E. chaffeensis Garrapatas Animales salvajes Picadura del artrópodo Erliquiosis Enfermedad febril inespecífica C. burnetii Garrapatas (sólo en los animales) Animales salvajes y domésticos Inhalación de polvo contaminado Fiebre Q Neumonía atípica R. rickettsii 31 Diagnóstico • MÉTODOS DIRECTOS – Cultivo en líneas celulares – Observación con Giemsa (Excepto para Coxiella) – Detección por Inmunofluorescencia directa en las muestras – Detección por PCR • MÉTODOS INDIRECTOS – Detección de anticuerpos por IFI • IgG > 1/128 e IgM > 1/32 32 Rickettsiales - Taxonomía Familias Rickettsiaceae Coxiellaceae Géneros Rickettsia Ehrlichia Coxiella Especies R. rickettsii C. burnetii R. prowasekii R. typhi E. chaffeensis 33 Legionella spp. • Legionela es el nombre común del género Legionella, bacterias Gram negativas con forma de bacilo. • Viven en aguas estancadas con un amplio rango de temperatura, preferiblemente superior a 35ºC. Poseen respiración aerobia y un flagelo para desplazarse. Prof. Laura irene Piccoli. Microbiología General FaCENA UNNE 34 Legionella spp. • La especie más importante es Legionella pneumophila por sus implicaciones médicas. • La legionela puede multiplicarse dentro de amebas y su cocultivo es a veces el mejor método conocido para detectar su presencia infecciosa. Prof. Laura irene Piccoli. Microbiología General FaCENA UNNE 35 Legionella spp. • La infección por legionela se denomina legionelosis, pudiendo presentarse como una enfermedad febril, bien de carácter leve y sin focalización pulmonar denominada fiebre de Pontiac, o bien de carácter severo como una neumonía atípica denominada enfermedad del legionario Prof. Laura irene Piccoli. Microbiología General FaCENA UNNE 36 Espiroquetas - Taxonomía Orden Spirochaetales Familia Spirochaetaceae Leptospiraceae Género Treponema Borrelia Leptospira Especie T. pallidum B. recurrentis L. interrogans 37 Espiroquetas - Características Diámetro Espiras Observación en fresco Tinciones Cultivo in vitro Condiciones Respiratorias Reservorio Patología Treponema 0.2 micras Borrelia 0.3 micras Leptospira 0.1 micras Regulares y apretadas Irregulares y amplias Numerosas,regulares y apretadas Campo oscuro Microscopía ordinaria Campo oscuro y contraste de fases Impregnación argéntica No Giemsa o Gram Si Impregnación argéntica Si Anaerobias Anaerobias Aerobias Hombre Animales y artrópodos Animales Sífilis Fiebre recurrente Leptospirosis 38 Espiroquetas - Morfología 39 Sífilis - Definición Enfermedad de transmisión sexual y vertical provocada por Treponema pallidum con manifestaciones localizadas o sistémicas, según el estadío de la misma 40 Sífilis - Agente etiológico Treponema pallidum es un bacilo espiralado, anaerobio, no cultivable en medios sintéticos, muy sensible a los cambios de temperatura 41 Sífilis - Patogenia Período Duración Clínica Diagnóstico Directo Serología Primario 3-6 semanas Chancro Fondo oscuro IFD FTAabs Secundario Exantema cutáneo - Fondo oscuro IFD - Terciaria 4-12 semanas 3-30 años Variable Gomas Neurosífilis Anatomía patológica VDRL FTAabs VDRL FTAabs FTAabs Congénita - Malformaciones óseas - Latente VDRL FTAabsIgM 42 Sífilis - Diagnóstico Serológico • V.D.R.L. – – – – – – Antígeno no treponémico (cardiolipina) Reacción de Floculación Sensible pero poco específica Falsos positivos (títulos < 8 dils) Se utiliza para screening Puede aplicarse en suero y LCR • FTAabs – Antígeno treponémico – Reacción de IFI, se absorbe el suero con Treponemas no patógenos – Sensible y específica – Se utiliza para confirmar V.D.R.L. positiva – Se aplica en suero 43 Sífilis - Profilaxis • • • • • • Educación pública Tratamiento rápido y adecuado de los casos Seguimiento y tratamiento de los contactos Higiene sexual Control de las embarazadas Uso de preservativos 44 Leptospirosis - Patogenia Animal infectado (roedores) Orina Agua, terrenos húmedos Mucosas o Lesión cutánea Leptospiremia (Febril-anictérica o meningítica) Leptospiruria (hepatonefrítica-ictérica) 45 Leptospirosis - Diagnóstico • • • • • • Muestras: sangre, LCR, orina Observación directa con Campo oscuro Impregnación argéntica IFD Cultivo (Fletcher) Detección de Ac (ELISA) 46 Leptospirosis - Profilaxis • • • • Eliminación del reservorio Desinfección de sitios contaminados Medidas de protección individual Control de basurales y silos 47