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VIH.
Virus de la inmunodeficiencia
humana, agente etiológico del
SIDA.
Introducción
• El VIH provoca un deterioro del sistema inmune,
lo que lleva a la aparición de infecciones
oportunistas y neoplasias, que son lo que
caracteriza al SIDA que es la etapa final de la
enfermedad.
• El tiempo promedio desde la infección hasta la
aparición del SIDA, en la mayoría de la gente es
de diez años.
Características moleculares.
• Pertenece a la familia retroviridae, y a la
subfamilia lentiviridae.
• Dos tipos:
VIH-1 más importante.
VIH-2.
• Partícula esférica, constituida por tres estructuras:
- Nucleoide: que contiene el ARN y enzimas.
- Cápside: icosaédrica.
- Envoltura: derivada de la célula huésped.
• Tiene gran cantidad de genes y proteínas
reguladoras, lo cual lleva a una compleja relación
virus-célula y patogenia viral. ( 8 genes reg ).
Ciclo de replicación viral
• Adsorción, fusión e internalización del virión:
Ocurren principalmente por la presencia del gp120 y gp41.
Gp120: establece la primera interacción con el receptor CD4 del
linfocito TCD4
Gp41: permite la fusión de ambas membranas. Esto produce una
proteolisis de la zona lo que permite que el VIH inicie la
infección.
• Transcripción inversa e integración.
El ARN viral entra, se replica-transcribe gracias a la transcriptasa
reversa, y forma una cadena de ADNv.
La segunda cadena de ADNv se forma gracias a la ribonucleasa
H. Y ahora, ambas cadenas se insertan el el ADN celular , como
provirus.
Tambien quedan restos de ADNv, sueltos en el citoplasma celular.
• Latencia.
Estímulos como mitógenos, generarián la síntesis de factores
de transcripción, activando la transcripción de genes celulares.
Esto estimularía la transcripción del provirus latente en la célula.
• Expresión génica temprana y tardia.
En la etapa temprana se expresan genes reguladores y en la
tardia los genes estructurales y enzimáticos.
• Morfogénesis y salida.
La ribonucleoproteina en el citolasma, con al ARN y las
proteínas forman el nucleoide, y finalmente este migra hacia la
membrana celular donde se recubre de esta misma.
Clasificación de la infección por
VIH-1
• Importancia clínica: ayudar a determinar en que etapa de la
enfermedad se encuentra el paciente, y en base a esto determinar
la prevención de infecciones, tiempo entre controles, tratamiento
a seguir, y pronóstico.
• Las más aceptadas actualmente son dos:
- Clasificación del Center of diseases control (CDC) de 86 y 92
- Clasificación de la OMS de 1990.
Inmunopatogenia del VIH.
• Las células que poseen receptores CD4, serán el blanco del VIH,
el cual al destruirlas producira su deplesión.
• Las principales células que poseen este receptor son: LT CD4 y
monocitos-macrófagos.
• Algunas de las funciones normales de linfocitos
Activación de macrófagos
Secrecion de citoquinas
IL-2, interferon gama.
Inducción de citotoxicidad
mediada por cels. T
Inducción de células B
Inducción de NK.
Los mecanismos específicos mediante los cuales el VIH
destruye los LT CD4 son desconocidos.
Se postulan mecanismos :
• Directos
A) Daño en membrana por
masiva salida se VIH
B) Proteínas virales al
insertarse en membrana
celular alteran
permeabilidad
C) Alteración metabólica
celular por acumulo de
ARNv y ADNv.
D) unión gp120-CD4 intra
celular, interfiriendo en
función celular
• Indirectos
A) Infección de células
precursoras, que lleva a
muerte celular.
B) formación de
sincicios,entre LT CD4
infectados y LT CD4 no
infectados.
C) Destrucción Autoinmunes
de LT CD4.
Serología de la infección
• Período ventana: Va desde la infección por el VIH hasta la
aparición de anticuerpos anti VIH. Suele durar 2 a 10 semanas.
• Seroconversión: Cuando como respuesta a los antígenos
virales, se sintetizan IgM e IgG. (anticuerpos).
• Los tests usados hoy en día para diagnosticar VIH+ , se basan
principalmente en la detección de estos anticuerpos.
• Luego de la seroconversión, el individuo puede permanecer
asintomático por meses o años, y su viremia será baja.
• A medida que aumenta la sintomatología, tambien lo hace la
viremia, y los anticuerpos disminuyen. (core).
Técnicas de laboratorio
• Se dividen en dos grupos:
A- Para detección de anticuerpos anti-VIH.
1. De descarte: ELISA, aglutinación de partículas y técnicas
de procedimiento rápido.
2. De confirmación: Western-blot, inmunofluoresencia
indirecta y radioinmunoprecipitación.
B- Para detección de antígenos virales.
PCR, cultivos virales y microscopia electrónica.
ELISA
• Se basa en la presencia de anticuerpos anti VIH. Dos
tipos indirecto y competitivo.
• Se pone en contacto suero del paciente con antígenos
del VIH.
• Si el suero trae Ac, estos se unen a los Ag formando un
inmunocomplejo.
• Se pone en contacto al inmunocomplejo con una antiinmunoglobulina marcada con una enzima como la
peroxidasa, la cual reacciona cambiando de color, si la
anti-inmunogloblina se une al Ac.
Western-blot.
• Primera etapa: Obtención de tiras de nitrocelulosa con las
proteínas virales en ellas. Estas proteínas antes son separadas
por una eletroforésis, y de ahí se traspasan a las tiras, quedando
distribuidas de acuerdo a su peso molecular.
• Segunda etapa: Interacción entre las tiras, el suero del paciente
y los reactivos.
Básicamente el mecanismo es el mismo que el de ELISA, es
decir tambien aquí se usa una anti-inmunoglobilina con una
enzima que reacciona al unirse con el complejo inmune, y que
se verá como una banda coloreada.
• WB negativo: No se formó ninguna banda, o el patrón no se
conoce.
• WB positivo: Por lo menos dos bandas, y una de ellas o las
dos, deben corresponder a proteínas producidas por el gen env.
Técnica de la PCR.
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Util en casos especiales: niños nacidos de madres portadoras,
diag.dif de otros retrovirus, detección de ARN/ADNv de
líquidos, células, tejidos u órganos.
Detecta ADN-proviral o ARNv.
Se basa en la reacción de la polimerasa en cadena que permite
amplificar segmentos del genoma delVIH, los cuales luego son
sometidos a electroforésis y después se tiñen para poder verlos
como bandas fluorescentes.
Util para determinar la resistencia de estos pacientes a
tratamientos anti-virales, ya que se sabe la secuencia de genes
antes y después de un tratamiento.
Una PCR cuantitativa, nos da la carga viral, la cual nos permite
evaluar al paciente antes y después de un tratamiento, y ver si a
mejorado o no.
Bibliografía.
• 1. Sepúlveda.C, Afani.A, SIDA, Segunda edición,
1997, cap. 3, 4, y 6.
FIN