Download "La ausencia de Priones en Hidrolisados" Lic. Carlos Rodriguez

LABORATORIO LINFAR S.R.L
Suplementos Dietarios
ENCEFALOPATIA
ESPONGIFORME
BOVINA
( SINDROME DE LAS VACAS LOCAS )
CARLOS HUGO RODRIGUEZ
Licenciado en Química
INTRODUCCIÓN.
En la década del 50, el médico GAJDUSEK describió una patología fatal del
sistema nervioso en Nueva Guinea, a la que habitualmente los indígenas llaman Kuru
(escalofrío) y que afecta a una pequeña población de ese país.
En el año 1959 el médico veterinario HADLOW describió similitudes clínicas y
neuropatológicas entre el Kuru y el scrapie ovino (tembladera), patología descripta en el siglo
XVIII. A fines de 1960, GAJDUSEK puso de manifiesto que el Kuru tiene características
muy comunes con la enfermedad de CREUTZFELDT – JAKOB, una curiosa demencia pre
senil que se describió por primera vez a principios del siglo XX.
Para esta misma época varias enfermedades con sintomatología similares se
agruparon con el nombre de Encefalopatías Sub-agudas Espongiformes Transmisibles
(ESET).
Se sugirió en todas estas patologías la presencia de un agente infeccioso carente
de ácidos nucleicos y capaz de producir y transmitir la enfermedad.
Recién en 1982, PRUSINER describió y aisló las partículas proteicas infecciosas
a las que llamo PRION. En 1983 se identificó la proteína y se la denominó PrP (Prion
Protein). Lo mas sorprendente de esto es que se descubrió que la PrP estaba en el hospedador
y a partir de allí se descubrieron las dos proteínas: PrP y PrP-sc, la segunda es la causante de
las ESET.
El estudio químico permitió saber que ambas proteínas poseen la misma secuencia
de aminoácidos y que la diferencia entre una y otra es el plegamiento de la estructura, es
decir, la conformación espacial. Se destacó además que una PrP es capaz de inducir el cambio
de conformación produciéndose PrP-sc.
Este comportamiento contrasta con el principio general de la química, enunciado
por MONOD:
“La secuencia de aminoácidos o estructura primaria de la proteína determina de manera
unívoca el plegamiento de la proteína para adoptar la estructura terciaria. Entre los muchos
plegamientos posibles de la molécula solo se da uno”.
La teoría de los priones propuesta por PRUSINER contradice este principio, pues
para una misma secuencia de aminoácidos le corresponde dos plegamientos distintos.
Además, que una proteína induzca a otra igual a un replegamiento implica un flujo de
información que no se había dado antes.
Cuando se estudia el Genotipo de las ovejas afectadas, se comprueba que en el
gen de la proteína poseía en el codon 171 la configuración guanidina - guanidina que es la
unión mas sensible para la pérdida de la configuración espacial. La proteína PrP parece estar
en los organismos vivos y el ingreso de una Pr-sc produce la desnaturalización de las PrP
normales.
La función de la proteína PrP parece estar relacionado con las neuronas de
PURKINJE y la regulación del sueño.
SINTOMATOLOGÍA
En las ovejas, cabras y bovinos se observa temblores y fuertes pruritos que
degeneran en importantes heridas, pues el animal busca la forma rascarse, para ello se
friccionan la parte del prurito contra troncos, alambres, paredes, máquinas, etc. produciéndose
una herida. El análisis post - morten del animal muestra vacuolas vacías en el tejido nervioso.
La enfermedad progresa en forma lenta e irreversible, con una alteración en el
comportamiento con fases de depresión y excitación, adelgazamiento, caquexia y muerte. Este
período dura entre 3 y 6 meses.
En los bovinos solo se presenta en adultos (2 - 4 años), con una frecuencia de 1: 100.000 .
En humanos las lesiones cerebrales mas representativas consiste en la
vacuolización de neuronas y neurofilo localizados en muchos nervios específicos del bulbo,
frente, y cerebelo. También se observa astrocitosis.
Los métodos de detección se realiza por la identificación de la proteína PrP-sc a
través de la biopsia de las admídalas o bien de la membrana nictitante o tercer párpado de los
animales sospechosos. Lo mas llamativo de esta patología es que no produce inflamación ni
respuesta inmunitaria alguna, es decir que su efector no posee cualidades antigénicas. No es la
alimentaria solamente la vía de transmisión, sino la vía vertical (madre a hijo) y no solo el
cerebro sufre la infección, sino que también puede afectar el hígado, pulmón, bazo, ganglios
linfáticos.
HIPÓTESIS VÍRICA
A nivel bioquímico posee una elevada resistencia a ciertas sustancias químicas
que son agentes desnaturalizantes de ácidos nucleicos. Si bien es cierto que presenta cierta
resistencia a las temperaturas inferiores a 80ºC, por encima de ello se desnaturaliza con
facilidad. Lo mismo pasa con ciertos solventes en los que la PrP se desnaturaliza.
Existe una teoría que sugiere que el agente infeccioso no es una proteína sino un
virus lento. Algunas propiedades de este agente avalan esta hipótesis:
- no produce respuesta inflamatoria.
- largo período de incubación.
- filtrables con poros 25nm. o 100nm.
- período de adaptación a nuevos hospedadores.
- control genético de la susceptibilidad en algunas especies.
- Existencias de distintas cepas.
- Patología crónica progresiva.
En muchas de las encefalopatías, se ha comprobado, que obedecen a estos agentes
patógenos. Precisamente algunas propiedades mas que las citadas anteriormente son las
siguientes:
Se inactivan:
- autoclave 121ºC (por encima de 85º C)
- hipoclorito de sodio 0,5 – 5,0 %
-
fenol 90 %
éter
acetona
permanganato de potasio al 0,002 M
urea 6 M
2- clorofenol
cloroformo
HIPÓTESIS PROTEICA
El aspecto replicativo del agente infeccioso es la mayor traba para aceptar que
este factor es de naturaleza proteica. Asociar la partícula proteica con ácidos nucleicos no
resulta convincente para nadie.
Sin embargo ALPER y colaboradores en 1967, demostraron que para la
replicación no se requieren ácidos nucleicos. Estudiaron el efecto de la radiación ultravioleta
sobre suspensiones de extractos cerebrales infectados de ratón. Expusieron durante 1,5 horas
la suspensión a radiación ultravioleta de 15 W de potencia a una distancia de 50 cm, usando
una radiación de 255 a 265 nm de longitud de onda.
Se sabe que este tipo de radiación inhibe la replicación en virus y bacterias.
PRUSINER en 1982 siguiendo los estudios de ALPER (publicados en NATURE)
terminó por demostrar que el material infeccioso no contiene ARN ni ADN. Para eso se
sometió a una serie de test degradantes de ácidos nucleicos a varios preparados con material
infeccioso: homogenados de cerebro, fracciones microsomales, preparaciones de placa
amieloides y complejo formado por detergente – y complejos detergentes, líquidos proteínas. Los métodos usados para dañar ácidos nucleicos fueron:
-
Nucleasas (encimas).
Psoralenos
Hidroxilamina
Iones Zinc
Radiación ionizante.
Radiación ultravioleta
A raíz de estos resultados PRUSINER introdujo el termino prion que significa
Proteinaceous Infectious Particle y lo hizo para diferenciar a estas partículas de bacterias,
virus, hongos, levaduras, etc., y se lo define como “partículas proteicas carentes de ácidos
nucleicos”.
La pregunta que surgió es: dónde y cómo se forma el prion. La respuesta la dió el
equipo del doctor HOOD en el año 1984: “el gen que codifica a la proteína esta en el genoma
del hospedador”. Este gen se lo denomina PRP que significa prion proteína y en el hombre se
encuentra en el codon 171 y en el brazo menor del cromosoma 20.
Prácticamente todos los seres vivos poseen este gen y por lo tanto es natural su
presencia en todos los individuos portadores del gen. En principio se creía que el gen PRP
solo se expresaba en aquellos individuos que eran infectados por la proteína PrP-sc y que esta
proteína es la inductora de la expresión del gen.
Un descubrimiento importante es que la proteína PrP es proteasa sensible en los
individuos sanos, mientras que en los organismos enfermos la proteína PrP es proteasa
resistente. Esto se debe a que la proteína PrP posee una configuración en hélices alfa, mientras
que la proteína PrP-sc posee mayor proporción de proteínas con configuración en hélices beta.
HIDROLIZADOS Y PRIONES
Los hidrolizados bovinos son directamente productos de órganos bovinos. Esto a
inducido a algunos profesionales médicos si hay alguna posibilidad de la presencia de priones
en estos productos. La respuesta es categórica y definitiva: no es posible la presencia de
priones en los hidrolizados de órganos bovinos. La ausencia de priones se puede explicar
entre muchas razones:
-
El 12 de enero de 1998, el Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria
(SENASA), declaró ante la Oficina Internacional de Epizootias (OIE), a la República
Argentina como país libre de BSE en aplicación a lo dispuesto al respecto en el
código Zoosanitario Internacional.
- Los insumos bovinos son nacionales y provienen de animales alimentados a campos
con forraje y no con alimentos balanceados de origen animal.
- Argentina no importa carne de Europa.
- El proceso productivo de Peptonas implican operaciones térmicas en las cuales toda
proteína cualquiera sea su configuración espacial es destruida.
Lic. Carlos H. Rodríguez
Córdoba, abril de 2001