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IDENTIFICACION DE LA MICROBIOTA NORMAL EN YEGUAS REPRODUCTORAS ANGELA ESCOBAR 07352016 OBJETIVOS • Determinar los diferentes tipos de bacterias que se encuentran en la microbiota normal del útero en yeguas reproductoras. • Determinar los tipos de bacterias que se encuentran en la microbiota del útero de yeguas problema. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA • La infertilidad en yeguas es un problema que afecta la producción equina tanto a nivel nacional como internacional. • Este problema obedece a muchas causas, entre ellas infecciosas, anatómicas, inmunológicas, desbalances nutricionales, siendo éstos últimos los de menor importancia en producción equina y los más sencillos de resolver con una dieta adecuada y descanso. • La infertilidad en la yegua puede ser ocasionada por una variedad de factores o condiciones que sin excepción producirán un resultado similar, una yegua incapaz de producir un potro vivo. • Es importante determinar si las bacterias q habitan en el útero son las responsables de los problemas de fertilidad de las yeguas y así poder encontrar un método que ayude a tratarlo eficazmente. • Estudiar la microbiota normal del útero de yeguas reproductoras para mejorar la producción en equinos y determinar la efectividad de los métodos diagnósticos utilizados para el aislamiento de las bacterias. • ¿ TODAS LAS BACTERIAS AISLADAS DEL ÚTERO DE LAS YEGUAS REPRODUCTORAS SON PATÓGENAS? • Estudios muestran que varias especies de bacterias (Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Flavobacterium spp, Corynebacterium haemolyticum, Pseudomona fluorescens, Bacillus spp, Micrococcus spp, Streptococcus spp) pueden estar presentes en las diferentes partes internas del aparato reproductor de la hembra como flora normal. • Bribiesca, Elliot, Mc Kinnon y Scout. Afirman que estos microorganismos son flora normal del aparato reproductor equino y que se tornan patógenos cuando el medio ambiente uterino se ve alterado por procesos inflamatorios propios de los eventos de la reproducción y no se genera una adecuada respuesta de los mecanismos de defensa uterinos MATERIALES • 2 YEGUAS PROBLEMA EN ESTADO ESTRAL • 1 YEGUA NORMAL EN ESTADO ESTRAL • HISOPOS • CEPILLOS • MEDIO DE TRANSPORTE PARA LAS MUESTRAS (CALDO CASO) • SOLUCION SALINA • • • • • • • • • • • • • LAMINAS PORTAOBJETO GUANTES DE LATEX GUANTES PARA INSEMINAR TAPABOCAS VENDA TUBOS DE ENSAYO SENSIDISCOS (SXT, S, CN, CIP, FFC) LUBRICANTE JABON NEUTRO AGAR SANGRE AGAR MAC CONKEY AGAR MULLER HINTON BATERIA BIOQUIMICA METODOS SE REALIZO: • UN EXAMEN FISICO GENERAL DE LAS TRES YEGUAS. • UN EXAMEN DEL APARATO REPRODUCTOR POR MEDIO DE PALPACIÓN TRANSRECTAL DE LAS TRES YEGUAS TOMA DE MUESTRAS (YEGUAS EN CELO) • • FROTIS ENDOMETRIAL CON HISOPO FROTIS ENDOMETRIAL CON CEPILLO LAS MUESTRAS FUERON TRASLADADAS AL LABORATORIO EN DOS MEDIOS (CALDO CASO Y SOLUCION SALINA) SE INCUBARON A 37ªC • EXAMEN BACTERIOLOGICO PARA DETERMINAR LAS DIFERENTES BACTERIAS DEL UTERO DE LAS YEGUAS. • REPIQUE EN AGAR SANGRE Y AGAR MAC CONKEY DE CADA UNA DE LAS MUESTRAS ENDOMETRIALES TOMADAS • SE REALIZARON TINCIONES CON LA TECNICA DE GRAM • SE REALIZO UN CULTIVO EN BATERIA BIOQUIMICA • ANTIBIOGRAMA • TEST DE NOVOBIOCINA •PRUEBAS DE CATALASA •PRUEBAS DE COAGULASA RESULTADOS LUISA BUEN ESTADO FISICO SE ENCONTRO NORMAL EL APARATO REPRODUCTOR A LA PALPACION SE PROCEDIO A LAVAR Y A DESINFECTAR LA ZONA DE LA VULVA Y EL RECTO CON AGUA Y JABON NEUTRO. TOMA DE MUESTRAS CON HISOPO Y CON CEPILLO LABORATORIO LAS MUESTRAS FUERON LLEVADAS A LA INCUBADORA A 37ªC DE UN DIA PARA OTRO. SE REPICO EN AGAR SANGRE Y EN AGAR MACCONKEY GRAM CULTIVO SE OBSERVARON BACILOS GRAM NEGATIVOS TEST DE BATERIA BIOQUIMICA F.A= NEGATIVO SIM= NEGATIVO R.M.= NEGATIVO VOGES= POITIVO MALONATO= POSITVO MOTILIDAD= POSITIVA UREA= POSITIVA CITRATO= POSITIVO TSI= A/A LIA= K/k H2S = NEGATIVO Enterobacter aerogenes ANTIBIOGRAMA TRIMETROPIL SULFA SXT= SENCIBLE ESTREPTOMICINA S = SENCIBLE FLORAFENICOL FFC = SENCIBLE CIPROFLOXACINA CIP =SENCIBLE GENTAMICINA CN = RESISTENTE NOVELA DEL 8 BUEN ESTADO FISICO SE ENCONTRO NORMAL EL APARATO REPRODUCTOR A LA PALPACION SE PROCEDIO A LAVAR Y A DESINFECTAR LA ZONA DE LA VULVA Y EL RECTO CON AGUA Y JABON NEUTRO. TOMA DE MUESTRAS CON HISOPO LAS MUESTRAS FUERON LLEVADAS A LA INCUBADORA A 37ªC DE UN DIA PARA OTRO. SE REPICO EN AGAR SANGRE Y EN AGAR MACCONKEY COLONIA BLANCA PUNTIFORME, BORDE CONTINUO, BETAHEMOLITICA GRAM CULTIVO SE OBSEVARON COCOS GRAM POSITIVOS PRUEBA DE CATALASA: POSITIVA PRUEBA DE COAGULASA: NEGATIVA TEST DE NOVOBIOCINA SENCIBLE Estafilococo epidermidis ANTIBIOGRAMA TRIMETROPIL SULFA SXT= RESISTENTE ESTREPTOMICINA S = SENCIBLE FLORAFENICOL FFC = SENCIBLE CIPROFLOXACINA CIP =SENCIBLE GENTAMICINA CN = SENCIBLE BAYA BUEN ESTADO FISICO SE ENCONTRO NORMAL EL APARATO REPRODUCTOR A LA PALPACION SE PROCEDIO A LAVAR Y A DESINFECTAR LA ZONA DE LA VULVA Y EL RECTO CON AGUA Y JABON NEUTRO. TOMA DE MUESTRAS CON CEPILLO SE REPICO EN AGAR SANGRE Y EN AGAR MACCONKEY GRAM CULTIVO EN LAS COLONIAS PEQUEÑAS SE OBSEVARON COCOS GRAM POSITIVOS EN LAS COLONIAS GRANDES SE OBSERVARON BACILOS GRAM POSITIVOS PRUEBA DE CATALASA: POSITIVA Estafilococo PRUEBA DE COAGULASA: NEGATIVA ANTIBIOGRAMA Y TEST DE NOVOBIOCINA CONCLUSIONES • ENTEROBACTER AEROGENES ES UNA BACTERIA QUE HACE PARTE DE LA FLORA NORMAL DEL APARATO REPRODUCTOR AUNQUE NO SE CONOCE MUCHO SOBRE ELLA SE DEBE TENER EN CUENTA COMO UNA ALERTA DE INFERTILIDAD. •ESTAFILOCOCO EPIDERMIDIS AISLADO DE LA YEGUA NOVELA DEL 8 HACE PARTE DE LA FLORA NORMAL DEL UTERO POR LO TANTO SE PODRIA DECIR QUE EL PROBLEMA DE INFERTILIDAD NO ES BACTERIANO. •ESTAFILOCOCO •EL METODO PARA LA RECOLECCION DE LAS MUESTRAS UTERINAS CON CEPILLO RESULTO SER MAS EFICIENTE QUE CON EL HISOPO PUESTO QUE SE RECOJE MAS CONTENIDO Y NO SE PIERDE EN EL CATETER.