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MEDIO DE CULTIVO
Bacteriología General
Catálogo 1306
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CALDO LACTOSADO CON MUG
USO
Medio de cultivo para investigar especialmente la presencia rápida de Escherichia coli detectada por fluorescencia
iluminando con una lámpara de luz UV de 366 nm, en derivados de leche, agua y diversos productos farmacéuticos. Es el
medio indicado para la detección y cuenta del número más probable (NMP) de organismos coliformes.
PRINCIPIO
La peptona y el extracto de carne proporcionan al medio los nutrientes necesarios para el desarrollo de los
microorganismos. La lactosa es el carbohidrato de prueba y su fermentación se manifiesta por la formación de gas, que se
observa en la campana de Durham, como una prueba presuntiva para coliformes. El sustrato 4-metilumbeliferil-β-Dglucorónido (MUG), es transformado por la enzima β-D-glucuronidasa de Escherichia coli, en 4-metilumbeliferona, este
compuesto se caracteriza por ser fluorescente al iluminarse con una lámpara de luz UV de 366 nm, lo que permite su
detección en forma inmediata, siendo esta prueba un indicador de la presencia de Escherichia coli.
La evaluación de la muestra de ensayo se realiza conforme a los métodos descritos para la investigación
bacteriológica de agua. Incubar 48 h a 35ºC. La presencia de gas en la campana de Durham indica la presencia de
Escherichia coli o de otros coliformes. Utilizando una lámpara de luz UV de 366 nm, los tubos que muestran fluorescencia
azul claro confirman la presencia de Escherichia coli.
FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA
Extracto de carne de res
Lactosa
3.0
4-Metilumbeliferil-β-D-glucorónido
5.0
Peptona de gelatina
pH 6.9 ± 0.2
0.1
5.0
PREPARACION
Rehidratar 13.1 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos y mezclar hasta completa disolución.
Distribuir en tubos de ensayo con campana de Durham. Esterilizar en autoclave a 121ºC (15 lbs de presión) durante 15 minutos.
Conservar en refrigeración de 2º a 8ºC. Antes de utilizar el medio verificar que en la campana no existan burbujas de aire.
De acuerdo a la técnica a seguir será la alícuota de la muestra que se mezcle con determinadas cantidades de caldo lactosado.
Incubar 18 – 24 h a 35ºC. Observar si hay producción de gas en la campana, lo que constituye una prueba presuntiva positiva de la
presencia de coliformes.
NOTA: Para alcanzar una concentración final constante en la composición del medio de cultivo (13.1 g/l) se debe partir
de
una concentración inicial adecuada de caldo lactosado.
Las cantidades se indican en la siguiente tabla:
DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F.
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MEDIO DE CULTIVO
Bacteriología General
Catálogo 1306
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INOCULO
(ml)
1
10
10
100
100
100
CALDO LACTOSADO
(ml)
10
10
20
20
35
50
CONCENTRACION DEL CALDO LACTOSADO
(g/l)
13.1
26.2
19.65
78.6
50.44
39.3
CONTROL DE ACTIVIDAD
MICROORGANISMO
Escherichia coli
CEPA
ATCC 25922
Salmonella typhimurium
Proteus vulgaris
ATCC 14028
ATCC 8427
CRECIMIENTO
Bueno, con fluorescencia al iluminar con luz UV de 366
nm
Bueno, sin fluorescencia
Bueno, sin fluorescencia
BIBLIOGRAFIA
Standard Methods for the Examination of Dairy Products 12th DE., Am. Publ. Health Assoc. Inc. New York, 1967
Standard Methods for the Examination of Water and Waste Water (12th Ed., Am Publ. Health Assoc., Inc. New York, 1965)
United States Pharmacopeia XXIII cap. “Microbial Tests”, 1995
Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos. Sexta Edición pp 191, 1994
PRESENTACION
No. Cat.
1306
1306-E
Deshidratado 1000 g
Deshidratado 500 g
No. Cat.
1306-A
Deshidratado 450 g
DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F.
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