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MEDIO DE CULTIVO Bacteriología General Catálogo 1308 _ ___________________________________________________ CALDO EC CON MUG USO Para detección de coliformes y demostración rápida de Escherichia coli por fluorescencia a partir de agua, alimentos y diversas muestras, después de incubar 18 – 24 h a 35ºC. PRINCIPIO La peptona biotriptasa proporciona al medio los nutrientes necesarios para el desarrollo de las bacterias. Las sales biliares inhiben el crecimiento de Gram positivos. La lactosa es la fuente de energía para los coliformes especialmente Escherichia coli que la fermentan con producción de gas. Escherichia coli produce la enzima β-D-glucuronidasa, que actúa sobre el sustrato 4-metilumbeliferilβ-glucorónido (MUG), transformándolo en 4-metilumbeliferona. Este compuesto se caracteriza por ser fluorescente al iluminarse con una lámpara de luz UV de 366 nm, lo que permite su detección fácilmente y por lo tanto, es un indicador de la presencia de Escherichia coli. El empleo y la evaluación se efectúan conforme a los métodos descritos para el control bacteriológico del agua. La presencia de gas en la campana de Durham después del período de incubación confirma la presencia de Escherichia coli u otros coliformes. Inocular los tubos conteniendo el medio de cultivo con la muestra problema. Incubar 24 h a 35ºC. La presencia de gas en la campana de Durham es prueba presuntiva de la presencia de coliformes. Utilizando una lámpara de luz UV de 366 nm, los tubos que muestran fluorescencia azul claro confirman la presencia de Escherichia coli. FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA Cloruro de sodio Fosfato dipotásico Fosfato monopotásico Lactosa 5.0 2.75 2.75 5.0 4-Metilumbeliferil-β-D-glucorónido Peptona biotriptasa Sales biliares 0.05 20.0 1.5 pH 6.9 ± 0.2 PREPARACION Rehidratar 37 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullición durante 1 minuto para disolverlo por completo. Distribuir en tubos de ensayo o frascos con campana de Durham. Esterilizar en autoclave a 121ºC (15 lbs de presión) durante 15 minutos. Conservar en refrigeración de 2º a 8ºC. Antes de utilizar el medio verificar que en la campana no existan burbujas de aire. CONTROL DE ACTIVIDAD MICROORGANISMO Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Salmonella typhimurium CEPA ATCC 25922 ATCC 10031 ATCC 14028 CRECIMIENTO Bueno, fluorescente al iluminar con luz UV de 366 nm Bueno, no fluorescente Bueno, no fluorescente GAS + + - BIBLIOGRAFIA Standard Methods for examination of water and wastewater 15th ed. Ed. American Public Health Association: Washington D.C. 1980 Norma Interna DIBICO, S. A. de C. V. PRESENTACION No. Cat. 1308 1308-E Deshidratado 1000 g Deshidratado 500 g No. Cat. 1308-A Deshidratado 450 g DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F. 3