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EJERCICIOS PROTEÍNAS
1. Las técnicas de separación de proteínas se basan en
lo siguiente, EXCEPTO:
A. Solubilidad de la protína
B. Viscosidad de la proteína
C. Carga de la proteína
D. Afinidad espercífica de la proteína
2. Los primeros pasos de la purificación de una
proteína incluyen
A. Homogeneización
B. Centrifugación diferencial
C. Precipitación
D. Unión a ligandos
3. El proceso de salting out involucra
A. La precipitación de proteínas usando cobre en medio
alcalina
B. La precipitación usando sulfato de amonio
C. La precipitación por calor seguido de enfriamiento
D. La solubilización de las proteínas
4. Cuál de los siguientes métodos se debería de usar
para separar a las proteínas con una gran diferencia
en masa molecular?.
A. Diálisis
B. Salting-out
C. Centrifugación por gradiente
D. cromatografía de exclusión molecular
5. En cuál de los siguientes métodos las proteínas se
separan por carga?
A. cromatografía de afinidad
B cromatografía de intercambio iónico
C. diálisis
D. cromatografía de exclusión molecular
6. Si una proteína es colocada en un pH arriba de su
punto isoeléctrico se encuentra con una carga:
A. Neutra
B. Positiva
C. Negativa
D. No influye en la proteína
7. En la cromatografía de filtración en gel la separación
de proteína se basa en:
9.
B. Cromatografía de afinidad
C. Cromatografía en filtración en gel
D. Electroforesis nativa
En una cromatografía de intercambio aniónico la
columna contiene
A. una resina cargada negativamente
B. una resina cargada positivamente
C. una resina cargada tanto positiva como
negativamente
D. un resina una al ligante de la proteína
10. CONTESTA LO QUE SE TE PREGUNTA SOBRE LA
SIGUIENTE FIGURA:
A) Respecto a los estándares de peso molecular, ¿cuál
es la banda de alto peso molecular y cual la de bajo
peso molecular?
B) De acuerdo a lo que sabes de electroforesis el pI de
la proteína estará por arriba o por debajo de 8.9.
C) Calcula el peso molecular de la banda purificada.
11. Llena la tabla sobre las características de los
métodos de purificación de proteínas
Característica
Lowry
A. El tamaño y la carga neta
B. El tamaño y la forma
C. El tamaño y la unión específica a ligantes
D. La forma y la carga neta
8. El uso de la insulina para purificar a su receptor es
un ejemplo de
A. Cromatografía de intercambio iónico
Aminoácidos o
enlaces que
reconoce
Sensibilidad
Compuestos
que interfieren
Destruye la
muestra
Compuesto
empleado para
la detección de
la proteína
Método
Bradford
A280
nm
12. CALCULO DE CONCENTRACIÓN DE PROTEÍNAS:
Se maceraron 2g de hojas de jitomate con 3 ml de
una solución amortiguadora de fosfatos, el
extracto proteico se diluyo 1:5 para determinar la
concentración de proteína por el método de
Bradford. Calcula la cantidad de proteína/ g de
tejido usando los siguientes datos.
Curva
estándar
Muestra dil
1.5
BSA (g)
0
0.5
2.5
5
10
ul de la muestra
5
10
15
Ejercicios de cinética
Un científico trabajando con un sistema de fermentación
observo un tipo de inhibición de su enzima al convertir el
sustrato en producto. El observo con cuidado las gráficas que
se le produjeron en condiciones estándar e inhibidas (ver
Figura). Responde lo siguiente y resuelve el misterio.
Abs
0
0,041
0,284
0,595
1,079
Abs
0,32
0,673
0,981
13. EJERCICIO CONSTRUCCIÓN DE UNA TABLA DE
PURIFICACIÓN:
RESPONDE LO SIGUIENTE:
¿A qué se refiere la tabla con actividad expresada
en U?
B. ¿Cómo determinas la actividad específica si solo
conoces los valores que se te presentan en la tabla?
C. ¿En qué unidades se encuentra?
D. Calcula la actividad específica y llena la tabla que se
te proporciona
E. ¿Qué significa el rendimiento de la purificación?
F. En que unidades está expresado
G. ¿Cómo lo calculas?
H. Llena la tabla con el rendimiento obtenido
I.
A que nos referimos cuando decimos veces de
purificación
J. ¿En qué unidades se expresa?
K. Calcula y coloca en la tabla los valores de veces de
purificación que hacen falta
L. Cuál es el paso de purificación en donde se obtiene
la mayor purificación, justifica tú respuesta en base a
los valores de la tabla.
M. Si en dos pasos de purificación hubieras tenido el
mismo valor de veces de purificación, que te dice
respecto a la eficiencia de los dos métodos
utilizados
A.
14. ¿Qué tipo de gráfico se está representando?
A) Michaelis-Menten
B) Dobles recíprocos
C) Hanes
D) Sigmoide
15. ¿Cuál de las dos curvas representa el efecto del
inhibidor sobre la actividad de la enzima?
A) La curva A
B) La curva B
C) Ambas curvas
D) Ninguna
16. El inhibidor presente en el fermentador produce una
inhibición de tipo:
A) Irreversible
B) Competitivo
C) No competitivo
D) Mixto
17. ¿Cuál es el efecto del inhibidor sobre la Vmax de la
reacción?
A) Incrementarla
B) Disminuirla
C) Ninguno
D) Datos insuficientes
18. ¿Cuál es el efecto del inhibidor sobre la Km de la
reacción?
A) Incrementarla
B) Disminuirla
C) Ninguno
D) Datos insuficientes
19. ¿Cómo puede el investigador resolver su problema
de inhibición en su fermentador?
A) Disminuyendo la concentración de sustrato
B) Manteniendo la concentración de sustrato
C) Incrementando la concentración de sustrato
D) Datos insuficientes
20. Se midió la actividad de la LDH utilizando 10 uL de
una dilución 1:500 de un extracto que tiene una
concentración de 4 .5 mg/mL. El medio de ensayo
incluyo piruvato, amortiguador a pH 7.0 y NADH, para
un volumen final con todo y enzima de 800 uL.
Usando los siguientes datos calcula la actividad de la
enzima.
Tiempo
(min)
0.5
1
1.5
2
2.5
3
3.5
4
4.5
5
Absorbancia
340 nm
1.114
1.006
0.855
0.770
0.647
0.538
0.422
0.336
0.330
0.143
21. Con los datos que se presentan en la tabla determina
el valor de Vmax.
[S] (µM)
3
5
10
30
90
V0 sin inhibidor
(µmol/min)
10.4
14.5
22.5
33.8
40.5
V0 con inhibidor
(µmol/min)
4.1
6.4
11.3
22.6
33.8
22. Cuál es la Km
23. ¿Cuál es el tipo de inhibición?
24. Con los datos que se te presentan en la tabla
determina cuál es el tejido que contiene a la lactato
deshidrogenasa con la mayor eficiencia catalítica,
para responder esto primero tienes que buscar la
siguiente información:
A) ¿Qué es la eficiencia catalítica?
B) ¿Qué parámetros cinéticos se utilizan para
determinarla?