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DNA microarray
El DNA microarray o chip de DNA consiste en una superficie (generalmente de vidrio) a
la que se unen fragmentos de cDNA por hibridación con sondas específicas. Estos
instrumentos se utilizan para determinar la expresión diferencial de genes en diversas
circunstancias, por ejemplo, en presencia o ausencia de una enfermedad.
Su funcionamiento es el siguiente:
1. Se aísla el mRNA de las células a
estudiar.
2. Este mRNA se transcribe a DNA
gracias a la enzima
reversotranscriptasa. A este DNA
monocatenario se le denominará cDNA
(compementario).
3. Se marca el cDNA de cada tipo de
célula con un fluoróforo de un color
diferente (verde y rojo).
4. Ambos tipos de cDNA se mezclan y
se depositan en los diferentes poros
del chip. En cada uno de ellos hay
sondas específicas que hibridarán con
el DNA correspondiente a un solo gen.
5. Finalmente se estudia la imagen generada por un escáner de laser a
partir de la fuorescencia para determinar cuáles son los genes
activos en uno u otro estado.
En este video se muestra todo el proceso anterior:
Animación microarray de genes de levadura en aerobiosis/anaerobiosis:
http://www.bio.davidson.edu/genomics/chip/chipQ.html