Download Diagnostico en Genetica

Diagnóstico en Genética
¿Qué es lo que se puede
diagnosticar?
• Mutaciones
– Cromosómicas
– Genéticas o puntuales
– Dinámicas
– Del ADN mitocondrial
– Microdelecciones o duplicaciones en tándem
Orientación al diagnóstico de:
• Cromosomopatías:
– Hipocrecimiento
– Retardo del desarrollo / RM
– Dismorfias /
malformaciones
• Mutaciones puntuales:
– Ej.: Acondroplasia
• Enfermedades
mitocondriales:
– Encefalomiopatías
 mutación Gly380Arg en FGFR3 (4p16)
• Consecuencias de las mutaciones
– A nivel molecular
• alteraciones de la expresión génica (ej.
Enfermedad de Friedreich)
• alteraciones proteicas (ej. Anemia Falciforme)
– A nivel de fenotipos intermedios
• alteraciones funcionales (ej. Sd. QT largo
congénito, Test del sudor para FQ)
• alteraciones del metabolismo (ej. EIM)
• alteraciones histológicas (ej. Miocardiopatías
Hipertróficas, Distrofias Musculares)
– A nivel clínico
• Sds. clínicos característicos (ej. Sd. de Down)
Anemia Falciforme
Alelo normal
HbA
Alelo Mutante
HbS
TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS EN
GENÉTICA
• Genética Clínica, Historia Familiar y Genealogía
–
–
–
–
Sindromes genéticos
Modo de herencia
“Sindrome completo” a nivel familiar.
Genética de Poblaciones (ej. FMF, Tay-Sachs, HbS)
• Exámenes
complementarios
habituales
– Hemograma y
extendido de sangre
periférica (Enfs. de
atesoramiento)
– RX (displasias óseas)
– Ecocardiograma y
ECG (Miocardiopatías,
canalopatías)
– Estudios funcionales
(Conducción nerviosa
en neuropatías
primarias)
• Citogenética
– Técnica estándar.
– Técnicas de bandeo
– Bandeo de alta
resolución
• Técnicas bioquímicas y determinaciones
cuantitativas
– EIM (PQ cualitativas, cromatografías semicuantitativas,
dosificación de metabolitos, actividades enzimáticas).
– dosificación de FP sérica materna (Defectos del tubo neural).
– dosificación de Estriol y HCG en sangre materna (Sd. de Down).
– Electroforesis de proteínas (HbS).
• Biología Molecular
– detección directa de mutaciones
• necesidad de conocer secuencia del gen.
• diversas mutaciones en distintas familias o poblaciones.
• no existencia de correlaciones genotipo-fenotipo
– detección de marcadores ligados (diagnóstico indirecto)
• posible error por recombinación
• Conjunción de técnicas
– FISH
Electroforesis de Hb
Distrofias Musculares
• Diagnóstico a nivel:
– histopatológico:
– proteico:
Resistencia Proteína C activada
• Factor V de Leiden
• Bioquímica de la coagulación
• Trombofilia
Diagnóstico molecular directo
Receptor de Andrógenos
Detection of 3 bp deletions (CF DF508 and DI507) on a
Spreadex EL 300 gel. Lanes: 1 - M3 Marker (Elchrom); 2 CF patient heterozygous for the DI507 mutation
(DI507/N); 3 - CF patient with no 3 bp deletion (N/N); 4 CF patient heterozygous for DF508 mutation; 5 - CF
patient homozygous for DF508 (DF508/DF508).
Distrofia Miotónica tipo I
Caracterización molecular
(CTG)n >1000, fenotipo congénito
100< (CTG)n <1000, fenotipo clásico
50< (CTG)n <100, fenotipo leve
Cromosoma 19
5’
Gen DMPK
(CTG)n
3’ UTR
3’
Distrofia Miotónica tipo I
Diagnóstico molecular
Diagnóstico por Southern blot:
Permite
detectar
amplificaciones
N- paciente no afectado
A- paciente afectado
PCR/ Southern blot:
Permite detectar alelos
expansiones cortas
con
grandes
¿Cómo diagnosticar
qué gen está mutado
en una Distrofia
Muscular?
Diagnóstico molecular indirecto
Ligamiento al X
5 Cm entre marcador y locus de la enfermedad
Fluorescent in situ hybridization
FISH se usa actualmente ante la sospecha de
varios síndromes de microdelección, incluyendo:
•
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•
22q deletion syndrome
Williams syndrome
Prader-Willi syndrome
Angelman syndrome
Smith-Magenis syndrome
Miller-Dieker syndrome
Cri-du-chat syndrome
Wolf-Hirschhorn syndrome
Retinoblastoma
Kallmann
VARIOS TIPOS DE SITUACIONES
DIAGNÓSTICAS
•
•
Diagnóstico preimplantacional
Diagnóstico prenatal
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–
•
Ecografía
Técnicas genéticas
Amniocentesis
Biopsia de Vellosidades Coriales
Screening poblacional
– De Recién nacidos
•
•
•
•
Hipotiroidismo congénito (TSH).
PKU.
Galactosemia.
EOJA
– De heterocigotos
• Enfs. AR frecuentes en algunas poblaciones (ej.Tay Sachs en judíos, FQ en
poblaciones europeas).
• Enfs. XR (mujeres posibles portadoras).
• Enfs. AD en etapa presintomática (ej. EH, DM).
Screening de PKU
• Diagnóstico nosológico de enfermedades monogénicas
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Hemocromatosis hereditaria
LDLR – Hipercolesterolemia Familiar
Fibrosis Quística
Déficit de alfa 1 antitripsina
Sd. de X-frágil
Distrofias musculares
Hiperplasia suprarrenal congénita
• Diagnóstico de marcadores de susceptibilidad y pronóstico en
enfermedades multifactoriales
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LDLR
ApoE
MTHFR
Factor V de Leiden
Protrombina
ACE I/D
BRCA 1 y 2
Diagnóstico Genética Somática
Genética Predictiva
Ej.: Enfermedad de Huntington
•
Diagnóstico de paternidad
• Aplicaciones forenses