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Evolución del Programa de Investigación de la Mancha Rayada (Zebra Chip;ZC) de la Papa Charlie Rush Texas AgriLife Research - Amarillo 3a Conferencia de la Papa (Washington – Oregon) Kennewick, WA 25 de enero de 2012 1 Síntomas de la Enfermedad Cuando ZC fue identificada por primera vez, el agente causal de la enfermedad era desconocido, haciendo la identificación e investigación extremadamente difícil. •Los síntomas tempranos aparecen como una ligera clorosis y enrollamiento foliar, además de un acortamiento de los entrenudos. Síntomas de la Enfermedad • El enrollamiento de las hojas se intensifica, y se observa una clorosis y desarrollo de hojas moradas/purpuras, muy similar al amarillamiento de la papa por los psílidos. • Ocurren brotes de yemas auxiliares, hinchazón de nudos, y la formación de tubérculos aéreos- típico de enfermedades causadas por fitoplasmas. Síntomas de la Enfermedad • En la etapa final de la enfermedad, las hojas cloróticas se vuelven necróticas y los tallos colapsan. Las raíces y tallos se pudren antes de morir la planta. Sano ZC Síntomas de la Enfermedad • La intensidad de las rayas medulares necróticas en tubérculos infectados pueden variar pero son característicos para el diagnóstico de ZC. • Aunque los síntomas no son visibles en tubérculos crudos, las papas fritas en hojuelas y a la francesa si pueden manifestar este defecto medular. Creación del Programa de Investigación de ZC (Resumen de Eventos Preliminares) • 2000 – Una nueva enfermedad de la papa, la cual primeramente afectó su calidad, fue identificada en el sur de Texas y llamada Zebra Chip (ZC). • Inicialmente, ZC fue vista como un problema del sur de Texas sin etiología conocida– y con mínima preocupación fuera de las áreas afectadas. •Tres de cuatro consultores, un agrónomo, un entomólogo y un fitopatólogo fueron traídos de la mayores áreas de producción de EE.UU. para tratar de identificar la causa del problema. •Algunos productores aportaron fondos para investigación de campo que evaluaban fungicidas, insecticidas, fumigación de suelo y nutrientes. Resumen de Eventos Preliminares • 2000 – 2004 – Se incrementó la incidencia y distribución de ZC resultando en grandes perdidas para los productores de papas en Texas. • Papas con síntomas similares fueron encontradas en áreas de producción fuera de Texas incluyendo áreas de producción de semilla en Colorado, Nebraska y Wyoming. • Resultados positivos en ensayos con temprana aplicación de insecticidas conllevaron a enfocar en vectores como la chicharrita de alas vítreas y pulgón saltador de la remolacha. • La iniciación de un régimen de aplicación para “cero tolerancia” comprobó que fue inefectivo y económicamente desastroso. Resumen de Eventos Preliminares • 2004 – 2007 - ZC continúa expandiéndose en rango y severidad •Las epidemias de 2005 y 2006 dieron, como resultado, perdidas multimillonarias por lo que ayuda fue solicitada a la legislatura de Texas y organizaciones nacionales de productores. • 2007 – La legislatura de Texas aprobó $2 Millones para establecer la Iniciativa de Investigación de Zebra Chip para el 2008 y 2009 –El enfoque de esta Iniciativa fue en la etiología, epidemiología, y control de enfermedad/manejo de plagas. Resumen de Eventos Preliminares •2008 – Dos descubrimientos claves: Candidatus Liberibacter solanacearum fue identificado como el patógeno que causa ZC y el Psílido de la Papa fue identificado como el vector – técnicas de diagnostico precisas fueron desarrolladas. Bushlan d Known ZC Plant ve Plant NT +ve C • 2009 - Un fondo Federal (SCRI) de $6.9M fue otorgado a un grupo multidisciplinario de varios estados para estudiar todos lo concerniente sobre ZC! Specialty Crop Research Initiative (Iniciativa de Investigación de Cultivos de Hortalizas y Frutales) El manejo de Zebra Chip Para Incrementar Ganancias Y La Sostenibilidad de la Producción de Papa en EEUU • Un equipo de 20 investigadores multidisciplinarios y especialistas en extensión agrícola, y una Junta del Consejo de Partes Interesadas como son los agricultores, procesadores, y representantes de la agroindustria. • Un equipo con miembros de seis Universidades y USDA-ARS • Los científicos son representados por seis estados: California, Idaho, Nebraska, North Dakota, Texas y Washington – otros estados también colaboran. Meta del Proyecto: Reducir perdidas causadas por ZC a niveles económicamente sostenibles al desarrollar un programa de manejo de enfermedades que sea detallado y ambientalmente responsable. Estados que Cooperan con SCRI √ √ √ √ √ √ √ √ √ = Miembros de la Junta o Productores colaboradores Specialty Crop Research Initiative (Iniciativa de Investigación de Cultivos de Hortalizas y Frutales) Siete áreas de Enfoque Prioritario: 1) Detección, Diversidad de Vector/Patógeno y Etiología de la Enfermedad 2) Epidemiología 3) Manejo de Plagas 4) Mejoramiento Genético 5) Economía 6) Evaluación de Riesgo/Pronóstico de Enfermedades 7)Transferencia de Tecnología Cada área de enfoque prioritario es sostenida por una serie de objetivos específicos y tiene a un supervisor como Líder de Investigación. Specialty Crop Research Initiative (Iniciativa de Investigación de Cultivos de Hortalizas y Frutales) •El proyecto ZC SCRI recibe fondos continuos por cinco años • Una contraparte de 1:1 en efectivo o contribución de tiempo-salario era parte del requisito para obtener los fondos. • Los productores y la industria han sido importantes en dar apoyo y proveer dinero en efectivo La Junta del Consejo administra y distribuye anualmente el mini-grant y el dinero proveído por la industria y los productores. Specialty Crop Research Initiative (Iniciativa de Investigación de Cultivos de Hortalizas y Frutales) • La Iniciativa de ZC en Texas y la Iniciativa de ZC del SCRI han estado en comunicación para minimizar la redundancia entre ambas partes. • El programa de Texas fue reducido a $1.6 Millones y renovado para el 2012 – 2013. •Aunque ZC es una amenaza para toda la industria de la Papa en los E.E.U.U., hasta la fecha el sector de las papas en hojuelas (fritas) ha sido el mas afectado y es el mas apoyo y fondos de investigación ha proveído. Esto podría cambiar con la detección de ZC en el Pacifico Noroeste. Como Afectará ZC en el Pacifico Noroeste (PN) a las Metas y Objetivos del SCRI? No las afectará; el ZC SCRI ya era un programa nacional y los investigadores del SCRI se involucraron de inmediato, ayudando en donde fuese posible y respondiendo las preguntas o interrogantes que ahora son de suma importancia para los productores en el PN: • Por qué este año fue distinto? • De donde vinieron los psílidos? • Los tubérculos infectados sirven como inoculo primario? • Las infestaciones tardías de psílidos pueden causar problemas? Efecto de la temperatura en el desarrollo de los psílidos adultos Número promedio de adultos 140 120 100 80 60 40 20 0 10 15 20 25 30 35 Temperatura (C) Desarrollo nulo o mínimo de los psílidos adultos @ 32C (90 F) Por qué fue el 2011 diferente? C. R. Basin (Cuenca Rio Columbia), Oregon Temp. promedio (F) 70 69 Dalhart, Texas 82 80 Junio 2011 78 68 76 67 74 66 72 70 65 68 1994 64 1994 1998 2002 2006 2010 Temp. promedio (F) 2002 2006 2010 2014 1998 2002 2006 2010 2014 2014 84 80 78 76 1998 82 July 2011 80 74 78 72 76 70 68 1994 1998 2002 2006 Año 2010 74 1994 2014 Año Temperatura máxima (F) encima /debajo del umbral C. R. Basin (Cuenca del Rio Columbia), Oregon 5 0 25 Junio 2011 20 15 -5 10 -10 5 -15 0 -20 -5 -25 -10 -30 -15 0 Temperatura máxima (F) encima /debajo del umbral Dalhart, Texas 10 20 30 40 0 10 20 30 40 18 10 Julio 2011 16 5 14 12 0 10 8 -5 6 4 -10 2 0 -15 0 10 20 Día del Mes 30 40 0 10 20 Día del Mes 30 40 De donde provienen los psílidos? Probable fuente para el Pacífico Noroeste Análisis de la Trayectoria de Masas de Aire Monitoreo del movimiento de las masas de aire a través de regiones Averiguar el origen y el recorrido que tomo para llegar a un lugar (seguimiento pasado). Su probable destino y la trayectoria tomada (seguimiento futuro) Tiene un gran rango de aplicacionesmonitoreando y prediciendo dispersiones de contaminantes y materiales nocivos que se mueven en el aire Monitorear el movimiento de los psílidos??? Columbia River Basin (Cuenca del Río Columbia) – Oregon/Washington Seguimiento pasado (Mayo – Julio) Weslaco, Texas Seguimiento futuro (Abril – Julio) ZC en la Semilla • En semilla enferma, los síntomas se observan justo después de que las plantas emergen, mientras que en semilla sana los síntomas aparecen después de la floración • Generalmente es letal. • Las semillas (tubérculos) con ZC, y las plantas que emergen, son importantes en la epidemiología de ZC? ZC en la semilla- Estudios en Invernadero • 480 tubérculos con ZC (confirmados) fueron colectados de un campo y colocados en almacenamiento en frío. • Solo los tubérculos que produjeron brotes fueron plantados y se tomaron datos de brotes emergentes. Utilizando PCR se diagnosticó CLs (Ca. Liberibacter solanacearum). ZC en la Semilla Tubérculo ZC a Sano % Germinacion 18% (86 plantas) % Liberibacter Pos(+) 2% (9 plantas, muy baja concentración) 100 0 a Numero total de tubérculos con ZC en este estudio fueron 480. Todas las plantas provenientes de tubérculos con ZC fueron diagnosticadas para Lso(=CLs). ZC en Semilla- Estudio de Campo Las plantas con ZC en la semilla fueron marcadas, al igual que plantas sanas y plantas con ZC inducidas por el vector (40 c/u) Después de 3 semanas, se contaron las plantas sintomáticas a 2 metros de alrededor de las planta(s) “foco de enfermedad” Proporción de Plantas con Nuevas Infecciones alrededor de 2 Metros de la Planta “Foco de Infección” Tipo de Plantas Plantas Identificadas Originalmente Porcentaje con Nuevas Infecciones dentro 2 m Total de Plantas Infected dentro de 2m ZC via Vector 40 53%* 33* ZC en Semilla 40 10% 5 Sanas 40 18% 7 * Significativamente diferente del control/testigo sano Las infestaciones tardías de psílidos pueden ser un problema? Parcelas de pre-emergencia establecidas, y al emerger de suelo, fueron reducidas a 4 plantas por jaula. Por cada fecha de infestación, psílidos fueron verificados como positivos para Lso, usando PCR Psílidos fueron colectados de colonias “Hot” (positivas) para infestaciones semanales Cada jaula fue infestada con 30 psílidos, comieron por una semana y se aplicó insecticida Cada semana y por 9 semanas, los psílidos fueron colocados en la base de la planta #1 (4 réplicas por cada fecha de infestación) Recolección de Datos de Cosecha Cada tubérculo fue calificado para severidad de la enfermedad con escala de 0-3, y fue verificado por qPCR (tiempo real) para Lso, y almacenado a 42F (5-6 C) 4.5 2.5 Escala 0-3 4 Síntomas Foliares 3 1.5 2.5 2 1 1.5 1 Síntomas en tubérculos 2 3.5 Foliar Tuber 0.5 0.5 0 0 1 2 3 4 Infestación 5 34 Días Antes de la Cosecha 5 6 7 8 Infestación 6 27 Días Antes de la Cosecha Infestación 7 20 Días Antes de la Cosecha 1.2 1 Proporción 0.8 Visually positive 0.6 Visually negative 0.4 Negatives that fried positive (Tubérculos visualmente negativos que fueron positivos al freír) 0.2 0 1 2 3 4 5 6 7 Periodo de Infestación 8 9 Variabilidad en tubérculos infectados Los síntomas son más severos del lado del estolón pero la concentración de Lso es más baja 1.6 1.4 Calificación visual 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 Lado del TopEstolón YemaBottom terminal Variabilidad en tubérculos infectados- Propiedades Bioquímicas Actividades de Proteinas de Defensa 0.090 120 Fenólicos totales 100 0.060 0.050 0.040 0.030 0.020 0.010 micromoles / g FW 100 0.070 80 60 40 80 70 60 50 40 30 20 20 0.000 Aminoácidos 90 0.080 microgramos / g FW Actividad, absorbancia 450 nm / 5 min 0.100 10 Peroxidase Polyphenol oxidase Top Chitinase 0 Bottom 1.6 1.4 Calificacion visual 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 Top “Top”= arriba “Bottom”= abajo 0 Top Bottom Bottom Top Bottom Cambios en niveles de infección y severidad en síntomas de tubérculos infectados por ZC provenientes de tubérculos infectados a la hora de cosecha (3 meses de almacenamiento) July 21st 120 Calificacion visual (severidad en los sintomas) Cuantificacion Relativa de Lso 140 Oct 26th 100 80 60 40 20 45 1 40 0.9 35 0.8 0.7 30 0.6 25 0.5 20 0.4 15 0.3 10 0.2 5 0.1 0 0 July 21st Oct 26th Calificacion visual de sintomas Cuantificacion Relativa de Lso 0 RQs Symptom 2 1.5 1 0.5 0 -0.5 July 21st (all 0s) Oct 26th Conclusiones y Comentarios • Los científicos del ZC SCRI tienen experiencia en la dinámica de ZC y su vector y están ansiosos de ayudar a la industria de la papa en el Pacifico Noroeste. • En el 2011, las condiciones en el Pacifico Noroeste fueron altamente favorables para el desarrollo de ZC pero también fueron anormales para la región. • Errar por el lado de la precaución! Monitorear y eliminar plantas voluntarias en campos con ZC en el 2011, diagnosticar si las plantas voluntarias tienen Lso, establecer un programa de monitoreo temprano de psílidos en la región, diagnosticar si los psílidos tienen Lso y estar preparados para iniciar un programa intensivo de aplicación de insecticidas. 37 Conclusiones y Comentarios • Utilice un insecticida antes de plantar para el control temprano y prepárese para una aplicación tardía para el control de los psílidos hasta 10 días antes de la cosecha. • El impacto de una infección tardía en la temporada de cultivo (e.g. < 2 semanas antes de la cosecha) en la calidad de semilla y papas para procesar no esta claro; y en especial, lo que ocurre durante el almacenamiento. • Los productores en el Pacifico Noroeste están en una mejor posición para enfrentarse a ZC que los productores de Texas, los cuales enfrentaron primero este problema. Los que ignoran el potencial de peligro de ZC ponen en riesgo a ellos mismos y sus vecinos. Pero, con las precauciones adecuadas, la buena calidad de producción de papa se puede mantener aún así con la presencia de la enfermedad. 38 Gracias! Preguntas? Esta charla fue traducida del inglés al castellano por Ronald French y Luz Serrato-Diaz del Servicio AgriLife de Extension de Texas (Texas AgriLife Extension Service), Amarillo, Texas. Síntomas de Zebra Chip observados en el 2011 en el Pacifico Noroeste