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Costa Rica, 27 de abril – 2 de mayo 2007 Vigilancia Vigilancia de de laboratorio laboratorio de de agentes agentes causantes causantes de de ETAs ETAs Hilda Ma. Bolaños Acuña Centro Nacional de Referencia en Bacteriología INCIENSA – Costa Rica Vigilancia basada en el laboratorio Es aquella vigilancia que se realiza a través de la recopilación, análisis, interpretación sistemática, oportuna y de calidad de la información generada por el laboratorio, con el fin de que sea de utilidad para la toma de decisiones. Objetivos de la vigilancia basada en el laboratorio • Monitorear desde el laboratorio el comportamiento y la tendencia de los agentes causantes de las enfermedades bajo vigilancia Objetivos de la vigilancia basada en el laboratorio • Detectar cambios en el agente causal Resistencia a los antimicrobianos Objetivos de la vigilancia basada en el laboratorio • Proveer a las autoridades de salud de información oportuna, de utilidad para la toma de decisiones Programas de vacunación Normas de tratamiento Intervenciones comunitarias (cloración del agua, cierre de establecimientos, fumigación, rociamiento, tratamiento y profilaxis) Promoción de la salud Impacto de intervenciones Realización de investigaciones Vigilancia basada en el laboratorio Util en la vigilancia de las ETA • Diferentes patógenos presentan signos y síntomas similares • Laboratorio contribuye a: Diferenciar la etiología de la enfermedad (especificidad del diagnóstico y la notificación) • Manejo del paciente • Implementació Implementación de medidas de prevenció prevención y control especí específicas A diferenciar y relacionar microorganismos (subtipificació (subtipificación) A identificar los patógenos prioritarios y conocer sus tendencias A detectar vehículos de infección y formas de transmisión • Mejor prevenció prevención y control Alertar al sistema de vigilancia Vigilancia basada en el laboratorio La vigilancia de laboratorio es un componente imprescindible de los programas de prevención y control de enfermedades Al igual que otros sistemas de vigilancia, está constituida por redes de laboratorios que mantienen este proceso Funciona en niveles: local regional nacional internacional RSI-2005 http://www.who.int/csr/ihr/WHA58http://www.who.int/csr/ihr/WHA58-sp.pdf Vigilancia ógenos Vigilancia de de laboratorio laboratorio de de enteropat enteropatógenos Red Red Nacional Nacional de de Laboratorios, Laboratorios, Costa Costa Rica Rica -- 2008 2008 Públicos ..............68 Nicaragua CCSS (humanos) ...........61 AyA (aguas) ..................1 MAG (alimentos) ............1 MAG (animales) …………...1 …………...1 ITCR (alimentos) …………..1 ………..1 UNA (veterinaria) .…….....1 …….....1 UCR (CITA, CINA) .…….....2 …….....2 Privados …...........8 TOTAL .................76 P a n a m á Redes internacionales de vigilancia de ETAs • WHO Global Salm Surv • Red latinoamericana de vigilancia de Salmonella, Salmonella, Shigella y Vibrio cholerae y su resistencia a los antimicrobianos • Red latinoamericana Pulsenet • Red de laboratorios de aná análisis de alimentos (RILAA) RILAA) Reglamento Sanitario Internacional - 2005 Aspectos fundamentales de la vigilancia de laboratorio • Relaciones entre los participantes • Claridad en los roles El Centro de Referencia no compite con los laboratorios de la red, ambos tienen funciones que se complementan • Requerimientos de información del laboratorio Para guiar la búsqueda de los agentes Para interpretar los resultados • Retroalimentación a los diferentes niveles Métodos disponibles en el laboratorio de apoyo a la vigilancia Métodos de tipificación Basados en la determinación de factores individuales (marcador) que subdividen grupos de microorganismos cercanos, con el fin de establecer sus posibles relaciones epidemiológicas Objetivos de los sistemas de tipificación • • Reconocer / valorar la relación entre aislamientos que tienen una vinculación epidemiológica (origen común) Discriminar entre aislamientos no relacionados Marcadores fenotípicos Estudian el conjunto de propiedades que manifiestan los microorganismos Caracterización bioquímica Serotipificación Perfil antimicrobiano Fagotipificación Biotipia Utilización de reacciones bioquímicas específicas que van a diferenciar a los microorganismos Serotipificación Salmonella sp. • 59 antígenos O lipopolisacaridos Antígenos flagelares H • 97 antígenos H proteinas Antígenos somáticos O Más de 2500 serotipos Fagotipificación Tipificación por los patrones de lisis obtenidos al aplicar al microorganismo un juego de fagos conocido. Antibiotipia Utilizaci ón del perfil de resistencia a los Utilización antimicrobianos para diferenciar subgrupos Patrón de susceptibilidad de los microorganismos frente a una batería estándar de antimicrobianos, de uso en clínica y de vigilancia Marcadores genotípicos Estudian la composición genética de los microorganismos Plasmidotipia (DNA plasmídico): inestable, no universal Patrones de restricción del DNA cromosómico (REA/RFLP) Electroforesis de campo pulsante (PFGE) Caracterización por PCR (RAPD/APRAPD/AP-PCR/repPCR/repPCR/AFLP) PFGE: detección de casos asociados a brotes que han afectado a varios estados PFGE: Asociación de casos esporádicos (Vigilancia nacional) La sostenibilidad de los recursos de laboratorio depende del uso inteligente que se de a los mismos Enfermedades transmitidas por alimentos - ETAs Infecciones Shigella Salmonella Campylobacter Brucella Intoxicaciones Staphylococcus aureus Clostridium botulinum Toxinas producidas por hongos Listeria monocitogenes Rotavirus Norovirus Hepatitis A Cryptosporidium Cyclospora Toxico-infecciones Clostridium perfringens E. coli enterotoxigénica Vibrio cholerae Factores que han contribuido a la emergencia de las ETAs Demográficos Cambios en industria y tecnología Envejecimiento de la població población Migraciones Producció Producción centralizada de alimentos Pobreza Crianza de animales en granjas gigantes, hacinamiento Comportamiento humano Aumento del consumo de frutas y verduras “Comer afuera” afuera”, “comer barato” barato” Comidas rá rápidas Comidas de la calle Cambios en comercio Globalizació Globalización Cambios y adaptaciones microbiológicas Resistencia a los antimicrobianos Impacto ómico de Impacto econ económico de las las ETAs ETAs Servicios de salud Turismo Ausentismo laboral y escolar Productividad Exportaciones Infecciones por Shigella: shigelosis Principal causa de diarrea sanguinolenta en el mundo Características clínicas: • Diarrea aguda con sangre, acompañada o no de moco, fiebre, dolor abdominal, malestar general Factores de riesgo • Inmunocomprometidos • Ancianos • Niños pequeños • Turistas que viajan a áreas endémicas • Hacinamiento y falta de saneamiento Shigelosis Distribución: • Endémica en los países sub-desarrollados • Es causa de aprox. 165 millones de casos anuales de diarrea, 99% en países en vías de desarrollo • La mayoría de casos (70%) y defunciones (60%) ocurren en niños menores de 5 años Reservorio: hombre y algunos primates Transmisión: • Persona a persona (fecal(fecal-oral) • Alimentos o aguas contaminados • Moscas Dosis infecciosa: 10 a 100 organismos Salmonella Complejidad taxonómica 2 especies 6 subespecies Más de 2400 serovariedades (enterica, bongori) (enterica, salamae, arizonae, diarizonae, houtenae, indica) Ampliamente distribuidas en la naturaleza Animales de sangre fría y caliente (insectos, aves, reptiles, mamíferos) Especificas de humanos: S. Typhi - S. Paratyphi A - S. Paratyphi C Sobrevivencia en el ambiente Brote de gastroenteritis por S. Typhimurium USA, noviembre 2008 – enero 2009 529 casos diagnosticados (al 28/01/2009), más de la mitad eran niños de 43 estados de USA y Canadá (estimaciones > 20.000 casos) 116 hospitalizaciones (23%) 8 defunciones asociadas (TL: 1.3%) Vehículo de infección (epi(epi-micro): mantequilla, pasta de maní y otros productos procesados (galletas, cereales, confites, helados, alimento para mascota) PFGE de la cepa epidémica: • XbaI: XbaI: 2 perfiles • BlnI: BlnI: un único perfil Mecanismo de transmisión no es claro Más de 430 alimentos conteniendo mantequilla de maní y pasta de maní fueron retirados del mercado Maki DG. 2009. N Engl J Med 360:949-953 MMWR 6, 2009: 58 (4):85-90 Serovariedades de Salmonella en animales S. S. S. S. S. Gallinarum Pullorum Enteritidis Paratyphi B Heildelberg S. Typhimurium S. Heidelberg S. Albert S. Typhimurium S. Infantis S. Panama S. Mbandaka Salmonella Restricciones comerciales Exportación Exportación de de productos productos de de origen origen vegetal, vegetal, 1996 1996 RECHAZO RECHAZO POR POR PRESENCIA PRESENCIA DE DE Salmonella Salmonella spp. spp. Exportación Exportación de de animales animales RECHAZO RECHAZO POR POR PRESENCIA PRESENCIA DE DE Salmonella Salmonella spp. spp. Escherichia coli diarrogénicas E. coli enterotoxigénica E. coli enteropatógena (EPEC) E. coli enterohemorrágica (EHEC - STEC) E. coli enteroagregativa E. coli enteroinvasiva (EIEC) E. coli difusamente adherente (ETEC) (EAEC) (DAEC) Escherichia coli enterotoxigénica – ETEC (diarrea del viajero) Diarrea acuosa moderada, no sanguinolenta, con náuseas, dolor abdominal y dolor de cabeza, pero con poco vómito o fiebre Producción de una toxina termolábil (LT) y una toxina termoestable (ST) En la literatura hay reportes de brotes transmitidos por agua y otros asociados al consumo de vegetales irrigados con agua no potable y son comunes los informes de brotes por ETEC en turistas a bordo de cruceros y en hoteles Huerta M et al. al. 2000. Infection 28:26728:267-271 Daniels NA et al. al. 2000. J. Infect. Dis. 181:1491181:1491-1495 Brote ETA por Escherichia coli O157:H7 relacionado al consumo de espinacas, USA 2006 199 casos diagnosticados (al 06/10/2006) procedentes de 26 estados de USA 102 hospitalizaciones (51%) 16% de los pacientes desarrollaron SUH y tres fallecieron (2 adultos mayores y un menor de edad) Vehículo de infección: 95% de los pacientes entrevistados consumieron espinaca cruda durantes los 10 días previos al inicio de síntomas. Perfiles de PFGE de la cepa de E. coli O157:H7 epidémica fueron similares a los de los aislamientos recuperados de 13 paquetes de espinacas suministradas por los casos Tóxico-infección por Clostridium perfringens toxina A (+) ETA asociada al consumo de productos cárnicos Período de incubación: 7 a 15 horas Características clínicas: • Aparición repentina de cólicos, diarrea y náusea (generalmente sin vómitos ni fiebre) • Cuadro leve, de corta duración horas) (menos de 24 Tóxico-infección por Clostridium perfringens toxina A (+) Entre 1999 – 2006, INCIENSA ha documentado 19 brotes por C. perfringens: 972 personas afectadas (cárceles, serv. catering) Brotes se asocian a deficiencias en el almacenamiento, manipulación y mantenimiento de los alimentos una vez cocinados (carnes y derivados) En Costa Rica se ha demostrado la contaminación de carnes procesadas, molidas y embutidos en expendios y de carnes cocinadas en restaurantes Gutiérrez et al. 1999. Arch Latinoam Nutr 49:275-278 Morera et al. 1999. Arch Latinoam Nutr 49:279-282 Rodríguez et al. 2002. Arch Latinoam Nutr 52:155-159 Vibrios de importancia clínica Especie Presentación clínica Gastrointestinal Infección de heridas, oídos Septicemia V. cholerae O1 ++ (+) V. cholerae no O1 ++ + V. mimicus ++ + V. parahaemolyticus ++ + (+) + ++ ++ + (incluyendo O:139) V. vulnificus V. alginolyticus ++ ++: Presentació Presentación má más comú común; +: otra presentació presentación clí clínica; (+) presentació presentación poco usual Cólera Agentes etiológicos: V. cholerae O1 V. cholerae O139 Factores de virulencia: Toxina colérica + otros Dosis infectante: Alimentos contaminados 102 a 104 microorganismos Agua contaminada 103 a 106 microorganismos Período de incubación: 48 a 72 horas Transmisión: fecal-oral alimentos o aguas contaminadas, con heces o vómitos de enfermos Medio acuático se considera reservorio (formas viables no cultivables) Espectro clínico del cólera 75% infección asintomática* 2% enfermedad grave 5% enfermedad moderada 18% enfermedad leve * Portadores: personas que que no presentan síntomas pero pueden transmitir la enfermedad. Importantes en diseminación de la enfermedad. Casos de cólera en América, 1990-2006 450000 400000 300000 250000 200000 150000 100000 50000 0 19 90 19 91 19 92 19 93 19 94 19 95 19 96 19 97 19 98 19 99 20 00 20 01 20 02 20 03 20 04 20 05 20 06 N° casos 350000 Fuente: OPS/OMS Año Casos y defunciones por cólera Zimbabwe, África, 20 nov 2008 – 12 feb 2009 Epidemia de cólera en Zimbabwe, África 26-08-2008 a 09-04-2009 http://www.reliefweb.int/rw/rwb.nsf/db900sid/KERNhttp://www.reliefweb.int/rw/rwb.nsf/db900sid/KERN-7R42UK/$File/full_report.pdf Vibrio mimicus Causa diarrea “tipo cólera” Produce toxina colérica (CT) y otras toxinas En Costa Rica asociada al consumo de huevos de tortuga Aislado de: ríos, aguas salobres, ostras Campos E et al. al. Appl Environ Microbiol 1996; 62:114162:1141-1144 Acuñ Acuña MT et al. Appl Environ Microbiol 1999; 65:33665:336-338 Vibrio parahaemolyticus Gastroenteritis asociada al consumo de mariscos crudos o mal cocinados, contaminación cruzada Síntomas: diarrea autolimitada, dolor abdominal, náusea, vómito, fiebre, escalofríos, 1 a 3 días de duración Período de incubación: usualmente 24 horas después del consumo de mariscos contaminados Dosis infecciosa: > 106 organismos No se transmite de persona a persona ETA más importante en Taiwán (35 – 50% de brotes ETA), Japón y otros países, principalmente en los meses cálidos Desde 1996 la cepa O3:K6 se ha asociado a epidemias de gran escala (India, Japón, Korea, Taiwan) Brote ETA por V. parahaemolyticus asociado al consumo de mariscos, USA, 2006 177 casos de infección por V. parahaemolyticus en New York, Oregon y Washington (122 asociados a 17 clusters) 3 hospitalizaciones (1.7%), no hubo muertes asociadas El número de casos confirmados por laboratorio (72) supera el promedio reportado entre mayo y junio 2000-2004 para USA 18 / 23 (78%) aislamientos corresponden al serogrupo O4:K12 Vehículo de infección: ostras y almejas de Washington (USA) y Columbia Británica (Canadá (Canadá); desde donde se distribuyen a diferentes estados de USA MMWR 2006 / 55(31);854-856 Campylobacter • Diarrea invasiva en el hombre (C. jejuni, C. coli, C. lari) • Especies patogénicas clásicas, oportunistas y emergentes • Aves (aves de corral) y mamíferos (ganado) son reservorios importantes • Brotes asociados al consumo de aves, leche no pasteurizada, agua no clorada • Portadores asintomáticos • Dosis infecciosa baja (400 – 500 bacterias) • Organismo fastidioso Brote ETA por C. jejuni asociado al consumo de queso fresco no pasteurizado en una feria, USA, 2007 68 casos de infección por C. jejuni comunidad de Kansas de 150 hab. 2 hospitalizaciones (3%), no hubo muertes asociadas Vehículo de infección: 65% de las personas que consumieron queso fresco enfermaron (RR: 13.9) Los aislamientos de 3 pacientes con perfiles de PFGE similares El agente no se encontró en las sobras de queso MMWR 57(51&52);137757(51&52);1377-1379 Intoxicación por Staphylococcus aureus Agente: Staphylococcus aureus (enterotoxina termoestable) Período de incubación: 30 minutos (2 – 4 horas) Características clínicas: • Aparición repentina de salivación, náuseas, vómito, dolor abdominal, cefalea • Cuadro leve, de corta duración (< 24 horas) Intoxicación por Staphylococcus aureus En Costa Rica los brotes se han asociado al consumo de queso fresco de fabricación artesanal En Costa Rica los quesos frescos de fabricación artesanal presentan niveles de Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes y coliformes fecales, que sobrepasan los límites aceptables* * Acuñ Acuña MT y col. 2005. Aná Análisis microbioló microbiológico de quesos frescos a nivel de expendios y productores de la Regió Región Central Norte, Costa Rica. Rica. Congreso ACOSAP, Costa Rica, noviembre 2006 Listeriosis Infección poco frecuente pero severa causada por Listeria monocytogenes Es una ETA que ocurre principalmente en personas mayores, mujeres embarazadas y pacientes inmunocomprometidos. Durante el 2005 la mayoría de los casos notificados en USA eran mayores de 65 años La disponibilidad de métodos de tipificación molecular de los aislamientos de L. monocytogenes han incrementado la capacidad de las autoridades de salud para detectar e investigar estos brotes. Los brotes más recientes se han asociado al consumo de carnes listas para consumo y queso no pasteurizado. Según FoodNet, durante el 2006 la incidencia de listeriosis fue de 0.3 casos / 100.000 habitantes. MMWR 10, 2008 / 57(40);109757(40);1097-1100 Instituto Costarricense de Investigació Investigación y Enseñ Enseñanza en Nutrició Nutrición y Salud - INCIENSA ........Muchas gracias !! La Carpintera, Tres Rí Ríos, Costa Rica