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XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico
“EXPRESIÓN DE MARCADORES DE TRONCALIDAD EN LINEAS CÉLULARES
CANCEROSAS DE CERVIX”
Karen Griselda de la Cruz López, Unidad Académica de Ciencias Químico Biológicas, Universidad
Autónoma de Guerrero, Correo: [email protected], Asesor Dr. Alejandro Manuel García
Carrancá, Unidad de Investigación Biomédica en Cáncer, Correo: [email protected]
Planteamiento del problema: El cáncer cérvico uterino (CaCU) es un problema de
salud público siendo el segundo cáncer más común de mujeres en el mundo (CNEGSR,
2012). Se sabe que los tumores presentan una gran heterogeneidad celular, sin
embargo se ha prestado especial atención a una subpoblación de células conocidas
como células troncales cancerosas (CSC) porque poseen la capacidad de
autorenovarse, generar nuevos tumores, son altamente metastásicas y resistentes a los
agentes quimioterapéuticos (López, et al., 2012). Las CSC expresan marcadores
específicos que son característicos de troncalidad, el grupo de trabajo del Laboratorio
de Virus y Cáncer ha identificado y caracterizado marcadores de troncalidad de las
líneas celulares provenientes de cáncer de cérvix. Algunos de ellos son; la enzima
aldehído deshidrogenasa (ALDH), Anexina II y CD49f. Sin embargo es necesario
identificar la cinética de expresión de estos marcadores después de la transición epitelio
mesenquima. Es por ello que mi estancia de investigación se enfocó en identificar la
cinética en el cuál las células troncales de cáncer de cérvix expresan mayormente los
marcadores antes mencionados mediante la técnica de citometría de flujo.
Metodología: Como modelo experimental se utilizó la línea celular HeLa la cual deriva
de cáncer cervicouterino con presencia del virus del papiloma humano 18 (VPH 18), se
sembraron las células en medio Mammocult libre de suero en una caja p100 de ultrabaja
adherencia para la formación de esferas celulares. El ensayo se realizó a una
confluencia del 70%, primero se retiró el medio para dar dos lavados con PBS 1X, las
células se tripsinizaron y se colocaron
en tubos eppendorf. Las células se
resuspendieron en Flow buffer para obtener una dilución (1:50) de los anticuerpos (anti
ALDH, antiCD49f-PE, anti-Anexina), se incubaron durante 30 minutos en frio, se
centrifugaron a 2000 rpm por 5 minutos y se eliminó el sobrenandante, posteriormente
se resuspendieron en 300 μL de paraformaldehído al 4% y se transfirieron a tubos de
citometría (aislados de la luz) para ser leídos en el clitómetro. Se realizó la prueba por 0,
24, 48 y 72 hrs. midiéndose por citometría de flujo.
Conclusiones: De acuerdo a los experimentos realizados se concluye que ALDH se
expresa mayormente con un 42.24% a las 72 hrs., Anexina II se expresa con un 47% a
las 72 hrs. y CDC49f presento una expresión de 14% a las 24hrs. Es importante
conocer cuál es la cinética de expresión de los marcadores de troncalidad dado que es
una herramienta útil para la identificación de CSC, con la finalidad de evaluar las
posibles vías de señalización que se encuentre desreguladas y que promuevan
supervivencia celular y autorrenovación.
© Programa Interinstitucional para el Fortalecimiento de la Investigación y el Posgrado del Pacífico
Agosto 2014
XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico
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El resumen debe contener:
I. ENCABEZADO
a) Título del trabajo *
b) Nombre del becario e institución en la que estudia**
c) Correo electrónico del becario**
d) Nombre del asesor e institución de adscripción**
e) Correo electrónico del investigador**
II. CONTENIDO
A) Planteamiento del problema***
B) Metodología ***
C) Conclusiones generales***
* = TAMAÑO DE LETRA 12 (ARIAL) MAYÚSCULAS EN NEGRITA, TEXTO AL
CENTRO DE LA PÁGINA
** = TAMAÑO DE LETRA 10 (ARIAL) MINÚSCULAS EN NEGRITAS Y CURSIVA,
TEXTO JUSTIFICADO
*** = TAMAÑO DE LETRA 12 (ARIAL) MINÚSCULA, TEXTO JUSTIFICADO.
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