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Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Programa Analítico Nombre de la Asignatura: Biotecnología avanzada Plan de Estudios: 2008 Carrera: Lic. en Ciencias Biológicas Profesor a cargo: Dr. Sergio C. Ghio – Lic. María Binaghi I-Objetivos: Generales Que el alumno consolide los conocimientos teóricos sobre biotecnología moderna adquiridos a través de la ejercitación práctica. Que el alumno se familiarice con el trabajo cotidiano de laboratorio (autonomía). Que el alumno desarrolle estrategias para resolver situaciones y ejercite el pensamiento crítico en la evaluación y análisis de resultados experimentales. Específicos Que el alumno adquiera destreza en el manejo de los elementos y técnicas de laboratorio a través de las prácticas propuestas. Que a través de dichas prácticas, el alumno consolide los conocimientos adquiridos en las clases teóricas. Que el alumno adquiera destreza en el diseño de ensayos experimentales. Que el alumno sea capaz de resolver y comprender los problemas y casos analizados. Que el alumno sea capaz analizar e interpretar los resultados obtenidos en los experimentos (trabajos prácticos). Que el alumno sea capaz de comunicar y exponer sus puntos de vista utilizando el lenguaje adecuado al criterio científico. Que el alumno desarrolle capacidad crítica para la evaluación e interpretación de la información experimental. II-Contenidos: Contenidos Mínimos: Estructura, biosíntesis y regulación del DNA, RNA y de las proteínas. Cultivos celulares. Cinética de crecimiento y muerte celular, de utilización de sustrato y de formación de productos. Fenómenos de transporte en bioprocesos Procesos de Ingeniería Genérica. Fermentación. Biorreactores, instrumentación y control. Escalamiento. Biocatalizadores. Técnicas de separación y purificación a escala industrial. Métodos de análisis de los productos: identidad y pureza. Problemas éticos, sociales, políticos y legales de la biotecnología. Desarrollo en la Argentina. Universidad de Belgrano – Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Página 1/7 Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Programa Analítico Contenidos teóricos: Unidad I: Biotecnología tradicional con microorganismos: Concepto de biotecnología. Los microorganismos utilizados en la industria de los alimentos: producción de yogures, prebióticos, quesos, productos conservados de origen vegetal, panes, vinos, cervezas, vinagres, conservación del forraje. Productos del metabolismo microbiano utilizados para la producción de compuestos químicos y/o combustibles: obtención de acetonas, butanol, etanol, isopropanol, ácido butírico, ácido acético, ácidos orgánicos (ácido cítrico, ácido itacónico, ácido fumárico, ácido málico, ácido oxálico), producción de polisacáridos y de L-aminoácidos. Enzimas microbianas: amilasas, glucoamilasa, pectinasas, celulasas, invertasas, proteasas. Procesos biotecnológicos en la industria farmacéutica y agropecuaria: antibióticos y vitaminas. Microorganismos para la recuperación de metales y para biorremediación: Lixiviación bacteriana biorremediación remediación microbiana. Biotecnología tradicional con vegetales: Cultivo de células y tejidos vegetales: micropropagación vegetal y propagación clonal. Variación somaclonal. Producción de metabolitos secundarios en células vegetales: ácido rosmarínico, shikonina, morfina, vincristina, antocianinas. Bibliografía: AGNOW G. y DAVID W. (1991) Biotecnología: Introducción con experimentos modelo. Editorial Acribia, Zaragoza. WISAEMAN A. (1986) Principios de biotecnología. Editorial Acribia, Zaragoza. ALTMAN, A. y LOBERANT, B. (1998) Micropropagation: clonal plant propagation in vitro. In: Agricultural Biotechnology. Altman, A. (ed.). pp. 19-42. Marcel Dekker. Unidad II: Biotecnología moderna: aplicaciones: Mejoramiento genético por tradicional con fines industriales. Mejoramiento genético por ingeniería genética. Proteínas y péptidos terapéuticos recombinantes producidas por biotecnología moderna. Enzimas recombinantes: enzimas recombinantes destinadas a la industria alimenticia (quimosina, α-amilasa, pectinasas, glucosa oxidasa, catalasa, lipasa, glucosa isomerasa, βglucanasa), enzimas recombinantes que se utilizan en la industria de detergentes (lipasa, cutinasa, proteasas). Vacunas: recombinantes, de subunidades, nuevas vacunas atenuadas, vacunas vectores o de organismos recombinantes vivos, vacunas de ADN desnudo. Otras aplicaciones de la ingeniería genética: síntesis de antibióticos, adhesivos biológicos, síntesis de aminoácidos, síntesis del índigo, producción de plásticos biodegradables, xantano, melaninas, caucho. Bibliografía: LEVITUS, G et al. (2010) Biotecnología y mejoramiento vegetal II Ediciones INTA y Argenbio. UNIDAD III: Agrobiotecnología: plantas genéticamente modificadas Mejoramiento de cultivos: clásico, por mutagénesis al azar y por ingeniería genética. Métodos de transformación de plantas: Sistemas de transformación con vectores biológicos y sistemas de transferencia directa de ADN. Bibliografía: LEVITUS, G et al. (2010) Biotecnología y mejoramiento vegetal II Ediciones INTA y Argenbio. Universidad de Belgrano – Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Página 2/7 Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Programa Analítico UNIDAD IV: Resistencias introducidas en plantas Aplicaciones de la biotecnología al control de malezas. Herbicidas. Estrategias para la obtención de plantas transgénicas con resistencia a herbicidas. Prevención del surgimiento de resistencia en malezas. Resistencia a insectos y nemátodos. Proteínas de origen microbiano, vegetal y animal. Bacillus thuringiensis (Bt). Ventajas de los bioinsecticidas sobre los insecticidas convencionales. Problemas a considerar. -endotoxinas. Modo de acción de las proteínas Cry. Resistencia de los insectos a los bioinsecticidas. Otros genes de resistencia a insectos de origen vegetal transferidos a cultivos. Resistencia a nemátodos: Genes de inhibidores de proteasas, genes de colagenasas o quitinasas, genes de toxinas Cry, genes de anticuerpos específicos. Resistencia a virus. Estrategias de protección antiviral en plantas por técnicas de transformación genética. Resistencia derivada del patógeno mediada por la expresión de proteínas virales. Resistencia derivada del patógeno mediada por ARN viral Protección mediada por silenciamiento génico: Silenciamiento génico transcripcional (TGS) y silenciamiento génico postranscripcional (PTGS). Resistencia a virus por expresión de genes R de resistencia natural. Resistencia a bacterias. Genes de avirulencia y genes de resistencia. Resistencia Sistémica Adquirida (SAR). Estrategias para desarrollar resistencia a bacterias mediante ingeniería genética. Producción de compuestos antibacterianos no vegetales. Inhibición de la patogenicidad. Incremento de los sistemas de defensa naturales. Péptidos antimicrobianos. Resistencia a hongos. Transformación con genes de resistencia. Modulación de la respuesta oxidativa. Inducción de respuestas defensivas. Expresión de proteínas de defensa de origen vegetal. Resistencia a estreses abióticos. Problemas y pérdidas producidas por estreses abióticos. Respuestas a estreses abióticos. Solutos compatibles. Ejemplos de resistencia frente a diferentes estreses abióticos: Solutos compatibles, bombas de Na+/H+, citrato sintetasa. Bibliografía: LEVITUS, G et al. (2010) Biotecnología y mejoramiento vegetal II Ediciones INTA y Argenbio. UNIDAD V: Ingeniería metabólica Metabolitos primarios. Modificaciones en las rutas de síntesis de hidratos de carbono. Cambios de composición y reorientación de las rutas biosintéticas. Ciclodextrinas, fructanos, alcoholes azúcares. Modificaciones en las rutas de síntesis de ácidos grasos. Rutas biosintéticas de ácidos grasos. Modificación del metabolismo lipídico. Modificaciones en las rutas de síntesis de aminoácidos. Modificación de la biosíntesis de aminoácidos esenciales para eliminar la retroalimentación por acumulación de producto. Modificaciones en las rutas de síntesis de hormonas. Metabolitos secundarios. Metabolitos secundarios de importancia económica ingeniería metabólica. Ejemplos de metabolitos secundarios: Terpenos, flavonoides, alcaloides. Las plantas como biorreactores. Expresión de antígenos para la producción de vacunas. Producción de anticuerpos. Producción de proteínas de interés farmacológico y medicinal. Otras aplicaciones: producción de enzimas de interés industrial, suplementos alimenticios y biopolímeros. Fitorremediación: Concepto. Ventajas y limitaciones. Tipos de fitorremediación: Fitoextracción. Rizofiltración. Fitoestimulación. Fitoestabilización. Fitotransformación: fitodegradación y fitovolatilización. Bibliografía: LEVITUS, G et al. (2010) Biotecnología y mejoramiento vegetal II Ediciones INTA y Argenbio. UNIDAD VI: Biotecnología en reproducción animal. Clonación: Concepto. Aplicaciones de la clonación. Clonación en ovinos, en bovinos, de mascotas, en porcinos, de primates. Clonación terapéutica. Universidad de Belgrano – Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Página 3/7 Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Programa Analítico Transgénesis animal: Animales transgénicos con ganancia de función. Animales knockout con pérdida de función. Clonación y transgénesis. Silenciamiento Génico. Usos y aplicaciones de los animales transgénicos. Producción de Alimentos. Molecular Pharming. Xenotransplantes. Modelos Experimentales. Fines ornamentales y otras aplicaciones. Vacunas: Vacunas de nueva generación para enfermedades de interés pecuario. Tipos de vacunas. Desarrollo de nuevas vacunas. Bibliografía: LEVITUS, G et al. (2010) Biotecnología y mejoramiento vegetal II Ediciones INTA y Argenbio. UNIDAD VII: Alimentos derivados de organismos genéticamente modificadas. La biotecnología moderna en la cadena alimentaria. Alimentos derivados de OGM. Los cultivos transgénicos en el mercado. Los cultivos transgénicos en el mundo. Cultivos aprobados y adopción en Argentina. Seguridad alimentaria e ingeniería genética. Orígenes de los peligros alimentarios. Seguridad microbiológica de los alimentos. Valor nutritivo. Toxinas inherentes. Sustancias antinutritivas. Alérgenos. Bioseguridad alimentaria de los transgénicos. Evaluando la inocuidad alimentaria de los alimentos derivados de OGM. Análisis de riesgos. Bioseguridad en agrobiotecnología. El enfoque comparativo en la evaluación de riesgos. Equivalencia sustancial. Concepto. Compuestos tóxicos. Balance nutritivo. Alérgenos. Peligros de la ingestión de ADN. Seguridad de los Microorganismos genéticamente modificados en la producción alimentaria. Transgénicos de segunda generación: alimentos más saludables, mejora de las sustancias promotoras de la salud, vitaminas y micronutrientes, composición alterada de ácidos grasos y almidón. Evaluación del impacto ambiental. Marcos regulatorios en el mundo y en Argentina: El criterio de Bioseguridad y el enfoque precautorio. Nuevos sistemas marcadores. Nuevas tecnología aplicadas a la Bioseguridad. Bibliografía: LEVITUS, G et al. (2010) Biotecnología y mejoramiento vegetal II Ediciones INTA y Argenbio. Contenidos Prácticos: Los siguientes contenidos se desarrollarán en el formato de trabajo práctico o seminarios Biotecnología tradicional. Aislamiento de amilasas fúngicas. Detección y evaluación de actividades enzimáticas en la vida cotidiana. Cultivo de tejidos vegetales. Usos y aplicaciones del cultivo de tejidos. Organogénesis. Células vegetales como biorreactores. Transformación de plantas. Transformación mediada por Agrobacterium, biobalística y otras. Construcciones utilizadas para la transformación. Vectores y casettes de expresión génica. Vectores y amplicones virales. Expresión de proteínas en plantas. Métodos de expresión transitoria. Agroinfiltración. Silenciamiento génico. Biotecnología vegetal. Desarrollo de plantas transgénicas resistentes a hongos, virus, bacterias, insectos, herbicidas (primera generación de OVGMs). Plantas transgénicas de Universidad de Belgrano – Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Página 4/7 Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Programa Analítico segunda generación: calidad nutricional, Biotecnología forestal. Biorremediación. modificación de metabolismo secundario. Biotecnología animal. Molecular Pharming. Animales transgénicos. Bioinformática. Bases de datos de nucleótidos y de secuencias de proteínas. Uso de herramientas de alineamiento y comparación de secuencias. Otras herramientas informáticas. Estado de avance de proyectos genoma. Microarrays. “Ómicas”: proteómica, genómica, metabolómica. Bibliografía: Trabajos científicos publicados en revistas internacionales. Los seminarios de estudio serán provistos por el docente, se trabajará preferentemente con bibliografía de acceso público. III-Metodología Se trata de una asignatura semestral con 10 horas de clases semanales (4 hs de teoría y 6 hs de prácticas). La propuesta es acercarse a la interpretación y resolución de problemas integrando la teoría con situaciones de aplicación (trabajos prácticos), y análisis de casos (seminarios). Es deseable que el alumno asuma un rol activo que le permita ser protagonista de su propio aprendizaje. Se estimulará la participación del alumno en la discusión e interpretación de resultados. Se promoverá la integración de los conocimientos, se fomentará la observación y el análisis haciendo uso de una actitud creativa y autocrítica. Implementación de la estrategia didáctica: Clases teóricas: (4 hs semanales), los alumnos recibirán una copia del material compartido en la clase. Trabajos prácticos: (6 hs semanales), La guía de trabajos prácticos será entregada a los estudiantes con antelación. Cada sesión contará con una breve explicación provista por el docente. Seminarios: Se dictarán seminarios en que los estudiantes deberán exponer en forma individual o grupal (según las indicaciones del docente), trabajos científicos recientes relacionados a los temas en estudio. Los trabajos serán seleccionados por el docente, y entregados a los alumnos con la suficiente anterioridad. Proyecto de desarrollo tecnológico: Los alumnos encararán la elaboración de un proyecto sobre un tema de libre elección. Durante el transcurso de la materia se facilitarán información y contactos con organizaciones, empresas y organismos involucrados en campos específicos de la actividad seleccionada. Cada proyecto es individual. Visitas guiadas a laboratorios y/o empresas del sector biotecnológico: La visita se coordinará con los alumnos según la disponibilidad de sitios para visitar. Universidad de Belgrano – Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Página 5/7 Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Programa Analítico En todos los casos se hará hincapié en: la interpretación del problema planteado la metodología utilizada para abordar la resolución el fundamento teórico que valida la elección del método. la correcta expresión de procedimiento y de los resultados las conclusiones correspondientes al problema planteado en particular. la coherencia de los resultados respecto del contexto. las posibles generalizaciones del caso particular analizado a otros contextos. la diversidad de estrategias válidas para encarar la resolución de cada problema. la elección de la/s mas adecuada/s en cada escenario. la conveniencia de plantear variantes a las condiciones originales del problema. IV-Criterios de Evaluación Se realizará una evaluación diagnóstica que permitirá al docente conocer las características del grupo y a los alumnos conocer los saberes previos que le serán necesarios para el cursado de la asignatura. La evaluación del curso se realiza a través de: Dos parciales teórico/práctico obligatorios e individuales (aprueba con 4 o más puntos), Para aprobar el parcial el alumno deberá responder al menos una pregunta de cada tema y llegar a un 60% del parcial correctamente respondido. Resolución de trabajos prácticos, El alumno deberá presentar en cada trabajo práctico un informe con los procedimientos realizados, resultados y conclusiones obtenidas. Presentación y discusión de seminarios. Los alumnos leerán y expondrán diferentes trabajos de interés de acuerdo al tema enseñado en la clase teórica. Presentación de un Proyecto de Desarrollo Tecnológico. Los alumnos presentarán un trabajo final, donde aplicarán lo aprendido durante el semestre. En este trabajo deberán desarrollar un proyecto que será entregado y defendido ante sus compañeros y docentes. El parcial debe rendirse en la fecha estipulada por la Facultad. En caso que el alumno desapruebe el parcial cuenta con una instancia de recuperación. Si el alumno estuviese ausente (con causas justificadas o injustificadas) dispondrá de la fecha de recuperación. El desaprobar o no asistir a la recuperación (teniendo el parcial desaprobado) tiene como consecuencia desaprobar el curso de la materia. Las condiciones para firmar los Trabajos Prácticos de la materia son las siguientes: Haber aprobado el parcial o el parcial Recuperatorio Cumplir con la condición de asistencia Haber participado activamente en la presentación y discusión de seminarios Universidad de Belgrano – Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Página 6/7 Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Programa Analítico Aprobar los trabajos prácticos de laboratorio. La materia además requiere un examen final integrador para su aprobación completa. ANEXO I A1 - Carga Horaria - Modalidad de Enseñanza Modalidad Teóricas Act. Prácticas Evaluaciones Total del curso Horas cátedra 64 96 160 Universidad de Belgrano – Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Página 7/7