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XV CONGRESO DE LA SAEM
RAEM • 2007 Vol 44 • No. Supl.
ESTUDIO DE LA CORRELACIÓN GENOTIPO/FENOTIPO EN LA EXPRESIÓN
D E L A M E N I N A E N E L P Á N C R E A S T U M O R A L Y N O T U M O R A L D E U N A PA C I E N T E
A F E C TA D A P O R N E O P L A S I A E N D O C R I N A M Ú LT I P L E T I P O 1 ( N E M 1 ) .
Fainstein Day P.; Fernández Gianotti, T.; Mocetti, E.; Santino, J.P.; Balzaretti, M.; Kozak, A.; Benech, B.;
García Rivello, H.
Laboratorio de Endocrinología y Medicina Nuclear “in vitro” del Servicio de Endocrinología, Metabolismo y Medicina
Nuclear y Servicio de Anatomía Patológica del Hospital Italiano. Gascón 450, 1202 Ciudad de Buenos Aires.
Introducción: El NEM1 es un síndrome heredado en forma autosómica dominante caracterizado por tumores neuroendocrinos de paratiroides, páncreas e hipófisis, entre otros. El gen MEN 1 codifica la síntesis de una proteína llamada menina que es normalmente protectora de la formación de tumores regulando negativamente la proliferación celular. Más de 300 mutaciones ya descriptas del gen MEN1 inhibirían esta función de la menina dando lugar
a la formación de tumores, algunos de ellos malignos. En los pacientes portadores de NEM 1, la mutación heredada o “ de novo” se encuentra en todas las células (“primer golpe”), sin embargo el desarrollo de tumor necesita la inactivación somática del alelo normal usualmente mediante grandes deleciones o pérdida del cromosoma
11 (LOH), eventos caracterizados como “segundo golpe”. Nuestra hipótesis de trabajo fue que los mecanismos
oncogénicos de una mutación dependerían del lugar que ocupan en el gen afectado y sus consecuencias funcionales. Para esto estudiamos la correlación genotipo/fenotipo de la expresión histológica de la menina, en el páncreas tumoral de una paciente afectada por una mutación novel recientemente comunicada.
Material y Métodos: Una mujer de 42 años de edad con antecedentes de hiperparatiroidismo , sin antecedentes
familiares de tumores endocrinos, fue operada en 1995 siendo extirpado el páncreas con múltiples tumores cuyo
estudio histológico e inmuhistoquímico confirmó que eran tumores neuroendócrinos no funcionantes. La secuenciación directa del gen MEN 1, obtenido de ADN de leucocitos circulantes mostró una mutación en el exón 10,
codón 469 que fue confirmada por PCR-RFLP usando la enzima BserI. Estudio inmunohistoquímico: Luego de la
desparafinización de cortes histológicos de páncreas tumoral y no tumoral de la paciente, páncreas normal de sujeto control (control positivo) y tejido humano sin expresión normal de la menina (control negativo) fueron incubados a 4 C con una dilución 1:75 de anticuerpo policlonal de conejo contra el exón 7 de menina humana (Abcam,
Ingl.) cuya visualización se realizó con un Kit Dako LSAB+HRP y un sistema de sustrato cromógeno.
Resultados: La mutación hallada en el exón 10 genera un codón stop y por lo tanto una proteína truncada de 468
aa (en luegar de 610) perdiéndose así los sitios con la señal necesaria para la migración de la menina del citoplasma al núcleo que se encuentran entre los últimos 142 aa. Los estudios inmunohistoquímicos revelaron que la menina se expresa en el núcleo del páncreas control normal (células acinares y de islotes) (Figura1), en el núcleo pero
también en el citoplasma del páncreas no tumoral de la paciente (primer golpe) (Figura 2) y sólo en el citoplasma
del páncreas tumoral (Figura 3).
Conclusión: Esta mutación impide que la menina penetre en el núcleo donde tiene lugar su acción fisiológica de regulación del ciclo celular y supresora de la generación de tumor. La menina fuertemente expresada en el citoplasma de
las células en las que se ha producido el segundo golpe no impide el desarrollo de tumor. En las células no tumorales
del páncreas de la paciente el alelo no afectado posibilita la entrada al núcleo de aprox. el 50% de las moléculas de
menina. Esta alteración parcial no se traduce en tumor ni hiperplasia. El segundo golpe estaría ausente.
Fig. 1: marcación menina +
sólo en núcleos celulares
Fig. 2: marcación menina +
nuclear y citoplasmática.
Fig. 3: marcación menina +
sólo en citoplasmas (núcleos vacíos)