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EFECTO DE TRICHODERMA HARZIANUM RIFAI (CEPA T-22)
SOBRE CULTIVOS HORTÍCOLAS.
GALEANO, M., F. MENDEZ y A. URBANEJA
Departamento I+D. Koppert Biological Systems. Finca Labradorcico del Medio, 65.
Apartado Correos 286. 30880 Aguilas (Murcia).
RESUMEN
T. harzianum es un hongo que produce un mayor vigor a las plantas
tratadas con éste a la vez que le proporciona al cultivo una protección frente
a patógenos del suelo. En el presente trabajo, se ha estudiado el efecto la
aplicación de T. harzianum sobre plantas de semillero de distintos cultivos
hortícolas en Almería y Murcia. Las plantas a las que se aplicó T. harzianum
en la siembra mostraron una fracción radicular y aérea mayor con respecto a
las plantas no tratadas, pudiendo hacer frente a condiciones de estrés con
mayor éxito que las no tratadas que mostraron un crecimiento menor.
INTRODUCCIÓN
Trichoderma harzianum Rifai, 1969, se halla dentro de los hongos
deuteromicetos o también llamados hongos imperfectos donde se incluyen un gran
número de especies de reproducción únicamente asexual, ya sea porque no tienen
o porque no se conoce su reproducción sexual. T. harzianum se caracteriza por sus
conidióforos terminados en fiálidas, esporas lisas, hialinas, con un solo núcleo,
verdosas, subglobosas u ovoides y colonias de crecimiento rápido (7-9 cm) (GAMS
& BISSETT, 1998). Los conidióforos están muy ramificados teniendo cada
ramificación forma de ángulo recto con la pequeña rama que la soporta. Cada
conjunto de ramificaciones tiene forma piramidal semejante a un pequeño arbusto,
morfología característica y típica de este hongo (Fig. 1).
Todos los mecanismos de acción de T. harzianum se basan en el principal
papel como promotor de crecimiento vegetal que tiene, el cual se manifiesta
desde las primeras fases de la plántula, y que le confiere mayores ventajas a la
hora del trasplante. T. harzianum se asocia a las raíces de la planta
proporcionándole un mayor vigor y crecimiento (Fig. 2) (CHANG et al., 1986). Este
hongo crece a medida que lo hace el sistema radicular del vegetal con el que se
encuentra asociado, alimentándose de los productos de desecho y de exudados
que excreta la planta. Ésta a su vez se beneficia al poder colonizar mayor cantidad
de suelo gracias al sistema de hifas del hongo, aumentando considerablemente de
esta manera el crecimiento de la planta. Por ello, se produce un aumento de la
captación de nutrientes y de agua en las raíces, ya que explora mayor volumen de
suelo, y a su vez, incrementa la solubilización de nutrientes orgánicos como el
fósforo. Este mayor vigor a su vez le proporciona a la planta una mayor tolerancia
frente a diferentes tipos de estrés tanto abióticos (causado por fertilización,
1
salinidad, riegos y condiciones climáticas no-óptimas como sequía, temperaturas
altas, etc) como bióticos (ataques de patógenos).
T. harzianum en sentido estricto, comprende la mayoría de las cepas
utilizadas en el control biológico de hongos fito-patógenos (GAMS & BISSETT,
1998), siendo la cepa T-22 una de las más efectivas de las que se producen
(HARMAN et al., 1996), dada su compatibilidad con gran cantidad de productos
fungicidas e insecticidas, y por su adaptación a las diferentes condiciones
ambientales.
T. harzianum como hongo antagonista de muchos hongos patógenos puede
realizar un control biológico sobre agentes patógenos de vegetales y dicho
control se puede resumir principalmente en tres mecanismos de acción (no siendo
los únicos):
-micoparasitismo: un tipo de antagonismo donde el patógeno es empleado
como patógeno por el hongo, parasitando un amplio espectro de especies de
hongos como Rhizoctonia, Sclerotium, Sclerotinia, Helminthosporium,
Fusarium, Armillaria, Colletotrichum, Verticillium, Venturia, Endothia,
Pythium, Phytophthora, Rhizopus, Diaporthe, Fusicladium (AHMED et al.,
1999, 2000; HARMAN et al., 1996; LEWIS et al., 1995; CALVET et al., 1993).
-antibiosis: inhibición del desarrollo o muerte del patógeno por un producto
metabolizado por otro, incluyendo tanto antibióticos como enzimas líticas
extracelulares (TRANE et al., 1997; BENITEZ, et al., 1998; SCHIRMBOCK et
al., 1994).
-competencia: por el espacio en la rizosfera de la planta y por los recursos
nutritivos, propiedad que le proporciona la habilidad de desplazar al
patógeno, suprimiéndolo o no expresándose la enfermedad.
El objetivo del presente trabajo ha sido evaluar el efecto de la cepa T-22 de
T. harzianum, componente del preparado comercial TRIANUM, sobre diferentes
cultivos hortícolas para comprobar su efecto en los primeros estados de la planta.
Para ello se analizó la altura, peso seco y fresco de la raíz y de la parte aérea, de
las plántulas antes del trasplante en tomate, pimiento y pepino.
MATERIAL Y METODOS
Agente biológico: Trichoderma harzianum Rifai.
Para el presente ensayo se utilizó TRIANUM (Koppert B.S.), un preparado
comercial cuya materia activa es T. harzianum cepa T-22. Ésta es híbrida de otras,
las cuales resultan ser muy eficaces en sus rangos de temperaturas y pH, y
resistentes a distintos patógenos. La T-22 puede vivir en cualquier tipo de suelo, y
soporta un elevado rango de temperaturas (10-34 ºC) y de pH (4-8,5). En los
ensayos se han utilizado los dos formulados disponibles de TRIANUM (ambos con
1,15 % p/p polvo de esporas):
2
-TRIANUM-G contiene 1,5x108 CFU (unidades formadoras de colonias) por
gramo de materia seca. Es un granulado que se puede mezclar con el
sustrato.
-TRIANUM-P contiene 6x108 CFU (unidades formadoras de colonias) por
gramo de materia seca. Es un polvo mojable que se usa con el agua de
riego.
Cultivos hortícolas.Los ensayos se han llevado a cabo en los siguientes cultivos: Tomate
(Lycopersicum esculentum L.), pepino (Cucumis sativus Mill.) y pimiento (Capsicum
annumm L.). En la tabla 1 se resumen las características y peculiaridades deA los
distintos ensayos .
Metodología y diseño experimental.En el diseño experimental se siguió un protocolo común para todos los
ensayos, en el que se diferenciaban plantas tratadas con T. harzianum
(Trichoderma) y plantas no tratadas (Control).
Las dosis empleadas fueron las siguientes:
-TRIANUM G (para mezclar con el sustrato): 0,75 Kg / m3.
-TRIANUM P (con el agua de riego): 3g / m2 (2,5-5 l agua).
TRIANUM-G era mezclado con el sustrato en la mayoría de los ensayos, y
cuando esto no era posible por el manejo del semillero la aplicación se realizaba
con TRIANUM-P a la salida de las primeras hojas verdaderas de las plántulas
(Tabla 1).
Las aplicaciones de T. harzianum no interfirieron en las prácticas habituales
de los semilleros por ser un producto compatible con la mayor parte de los
tratamientos químicos.
Se procesaron al menos 25 plantas por tratamiento a partir de un mínimo de
5 bandejas por tratamiento, de las cuales se analizaron los parámetros vegetativos
de las plántulas: peso fresco y seco de la raíz y de la parte aérea, y altura de las
mismas, sobre el desarrollo inicial de los distintos cultivos hortícolas de la zona de
Almería y Murcia.
Análisis de los datos.Para conocer la existencia de diferencias estadísticas entre los distintos
parámetros estudiados, se aplicó un modelo de análisis de la varianza (ANOVA,
P<0,05) de un solo factor (SPSS, 1999).
3
RESULTADOS Y CONCLUSIONES
La altura de las plantas tratadas con T. harzianum en todos los ensayos fue
mayor y con diferencias significativas entre tratamientos (Fig. 3). Comparando el
tratamiento con T. harzianum con el testigo, este aumento representó un 36% más
en tomate, un 17% en pimiento y un 6% en pepino.
La parte aérea de las plantas tratadas según el parámetro de peso fresco
aéreo fue mayor en todos los cultivos ensayados (Fig. 4 A), mostrando diferencias
significativas en los dos de tomate, en pepino y en el pimiento spiro . Por otra
parte, teniendo en cuenta el peso seco de dicha fracción, las diferencias se
repitieron en todos los ensayos mencionados salvo en pepino (Fig. 4 B) .
En la figura 5A, se observa el peso fresco de la parte radicular de la planta.
El sistema radicular fue mayor con diferencias significativas, a excepción del tomate
injertado (tomate 2). Estas diferencias no se corroboraron en cuanto al peso
radicular seco a excepción del tomate 1 (Fig. 5 B).
La aplicación de T. harzianum en los primeros estados de la planta para los
cultivos hortícolas ha mostrado un aumento general del sistema radicular y de la
parte aérea proporcionándole un mayor vigor y protección a las mismas a la hora
del trasplante. El efecto de este hongo en los primeros estados del cultivo es pues
claramente positivo, como muestran los resultados, ya que a la hora del trasplante
la planta se haya más protegida ante los estados de estrés que sufre.
Los ensayos presentados en este trabajo forman parte de un estudio de T.
harzianum desde el inicio del cultivo hasta el final del mismo, por lo que se está
haciendo un seguimiento en campo de dichas partidas para comprobar el efecto de
control biológico que T. harzianum realiza ante los patógenos del suelo debido a su
poder antagonista y micoparásito ya comentado.
AGRADECIMIENTOS
Los autores agradecen a los técnicos responsables de los semilleros D. Juan
Ignacio Tijeras de los Semilleros Crisel y a D. Manuel Cremades de Semilleros El
Plantel, ambos sitos en La Mojonera (Almería), y a D. Pedro Córdoba de Adesur en
Águilas (Murcia), por permitir realizar los diferentes ensayos en sus semilleros y
con su material vegetal, así como a los responsables técnicos de Koppert Biological
Systems de Almería y Murcia por su valiosa colaboración, y a los compañeros del
departamento I+D, D. Javier Calvo y Dª Ana Gallego.
BIBLIOGRAFÍA
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4
AHMED, S. A., PEREZ-SANCHEZ, C. & CANDELA, M. E. 2000. Evaluation of
induction of systematic resistance in pepper plants (Casicum annuum) to
Phytophthora capsici using Trichoderma harzianum and its relation with capsidiol
accumulation. Eur. J. Plant Pathol., 106: 817-824.
BENITEZ, T., LIMON, J. DELGADO-JARANA, J. & REY, M. (1998). Glucanolytic
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CALVET, C., PERA, J. & BAREA, J. M. 1993. Growth response of marigold
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CHANG, Y. C. , BAKER, R. , KLEIFELD, O. & CHET, I. 1986. Increased growth of
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Dis., 70: 145-148.
GAMS, W & BISSETT, J. (1998). Morphology and identification of Trichoderma. In:
Trichoderma and Gliocladium. Vol. 1. 3-34 pp. Eds. Taylor & Francis. London.
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HARMAN, G. E., LATORRE, B., AGOSIN, E., SAN MARTÍN, R., RIEGEL, D. G.,
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SCALA, F. HARMAN, G. E. & KUBICEK, C. P. (1994). Pararell formation and
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SPSS, 1999. SPSS Manual del usuario, versión 10.0 para Windows 98. SPSS,
Chicago, IL.
TRANE, C. TRONSMO, A. & JENSEN, D. F. (1997). Endo-1, 3- beta gluconase and
cellulase from Trichoderma harzianum
purification and partial characterization,
induction of biological activity against plant pathogenic Pythium spp. Eur. J. Plant
Pathol, 103: 331-344.
5
Tabla 1.- Características agronómicas de los ensayos de Trichoderma harzianum
T-22 sobre los diferentes cultivos en semillero.
Cultivo
Tomate
1
Tomate
2
Pepino
Pimiento
1
Pimiento
2
Variedad
Localización
Daniela
Almería
Boludo
injertado en
He-man
Neptuno
Beret
Spiro
Águilas
(Murcia)
La Mojonera
(Almería)
La Mojonera
(Almería)
Águilas
(Murcia)
Fecha
Tipo
Aplicaciones
Fecha
Siembra
sustrato
y fecha
muestreo
TRIANUM-G
14/08/02
TRIANUM-G
26/08/02
10/07/02
8/7/02
(He-man)
Turba+
vermiculita
Turba +
vermiculita
Turba +
TRIANUM-G
perlita
TRIANUM-P
27/7/02
Turba
TRIANUM-P
3/09/02
31/07/02
Turba
TRIANUM-G
9/09/02
22/08/02
15/09/02
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Figura 1.- Microfotografías de Trichoderma harzianum. A) y B) Morfología de los
conidióforos y observación de las esporas. C) Conidios.
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Figura 2.- Efecto de Trichoderma harzianum T22 sobre tomate. A) Injerto de
tomate Boludo sobre He-man , tratada (derecha) y no tratada (izquierda). D)
Plantas de tomate Daniela tratada (izquierda) y no tratada (derecha).
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Figura 3.- Altura de las plantas en los distintos ensayos (Media ± ES). Entre barras
dentro de cada tratamiento, letras distintas indican diferencias significativas
(ANOVA, P< 0,05).
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Figura 4.- Peso aéreo (A) fresco y (B) seco de las plantas en los distintos ensayos
(Media ± ES). Entre barras dentro de cada tratamiento, letras distintas indican
diferencias significativas (ANOVA, P< 0,05).
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Figura 5.- Peso radicular (A) fresco y (B) seco de las plantas en los distintos
ensayo (Media ± ES). Entre barras dentro de cada tratamiento, letras distintas
indican diferencias significativas (ANOVA, P< 0,05).
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