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Bacteriología
Laboratorio # 3
Objetivos



Comprender la diferencia entre procariotas y
eucariotas
Observar los cambios entre el sistema de
clasificación anterior y el utilizado
actualmente
Aprender técnicas básicas de microbiología
y control de bacterias
Procariotas



Carecen de núcleo y
organelos limitados por
membranas.
Son organismos
unicelulares.
Se encuentran en
mayor cantidad.
Eucariotas


Poseen un núcleo
organizado y organelos
delimitados por
membranas.
Pueden ser
unicelulares o
pluricelulares.
Sistema de cinco reinos


Robert Whittaker (1969)
Procariotas


Reino Monera (bacterias)
Eucariotas




Protista (protozoos, algas, mohos del limos, entre otros)
Fungi (hongos y liquenes)
Plantae (musgos, helechos, coníferas, plantas con flor)
Animalia (vertebrados e invertebrados)
Sistema de seis reinos


Carl Woese (1977)
Procariotas



Eubacterias
Archaebacterias
Eucariotas




Protista
Fungi
Plantae
Animalia
Sistema de tres dominios


Carl Woese & George Fox (1990)
Procariota
–
–

Bacteria
Archaea (Presentan envolturas con pseudomureína,
ácidos nucleicos ribosomales con nucleótidos
mdificados, el ADN se empaquetaen nucleosomas,
presentan intrones)
Eucariota
–
Eukarya
Bacterias






Procariotas
Unicelulares
Carecen de organelos rodeados por
membranas
Pared celular de peptidoglicano
DNA en forma de anillos – plásmidos
No tienen cromosomas



Reproducción por
fisión binaria
Autótrofas
Heterotrofas
Beneficios de bacterias



Descomposición y biorremediación
Síntesis de vitaminas y antibióticos
Industria de alimentos
–

Equilibrio ecológico
–

Yogurt
Fijación de nitrógeno
Flora natural del cuerpo
Desventajas
Morfología
cocos
bacilos
espirilos
Ejercicio 1
Frotis de la boca


Obtener y observar células bacterianas
presentes en la boca. PLACA
Procedimiento:
–
–
–
–
Preparar laminilla con UNA gota de agua
Frotar el interior de la boca con un palillo de madera
Esparcir por la laminilla
Sujetar la laminilla con pinzas y secar en mechero (no
muy cerca)
Procedimiento (continuación)
–
–
–
–
–

Teñir con 3-4 gotas de cristal violeta
Esperar 1 minuto
Lavar con agua
Secar suavemente
Observar bajo el microscopio
(utilizar aceite de inmersión si es necesario)
Dibuja las células, responde preguntas
Ejercicio 2
Bacterias Ambientales
Tomar placa con agar (1 por mesa)

a.
b.
c.





Exposición al ambiente
Muestreo de superficies
Muestreo de agua
Hacer estriado en placa
Sellar la placa con parafina
Rotular en los bordes
Incubar 48 hrs.
Anotar observaciones y dibujar
Control de Crecimiento Bacteriano

Importancia:
–
–

Bacterias crecen en una variedad de ambientes
Crecimiento descontrolado o en exceso puede
causar daños ambientales o enfermedades
Agentes de control bacteriano
–
–
–
Antibióticos
Antisépticos
Desinfectantes

Antibióticos
–

Antiséptico
–

Químico producido por una bacteria u hongo que puede
controlar el crecimiento de otra bacteria u hongo
Controlan crecimiento bacteriano en tejidos vivos
Desinfectantes
–
Controlan el crecimiento bacteriano en objetos inanimados
Nota
Los antisépticos y desinfectantes
no matan todas la bacterias
como ocurre en la esterilización,
solo reducen el número de
bacterias en la superficie
Eejrcicio 3




Dividir el plato petri en cuatro cuadrantes
(por detras).
Sumergir el hisopo estéril en el caldo de
bacterias (cerca a mechero, tapar rápido).
Estriar en plato (en dos direcciones).
Colocar discos.



Sellar con parafina
Marcar alrededor
Incubar 48 hrs. /
Observar resultados

Observar inhibición de
crecimiento.

Medir halo de inhibición
en mm.
– Halo de inhibición
– área alrededor del
disco donde el
crecimiento
bacteriano ha sido
inhibido
Anotar resultados y
usarlos en el informe.
INDIVIDUAL
Importante


Ejercicio 4.
Laminillas de bacterias


Montar laminillas en microscopios
Observar y tomar nota de características:
forma (bacilos, cocos, espirilos), si están
agregados o separados
Ejercicio 5.
Morfología de colonias

Describir la morfología de las colonias
(estereoscopio): tamaño (medir), borde, color, si
están en relieve, características de la superficie…
(ver términos guía ).

Escribir observaciones INDIVIDUAL en tabla 13.1

Ver preguntas de la guía
Nombre
Sp1
Sp2
Tamaño
Forma
Margen
Superficie
color