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ELECTROFORESIS
µ
µ
MOVILIDAD ELECTROFORÉTICA
q.E = Ff
q.E = 6r v
v = q.E / 6r
µ = v/E = q/ 6r
pH bajo:
carga neta positiva
pI: carga neta nula
pH alto: carga neta
negativa
Cuando el pH es bajo, los grupos
ionizables están protonados, y la carga
neta de la proteína es de signo positivo.
Cuando el pH es alto, los grupos
ionizables están desprotonados, y la
carga neta es de signo negativo.
* Moléc. (+)  polo (-) o cátodo
ELECTROFORESIS
cátodo
* Moléc. (-)  polo (+) o ánodo
ánodo
ELECTROFORESIS LIBRE
 moléculas en disolución o suspensión:
poco resolutiva
SOPORTE
cátodo
ánodo
ELECTROFORESIS DE ZONA
 SOPORTE que retiene las moléculas:
elevado poder de resolución
TIPOS DE ELECTROFORESIS
Libr
e
Papel
Tipos de
electroforesis
De Zona
Acetato de celulosa
Gel
Almidón
Poliacrilamida
Agarosa
EQUIPO DE
ELECTROFORESIS
• Fuente de
alimentación
• Soporte para las tiras
de acetato de
celulosa
–
–
–
–
Aplicador
Cubetas
Puente
Reactivos
EN ACETATO DE CELULOSA: PROTEINOGRAMA
Soporte: (no restrictivo) Tiras de acetato de celulosa
Electroforesis horizontal
muestra
Strip
+
Avance de las proteínas
Campo eléctrico (DV)
1. Aplicación de la muestra
2. Electroforesis
3. Detección por tinción:
Azul de Coomassie
Negro amido
4. Densitometría
-
APLICACIÓN DE LA
ELECTROFORESIS
• Fraccionamiento de
las hemoglobinas
• Diferenciación de la
hemoglobina fetal
• Diagnóstico de
talasemias, anemias
falciformes, etc
•
•
•
•
•
•
•
Proteínas séricas
Proteínas urinarias
Lipoproteínas
Ácidos nucleicos
Enzimas
Inmunoelectroforesis
Etc.