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CLASIFICACION DE LOS METODOS SEGUN LA FORMA DE VISUALIZAR LA REACCION Inmunógeno: molécula o sustancia capaz de inducir una respuesta inmune específica. Antígeno: molécula o sustancia capaz de reaccionar con los productos de la respuesta inmune específica. Hapteno: molécula de bajo pesos molecular incapaz de inducir una respuesta inmune a menos que se encuentre conjugada a una proteína carrier Anticuerpo monoclonal: es un anticuerpo que proviene de la activación de una única célula B y que reconoce un único epitope. Anticuerpos policlononales poliespecificos: es una mezcla de anticuerpo provenientes de la activación de muchas células B y pueden reconocer diferentes epitopes de varias moléculas. Ej. anti IgG humana Anticuerpos policlononales monoespecificos: es una mezcla de anticuerpo provenientes de la activación de muchas células B y pueden reconocer diferentes epitopes pero que se encuentran en una única molécula. Ej. anti cadena g humana REACCIONES DE PRECIPITACIÓN Son reacciones Ag-Ac de tipo secundaria donde ambos reactantes se encuentran solubles. Sin embargo para poder visualizar el fenómeno de precipitación la reacción se llevan a cabo en medios semisólidos (agar o agarosa). CARACTERÍSTICAS DIFERENCIALES DE LAS REACCIONES DE AGLUTINACIÓN Y PRECIPITACIÓN Aglutinación Precipitación Ag particulado Ag soluble Sensible Poco sensible Fase liquida Fase semisolida (agar) TIPOS DE REACCIONES DE PRECIPITACIÓN Debido a que estas reacciones se realizan en medios semisolidos y los reactantes difunden a travez de este medio, estas reacciones son conocidas como reacciones de inmunodifusión. Inmunodifusión radial simple (IDRS) o metodo de Manchini Inmunodifusión Inmunodifusión radial doble (IDRD) o metodo de Ouchterlony INMUNODIFUSIÓN RADIAL SIMPLE (IDRS) En esta variante el anticuerpo se encuentra diluido en el agar y el antigeno se siembra en un pocillo realizado en el agar. El antigeno difunde por el agar y cuando encuentra su zona de equivalencia con el Ac precipita formando un halo de precipitación IMPORTANTE: El tamaño de halo depende de la del diámetro del pocillo de siembra y de la concentración de Ag. En base a esta característica este método puede emplearse para cuantificar antígenos IDRS CUANTITATIVA M T1 T2 T3 D2 Medir el diámetro de halo de los testigos y realizar curva calibración. Luego medir el D de la M y extrapolar en la curva para obtener la [ ] [ ] IDRS CUANTITATIVA La precipitación es un método que tiene baja sensibilidad. A través de este método se puede cuantificar proteínas que se encuentran en altas concentraciones : -Inmunoglobulinas: IgG, IgA, IgM -Factores de complemento: C3 y C4 -Otros: Transferrina INMUNODIFUSIÓN RADIAL DOBLE (IDRD) En este metodo el AC y el AG se siembran en pocillos separados realizado en el agar. El Ac y el Ag difunden por el agar y cuando encuentra su zona de equivalencia forman una línea de precipitación. Este método se utiliza para evidenciar la presencia de un antígeno en una muestra o para analizar el grado de relación entre antígenos IDRD CUALITATIVA INMUNOELECTROFORESIS