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Inmunodifusión doble de Ouchterlony wikipedia , lookup

Respuesta de células B policlonales wikipedia , lookup

Hapteno wikipedia , lookup

Epítopo wikipedia , lookup

Transcript
CLASIFICACION DE LOS METODOS SEGUN LA FORMA
DE VISUALIZAR LA REACCION
Inmunógeno: molécula o sustancia capaz de inducir una
respuesta inmune específica.
Antígeno: molécula o sustancia capaz de reaccionar con los
productos de la respuesta inmune específica.
Hapteno:
molécula de bajo pesos molecular incapaz de
inducir una respuesta inmune a menos que se encuentre
conjugada a una proteína carrier
Anticuerpo monoclonal: es un anticuerpo que proviene
de la activación de una única célula B y que reconoce
un único epitope.
Anticuerpos policlononales poliespecificos: es una
mezcla de anticuerpo provenientes de la activación de
muchas células B y pueden reconocer diferentes
epitopes de varias moléculas. Ej. anti IgG humana
Anticuerpos policlononales monoespecificos: es una
mezcla de anticuerpo provenientes de la activación de
muchas células B y pueden reconocer diferentes
epitopes pero que se encuentran en una única
molécula. Ej. anti cadena g humana
REACCIONES DE PRECIPITACIÓN
Son reacciones Ag-Ac de tipo secundaria donde ambos
reactantes se encuentran solubles. Sin embargo para
poder visualizar el fenómeno de precipitación la reacción
se llevan a cabo en medios semisólidos (agar o agarosa).
CARACTERÍSTICAS DIFERENCIALES DE
LAS REACCIONES DE AGLUTINACIÓN
Y PRECIPITACIÓN
Aglutinación
Precipitación
Ag particulado
Ag soluble
Sensible
Poco sensible
Fase liquida
Fase semisolida (agar)
TIPOS DE REACCIONES DE
PRECIPITACIÓN
Debido a que estas reacciones se realizan en medios
semisolidos y los reactantes difunden a travez de este
medio, estas reacciones son conocidas como reacciones
de inmunodifusión.
Inmunodifusión radial simple (IDRS) o
metodo de Manchini
Inmunodifusión
Inmunodifusión radial doble (IDRD) o
metodo de Ouchterlony
INMUNODIFUSIÓN RADIAL
SIMPLE (IDRS)
En esta variante el anticuerpo se encuentra diluido en el agar y el
antigeno se siembra en un pocillo realizado en el agar. El antigeno difunde
por el agar y cuando encuentra su zona de equivalencia con el Ac precipita
formando un halo de precipitación
IMPORTANTE: El tamaño de halo
depende de la del diámetro del pocillo de
siembra y de la concentración de Ag. En
base a esta característica este método
puede
emplearse
para
cuantificar
antígenos
IDRS CUANTITATIVA
M
T1
T2
T3
D2
Medir el diámetro de halo de
los testigos y realizar curva
calibración. Luego medir el D
de la M y extrapolar en la
curva para obtener la [ ]
[ ]
IDRS CUANTITATIVA
La precipitación es un método que tiene baja
sensibilidad. A través de este método se puede
cuantificar proteínas que se encuentran en altas
concentraciones :
-Inmunoglobulinas: IgG, IgA, IgM
-Factores de complemento: C3 y C4
-Otros: Transferrina
INMUNODIFUSIÓN RADIAL DOBLE
(IDRD)
En este metodo el AC y el AG se siembran en pocillos separados realizado
en el agar. El Ac y el Ag difunden por el agar y cuando encuentra su zona
de equivalencia forman una línea de precipitación.
Este método se utiliza para evidenciar la presencia de un antígeno en una
muestra o para analizar el grado de relación entre antígenos
IDRD CUALITATIVA
INMUNOELECTROFORESIS