Download Aplicaciones de hemaglutinación 2015

APLICACIONES
DE LA
HEMOAGLUTINACIÓN
2015
Interacción Anticuerpo - Antígeno partículado
agrupamiento visible
Aglutinación
Implican la aglutinación de eritrocitos
HEMAGLUTINACIÓN
• Estas reacciones, en las que participan los
antígenos de superficie de los eritrocitos y sus
anticuerpos complementarios, se utilizan de
modo sistemático en la determinación de grupos
sanguíneos
y
en
diagnóstico
mononucleosis infecciosa.
de
la
• Estas pruebas se basan en la capacidad de algunos
patógenos para causar la aglutinación de los eritrocitos.
Detectar el patógeno
Pruebas de hemaglutinación
Detectar los anticuerpos dirigidos contra las hemaglutininas
del microorganismo
Inhibición de la hemaglutinación
Suelen ser pruebas específicas de serotipo o subtipo y
bastante sensibles.
• Ciertos virus, como los que causan la parotiditis
epidémica,
sarampión
y
gripe,
tienen
la
capacidad de aglutinar eritrocitos sin una
reacción antígeno-anticuerpo; este proceso se
denomina Hemaglutinación viral.
• Este tipo de hemaglutinación puede ser inhibida
por los anticuerpos que neutralizan al virus
aglutinante
INHIBICIÓN DE LA
HEMOAGLUTINACIÓN (IHA)
• Se basa en la pérdida de la capacidad
hemoaglutinante de un virus al formarse el
complejo
antígeno-anticuerpo.
Cuando
se
enfrenta un virus conocido a un virus problema,
estos se unen impidiendo la hemoaglutinación
viral (provocando la IHA).
• Esto se demuestra haciendo reaccionar la
mezcla de antígeno con anticuerpo (suero del
paciente) y luego con glóbulo rojo, los que no se
unen y sedimentan formando un botón o punto;
en ausencia del anticuerpo específico se
expresa la propiedad hemoaglutinante del virus,
que se visualiza por la formación de una malla
de aglutinación.
Suero A
Suero A
Esta técnica es utilizada para tipificar
(identificar) virus con capacidad
hemoaglutinante presentes en una muestra
dada (virus influenza, parainfluenza, etc.), que
al unirse a los anticuerpos específicos, pierden
esta propiedad.
MONONUCLEOSIS
INFECCIOSA
• Es una enfermedad provocada por un virus de
la familia de los Herpes conocido como virus de
Epstein-Barr.
LINFOCITOSIS
ATÍPICA
• El virus de Epstein-Barr (EBV) es uno de los virus
más frecuentes y ha sido asociado a varios tipos de
tumores incluyendo el Carcinoma de Nasofaringe
Indiferenciado (CNI), el linfoma de Burkitt y linfomas
de células B en pacientes con inmunodeficiencias.
En los últimos años, se ha propuesto el virus de
Epstein-Barr como el causante del Síndrome de
Fatiga Crónica.
• El virus, de la familia de los virus Herpes, consiste en
una cadena helicoidal de DNA doble encapsulada
rodeada
de
una
cápside
icosaédrica
de
164
capsómeros. Todo el virus está envuelto por una
cubierta glicoproteica. Los dos tipos de virus de Epstein-
Barr que existen en la naturaleza no pueden ser
distinguidos
serológicamente.
• El
virus
es
transmitido
mediante
saliva
infectada, a menudo a partir de adultos
asintomáticos y suele ocurrir cuando se besan.
Con contactos menos íntimos, el contagio es
menor. En algún caso se ha producido la
transmisión
del
virus
trasplantes de médula.
en
transfusiones
y
Infección Primaria
Células B en
cavidad oral
Replicación viral
Memoria
de la
célula T
Células epiteliales
Crecimiento y transformación de
las células B
Infección lítica (ocasional)
Respuesta
inmune
EBV replicadas
en células B
Reactivación
EBV específico
citotóxico para
célula T
Células B
durmientes
(como
consecuencia
de células T
alteradas)
Infección
persistente
Infección
Otras
células
B
Proliferación de EBV
en la saliva
Células
epiteliales
Replicación
Infección
persistente
: estado
crónico del
virus
• Los estudios epidemiológicos indican que más
del
90%
de
individuos
asintomáticos
seropositivos son portadores del virus en sus
secreciones orales.
• Los glóbulos blancos suelen estar elevados
alcanzándose entre 10.000 y 20.000 células/mL
a las 2-4 semanas de la infección. Se
demuestra normalmente linfocitosis con más de
un 10% de linfocitos atípicos.
• Linfocitos atípicos:
más grandes
con abundante citoplasma,
vacuolas
indentaciones de la membrana
• Entre las células anormales predominan las CD8+.
• Son frecuentes una neutropenia y trombocitopenia
moderadas durante el primer mes de la enfermedad.
• La función hepática es anormal en el 90% de los casos:
las transaminasas y la fosfatasa alcalina están aumentadas
y también la bilirrubina en un 40% de los casos.
Parte experimental
MONONUCLEOSIS INFECCIOSA
Fundamento de la Técnica
• Los anticuerpos heterófilos asociados a la
mononucleosis infecciosa se detectan por su
capacidad de aglutinar los eritrocitos de caballo
o carnero y neutralizándose simultáneamente
los
anticuerpos
no
asociados
a
la
mononucleosis (con extracto de riñón de
cobayo).
• La aglutinación se visualiza
macroscópicamente.
Material requerido
Muestra: suero
• Placa para la reacción
• Palillos mezcladores
• Pipetas automáticas
• Punteras
• Cronómetro
Parte experimental
• Ver inserto según kit de reactivo a utilizar
Aplicaciones de la
INMUNO-HAI
TPHA
• La sífilis es una enfermedad venérea provocada
por la infección de una espiroqueta T. pallidum.
• Los test serológicos para sífilis son clasificados
como:
 No treponémicos
 Treponémicos: TPHA, ELISA y FTA-abs.
Principio de la TPHA
• Eritrocitos estabilizados de ave, sensibilizados con
componentes antigénicos del Treponema pallidum
altamente
purificados,
muestran
aglutinación
cuando reaccionan con anticuerpos contra esos
antígenos presentes en el suero, plasma o líquido
cefalorraquídeo de pacientes con sospecha de
sífilis.
• Anticuerpos
provenientes
de
TREPONEMAS
SAPRÓFITAS podrían causar falsos positivos si son
absorbidos por componentes presentes en el
diluyente estabilizados de hematíes sensibilizados
Muchas gracias…