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IRAC
Espec
2013
CLASIFICACIÓN, MICROMANIPULACIÓN Y CONGELADO DE
EMBRIONES BOVINOS
Fecha: ___________
Nombre y Apellido: ___________________
Objetivo:
1. Transferir lo estudiado a lo largo del curso en la resolución de las actividades
presentadas.
Criterios de evaluación:
1. Manejo conceptual, nivel de profundización y capacidad para establecer
relaciones.
2. Capacidad crítica y posibilidad de realizar análisis personales.
3. Integración y transferencia de lo estudiado a situaciones concretas.
1. Observe las fotografías de embriones y en base al Sistema de Evaluación de
embriones de la Sociedad Internacional de Embriones (IETS) haga una
clasificación de los embriones según:
a. el estadio de desarrollo
b. la Calidad (grado 1,2,3,4).
c. Explique para cada fotografía la/s característica/s que tuvo en cuenta
para calificar los embrión.
2. Realice una comparación entre el método de congelado y la vitrificación de
embriones teniendo en cuenta: medios de congelado, toxicidad, curva de
congelado, método de descongelado y practicidad (costos, entrenamiento,
etc.).
3. Enumere al menos 3 factores importantes para la obtención de preñeces a
partir de la transferencia de embriones micro manipulados (hemi-embriones)
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RESPUESTAS PREGUNTA Nº 1
1) FOTO Nº 1: Estadio 4 , grado 2 . Caracteristicas: morula compacta
ocupa el 60 a 70 % del espacio perivitelino, tiene rota la zona pelucida
2) FOTO Nº 2 : Estadio 7 , grado 2 , Caracteristicas :zona pelucida
delgada, blastomeras sueltas
3) FOTO Nº 3 : Estadio 4, grado 1. Caracteristicas : morula compacta
ocupa 60 % del espacio perivitelino., zona pelucida en excelente estado.
4) FOTO Nº 4 : Estadio 5; grado 3. Caracteristicas: el embrión ocupa el 80
% del espacio perivitelino . tiene algunas blastomeras sueltas.
5) FOTO Nº 5: Estadio , grado 3 . Caracteristicas: blastocisto con
numerosas blastomeras sueltas y células de distintos tamaños .
6) FOTO Nº 6: infertilizado . grado 4 (puntillado)
7)
RESPUESTAS PREGUNTA Nº 2
-Medios de congelación:
El Etilenglicol remplaza osmóticamente el agua intracelular en las células del
embrión antes de la congelación. Este método usa Tasas lentas de
congelamiento reduce los cambios de volumen celular .
La Vitrificación usa altas concentraciones de crioprotectores, el embrión se
coloca en el crioprotector y en contacto directo con el nitrógeno líquido. Debido
a las altas concentraciones del crioprotector no se forman micro critales de
hielo ( las concentraciones de los crioprotectores son de 6M).
-Toxicidad:
El Etilenglicol a razón de 1.5 M (baja toxicidad).
En la Vitrificación, las altas concentraciones de los crioprotectores pueden ser
tóxicos para el embrión, químicamente y osmóticamente, para minimizar este
riesgo se deben agregar los crioprotectores en dos pasos.
-Curva de Congelado:
Con el etilenglicol se baja -5y -7°C luego descenso lento de la temperatura (0,3
ó 1,0°C/min) hasta los -30 ó -35°C; posteriormente colocación en nitrógeno a 196°C.
La Vitrificación tiene curvas de congelamiento rápidas debido a la
concentración de los crioprotectores y el contacto directo con el nitrógeno.
-Método de descongelado:
Con el Etilenglicol la tasa de descongelación es relativamente rápida,
(aproximadamente a 250°C/min) para evitar la recristalización. Se colocan los
embriones en agua a 30°C por 30 segundos.
Para la Vitrificación, el descongelado debe ser rápido generalmente a 37°C en
baño María durante 20 segundos
-Practicidad:
Para transferir el embrión en etilenglicol es muy practico por que se transfiere
directamente luego de descongelado en cambio en el embrión vitrificado hay
que extraer crioprotector antes de transferirlo.
-Costo y Entrenamiento:
Con el Etilenglicol, la técnica no es costosa y con poco entrenamiento se
puede realizar fácilmente, es de uso cotidiano. Si se necesita mas
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equipamiento como microscopio congeladora y descogeladora, ( alto costo
inicial. )
RESPUESTA A PREGUNTA Nº 3
Factores para lograr altos porcentajes de preñez en micromanipulacion: el
mejor estadio de morula, y en estado excelente o muy bueno , con altas
cantidad de células, y con un embrión cortado en la mitad , 50% y 50%