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Especialización en Reproducción bovina 2011
IRAC
CLASIFICACIÓN, MICROMANIPULACIÓN Y CONGELADO DE
EMBRIONES BOVINOS
Fecha: 2 de Septiembre de 2011
Nombre y Apellido: Javier de la Mata
Objetivo:
1. Transferir lo estudiado a lo largo del curso en la resolución de las actividades
presentadas.
Criterios de evaluación:
1. Manejo conceptual, nivel de profundización y capacidad para establecer
relaciones.
2. Capacidad crítica y posibilidad de realizar análisis personales.
3. Integración y transferencia de lo estudiado a situaciones concretas.
1. Observe las fotografías de embriones y en base al Sistema de Evaluación de
embriones de la Sociedad Internacional de Embriones (IETS) haga una
clasificación de los embriones según:
a. el estadio de desarrollo
b. la Calidad (grado 1,2,3,4).
c. Explique para cada fotografía la/s característica/s que tuvo en cuenta
para calificar los embrión.
4:1 = mórula muy simétrica, casi perfecta. El único
defecto que se observa es la rotura de la zona pelúcida
en la parte superior de la foto. Embrión no apto para
exportación.
3:4 =Asemeja a una mórula temprana, pero degenerada y
no viable. Todavía se pueden individualizar los
blastómeros. No es muy simétrico y presenta varios
blastómeros degenerados, vesículas y debris que
ocupan casi todo el espacio perivitelino.
Infertilizado: La membrana perivitelina es bien lisa, se
observa el típico puntillado de un ovocito infertilizado
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(UFO) y no se observan blastómeros.
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1) 5:2 = presenta unas imperfecciones en la parte superior. Separación
entre blastómeros. La separación de todo el macizo celular interno hace
que el embrión ocupe más espacio de lo normal para un blastocisto
temprano.
2) 4:2 = Bueno a regular, pero lo bajaría de calidad por: tener unos pocos
blastómeros extruidos en posición horaria 7:00 y el embrión no es
simétrico siendo un poco ovalada la zona pelúcida.
3) 5:1 =Si bien hay algunos debris en el espacio perivitelino no lo bajaría de
calidad. EL blastocele es pequeño y está en proceso de formación.
4) 4:1 =excelente, tiene algo de moco o debris por afuera de la zona
pelúcida.
5) 6:1= Excelente
6) 7:1= La zona pelúcida ya está “adelgazada”
7) 4:1= Se observa un gran blastómero extruido y un segundo blastómero
más pequeño a su lado. De todas maneras la masa celular intacta ocupa
más del 85 %.
4:2 = si bien se observa un gran blastómero extruido en
posición horaria 11 , el resto del macizo de células supera
el 50 % del total de embrión, siendo menor al 80 %.
También hay debris celulares, pero el resto de la mórula
presenta signos de viabilidad.
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4:2 = si bien se observan 5 o 6 blastómeros extruidos del
resto de la masa celular, el resto supera el 50 % pero
menos del 84 % de masa celular intacta.
7:2, La zona pelúcida se observa más fina, lo que indica
que se ha adelgazado. Este blastocisto expandido
presenta algunas vesículaciones y debris en posición
horaria 3:00. Además parece tener un blastómero
extruido en posición horaria 12:00. El blastocele es
pequeño a la izquierda y en este estado embrionario se
esperaría tener una blastocele de mayor tamaño;
además todo el embrión debería ocupar la totalidad del
espacio perivitelino.
4:3 = La masa celular intacta ocupa menos del 50 %. A la
izquierda de esta se observan debridaciones celulares.
Embrión para transferir en fresco con escasa chances de
lograr preñez. No congelable.
3:1 = esta es una mórula temprana perfecta. Los
blastómeros todavía pueden identificarse individualmente.
Si este embrión fuera colectado el día 7 a 7,5 tal vez
podría se bajado de calidad por estar demasiado
retrasado en su desarrollo con respecto a los días.
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2. Realice una comparación entre el método de congelado de embriones con
etilenglicol y la vitrificación teniendo en cuenta: medios de congelado, toxicidad,
curva de congelado, método de descongelado y practicidad (costos,
entrenamiento, etc).
Congelación
Requiere un solo medio de etilenglicol
Curva lenta -0,5 ºC/min
Requiere una máquina congeladora
Es práctica ya que la máquina es
automática excepto por el seeding
Gran capital de inversión inicial
(máquina es cara)
Requiere un entrenamiento medio
Los
embriones
se
transfieren
directamente una vez descongelados,
salvo que se use glicerol
Toxicidad del medio:media
Vitrificación
Requiere dos medios: uno de
deshidratación y otro de vitrificación
en el que combinan dos o más
crioprotectores.
Curva rápida de alrededor de 15000
ºC /min
Es un método manual directamente
sumergiendo en N2 Líquido o
apoyando sobre una superficie a que
se encuentra a bajas temperaturas (200 º C)
Todo el procedimiento es manual
siendo una técnica rápida y práctica.
No requiere tanto capital. Si son caros
los medios y las pajuelas.
Requiere una entrenamiento medio a
alto
Con la técnica de la OPS se requiere
lavar para rehidratar al embrión una
vez desvitrificado antes de transferir.
Toxicidad del medio: alta