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 EL CANNABIDIOL TIENE EFECTOS ANTI CONVULSIVOS EN MODELOS DE ANIMALES DE LÓBULO TEMPORAL Y LAS CONVULSIONES PARCIALES REVISIÓN MCCR El Cannabis sativa ha sido asociado con efectos contradictorios sobre los estados de
convulsivos a pesar de su uso medicinal por numerosas personas con epilepsia.
Recientemente se ha demostrado que el cannabidiol fitocannabinoide (CDB) reduce la
severidad de las crisis y la letalidad en el bien establecido modelo in vivo de las crisis
generalizadas inducidas por pentilenotetrazol, lo que sugiere que antes, los ensayos
clínicos a pequeña escala que examinan los efectos del CDB en las personas con epilepsia
han renovado la atención. Aquí, se presentan los efectos del puro CDB (1, 10 y 100 mg / kg)
en otros dos modelos de incautación de roedores establecidos, el modelo de pilocarpina
aguda de convulsiones del lóbulo temporal y el modelo de la penicilina de convulsión
parcial. La actividad convulsiva fue video grabado y anotado sin conexión mediante escalas
de gravedad incautación específicas del modelo. En el modelo de pilocarpina CDB (todas
las dosis) redujo significativamente el porcentaje de animales que experimentan los
ataques más graves. En el modelo de la penicilina, el CDB (10 mg / kg) disminuyó
significativamente el porcentaje de mortalidad como resultado de las convulsiones; el CDB
(todas las dosis) también se redujo el porcentaje de animales que sufren las más graves
crisis tónico-clónicas. Estos resultados amplían el perfil anticonvulsivo del CDB; cuando se
combina con una ausencia informada de efectos psicoactivos, esta evidencia apoya
firmemente el CDB como candidato terapéutico para una diversa gama de epilepsias
humanas.
El CDB representa actualmente el candidato más prometedor fitocannabinoide para la
utilización clínica debido a sus propiedades no sicotrópicas, baja toxicidad y alta
tolerabilidad en los seres humanos y otras especies animales. El trabajo preclínico
temprano demostró que el CDB tiene propiedades anticonvulsivantes. En ratas, el CDB fue
un anti-convulsivo eficaz y relativamente potente en el electroshock máximo (MES) y
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Este documento es solo para fines educativos y uso no comercial. Más información en
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modelos de convulsiones audio génicas; hallazgos que compararon favorablemente con
los medicamentos antiepilépticos clínicamente usados empleados en el mismo estudio. En
los ratones, el pretratamiento de CDB impidió convulsiones tónicas causadas por
cualquiera de MES convulsiones, ácido g-aminobutírico (GABA) antagonistas o inhibidores
de la síntesis de GABA, además de proteger de forma fiable contra la letalidad inducida por
el ácido 3-mercaptoproprionic. En general, estos estudios convulsivos preclínicos
confirmaron el perfil anticonvulsivo del CDB y son consistentes con la afirmación de los
beneficios terapéuticos en las epilepsias humanas. Quince personas que sufren epilepsia
generalizada secundaria con enfoque lóbulo temporal que no respondían a los
tratamientos
prescritos
AED
fueron
reclutados. Cuatro de ocho de los que recibieron CDB en relación con sus
medicamentos antiepilépticos existentes se mantuvieron prácticamente sin convulsiones
durante el período de suplementación y el resto de este grupo de pacientes mostraron una
marcada mejoría en el control de convulsiones. Sorprendentemente, sin embargo, no se
han publicado ensayos clínicos adicionales que emplean CDB.
En general, nos demuestran las acciones anti-convulsivos de CDB, por primera vez en los
modelos de pilocarpina y penicilina agudos de lóbulo temporal y las crisis parciales,
respectivamente.
Estos
resultados
amplían
claramente
los
datos
previamente
publicados de otros modelos que apuntan al CDB ser de uso terapéutico potencial (solo o
como un complemento) en el tratamiento de las epilepsias in vivo. La investigación futura
que se requiere ahora para investigar los posibles efectos sinérgicos o aditivos de la CDB
sobre los FAE y establecer con mayor detalle este importante mecanismo de
fitocannabinoide anticonvulsiva (s) de acción.
RESUMEN El Cannabis sativa ha sido asociado con efectos contradictorios sobre los estados de
convulsivos a pesar de su uso medicinal por numerosas personas con epilepsia.
Recientemente hemos demostrado que el cannabidiol fitocannabinoide (CDB) reduce la
severidad de las crisis y la letalidad en el bien establecido modelo in vivo de las crisis
generalizadas inducidas por pentilenotetrazol, lo que sugiere que antes, los ensayos
clínicos a pequeña escala que examinan los efectos del CDB en las personas con epilepsia
han renovado la atención. Aquí, se presentan los efectos del puro CDB (1, 10 y 100 mg / kg)
en otros dos modelos de incautación de roedores establecidos, el modelo de pilocarpina
aguda de convulsiones del lóbulo temporal y el modelo de la penicilina de convulsión
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parcial. La actividad convulsiva fue video grabado y anotado sin conexión mediante escalas
de gravedad incautación específicas del modelo. En el modelo de pilocarpina CDB (todas
las dosis) redujo significativamente el porcentaje de animales que experimentan los
ataques más graves. En el modelo de la penicilina, el CDB (10 mg / kg) disminuyó
significativamente
el porcentaje de mortalidad como resultado de las convulsiones; el CDB (todas las dosis)
también se redujo el porcentaje de animales que sufren las más graves crisis tónicoclónicas. Estos resultados amplían el perfil anticonvulsivo del CDB; cuando se combina con
una ausencia informada de efectos psicoactivos, esta evidencia apoya firmemente el CDB
como candidato terapéutico para una diversa gama de epilepsias humanas.
INTRODUCCIÓN El Cannabis sativa tiene una larga historia de uso medicinal para el tratamiento de una
variedad de trastornos tales como el reumatismo, la inflamación crónica y el tratamiento
del dolor, además del control de las convulsiones. Más recientemente, el C. sativa ha sido
atribuido tanto a efectos pro-y anti-convulsivos a pesar de numerosas personas con
epilepsia continuar usando el C. sativa con fines medicinales para controlar las
convulsiones. Desde que el D9-tetrahidrocannabinol (D9-THC), se aisló el principal
constituyente psicoactivo del C. sativa, otros más de 60 fitocannabinoides también se han
identificado, aislado y demostrado poseer variada actividad farmacológica. Uno de estos
fitocannabinoide es el cannabidiol (CBD), normalmente el segundo fitocannabinoide más
prevalente en C. sativa, cuya estructura fue descrita por primera vez por Mechoulam y
Shvo. El CDB representa actualmente el candidato más prometedor fitocannabinoide para
la utilización clínica debido a sus propiedades no sicotrópicas, baja toxicidad y alta
tolerabilidad en los seres humanos y otras especies animales. El trabajo preclínico
temprano demostró que el CDB tiene propiedades anticonvulsivantes. En ratas, el CDB fue
un anti-convulsivo eficaz y relativamente potente en el electroshock máximo (MES) y
modelos de convulsiones audio génicas; hallazgos que compararon favorablemente con
los
medicamentos
antiepilépticos clínicamente usados empleados en el mismo estudio. En los ratones, el
pretratamiento de CDB impidió convulsiones tónicas causadas por cualquiera de MES
convulsiones, ácido g-aminobutírico (GABA) antagonistas o inhibidores de la síntesis de
GABA, además de proteger de forma fiable contra la letalidad inducida por el ácido 3mercaptoproprionic. En general, estos estudios convulsivos preclínicos confirmaron el
perfil anticonvulsivo del CDB y son consistentes con la afirmación de los beneficios
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terapéuticos en las epilepsias humanas. Quince personas que sufren epilepsia
generalizada secundaria con enfoque lóbulo temporal que no respondían a los
tratamientos prescritos AED fueron reclutados. Cuatro de ocho de los que recibieron CDB
en
relación
con
sus
medicamentos
antiepilépticos
existentes
se
mantuvieron
prácticamente sin convulsiones durante el período de suplementación y el resto de este
grupo de pacientes mostraron una marcada mejoría en el control de convulsiones.
Sorprendentemente, sin embargo, no se han publicado ensayos clínicos adicionales que
emplean CDB.
MATERIALES Y MÉTODOS ANIMALES Adultos ratas macho Wistar Kyoto (Harlan, Bicester, Reino Unido) se utilizaron en ambos
modelos de convulsiones y la prueba de rotarod se describe a continuación (modelo
acutepilocarpine de convulsiones del lóbulo temporal:> P21, 70-110 g; modelo de penicilina
de convulsión parcial:> P40, 250 -300 g; pruebas de la función de motor:> P28, a partir del
peso 110-140 g). Los animales se alojaron a temperatura ambiente en un 12: 12 h ciclo día
/ noche (luces encendidas a 0800) y se les dio acceso ad libitum a alimento y agua. En los
días previos a la inducción de convulsiones, los animales se habituaron a la manipulación,
procedimientos experimentales y el entorno de prueba. Todos los experimentos se
llevaron a cabo de acuerdo con las regulaciones UK Home Office.
ADMINISTRACIÓN CDB CDB penetra la barrera sangre-cerebro tal que 120 mg / kg entregados por vía
intraperitoneal en ratas Wistar Kyoto proporciona Cmax = 6,8 mg / g en Tmax = 120 min y,
a la misma dosis, no mayor toxicidad, genotoxicidad o mutagenicidad se ha observado
( comunicación personal con GW Pharmaceuticals Ltd .; Estudio Informe UNA-REP-02).
Antes de embargo o protocolos de la función motora, los animales recibieron (ip) 1, 10 o
100 mg / kg CDB en todos los experimentos de incautación o 50, 100 o 200 mg / kg del CDB
en las pruebas de función motora (GW Pharmaceuticals, Porton Down, Wiltshire, Reino
Unido ). El vehículo empleado fue de 1: 1: solución de etanol 18, Cremophor (Sigma-Aldrich,
Poole, Reino Unido) y 0,9% (w / v) de NaCl. En cada experimento, un grupo de animales que
recibieron dosis de volumen con ajuste de vehículo solo sirvió como control negativo.
PILOCARPINA AGUDA IN VIVO EN MODELO DE AT AQUE 2015
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La pilocarpina es un agonista de receptor de acetilcolina muscarínico que, después de la
administración sistémica, provoca focos epilépticos localizada en el sistema límbico
consistente con convulsiones del lóbulo temporal (N _ 14 para cada grupo). 15 min
después de la administración del vehículo o CDB, los animales fueron inyectados con la
metilescopolamina antagonista del receptor muscarínico (Sigma-Aldrich, Poole, Reino
Unido; 1 mg / kg; ip) para reducir al mínimo los efectos secundarios inducidos por
pilocarpina periféricos. 45 min más tarde, la pilocarpina (Sigma-Aldrich, Poole, Reino Unido;
380 mg / kg; ip) se administró para inducir convulsiones y comportamiento de los animales
se controló durante otros 60 min. Al término de los animales de experimentación de
procedimientos fueron sacrificados por inhalación de CO2.
EL ANÁLISIS ESTADÍSTICO Todos los procedimientos estadísticos se realizaron con SPSS 15.0.0 (SPSS Inc., Chicago, IL,
EE.UU.). Las diferencias entre los grupos para la media del número de ocurrencias de cada
estado incautación y valores de severidad de incautación mediana se evaluaron mediante
análisis unidireccional de la varianza (ANOVA) con un test post hoc de Tukey.
Las diferencias entre los grupos en el porcentaje de animales que permanecieron libres de
crisis, el porcentaje de animales que desarrollaron los estados convulsivos más severas y el
porcentaje de mortalidad se evaluaron mediante una prueba no paramétrica binomial. Las
diferencias entre los grupos para el desempeño rotarod se evaluaron mediante un ANOVA
de dos vías con ‘latencia’ y ‘run’ como factores. Las diferencias entre los grupos en las
proporciones de los animales que pasaron la viga estática se evaluaron mediante una
prueba no paramétrica binomial;diferencias en la media del número de footslips, distancia
recorrida, el tiempo que se tomen, la fuerza de agarre, y el tiempo en la pantalla inclinada
se evaluaron mediante ANOVA de una vía con test post hoc de Tukey. En todos los casos, P
_ 0.05 fue considerado significativo.
RESULTADOS MODELO DE PILOCARPINA AGUDA DE CONVULSIONES DEL LÓBULO TEMPORAL En el modelo de pilocarpina aguda, todas las dosis de CDB (1, 10 y 100 mg / kg) redujo
significativamente el porcentaje de animales que se manifiesta con clonus extremidad
anterior bilaterales con la crianza y la caída (puntuación de convulsión 4); una reducción
del 71% (animales recibieron vehículo) a 43% siguientes 1 mg / kg CDB (n = 14, P _ 0.05),
47% después de 10 mg / kg CDB (n = 15, P _ 0.05), y 29 % después de 100 mg / kg CDB (n =
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14, P _ 0.01). Sin embargo, a pesar de la reducción significativa en el número de animales
que presentan este estado convulsiones, ningún efecto significativo sobre la CDB número
medio de ocurrencias de cada animal de este estado fue visto en cualquier dosis (F 3,56 =
0,575, P = 0,634). Por lo tanto, aunque CDB disminuyó significativamente el porcentaje de
animales que presentan clonus bilaterales de las extremidades anteriores con la crianza y
la caída, que no disminuyó significativamente el número de ocurrencias.
MODELO DE PENICILINA DE CRISIS PARCIALES Un análisis de la gravedad de las convulsiones en los animales tratados con penicilina
reveló que los animales recibieron vehículo alcanzaron una puntuación mediana gravedad
de las convulsiones de 5 (convulsión tónico-clónicas sin control postural, la más grave en la
escala de puntuación), mientras que en los grupos que recibieron 10 ó 100 mg / kg CDB la
mediana se redujo a 4,5 (convulsión tónico-clónica mantener el control postural), debido al
mayor número de animales con convulsiones más moderados en comparación con el
grupo de vehículo, aunque esto no fue significativo (P> 0,1). Del mismo modo, ningún
efecto del tratamiento del CDB sobre la proporción de animales que permanecieron se
observó libres de crisis (P> 0,1). Sin embargo, el CDB tratamiento (_ 10 mg / kg) causó
reducciones significativas en el porcentaje de mortalidad de los animales que exhiben
convulsiones parciales inducida por penicilina (P _ 0,001 para ambas dosis). Si bien no se
observó efecto general de la gravedad, el porcentaje de animales que se desarrolló
convulsiones tónico-clónicas, conservando el control postural (convulsiones puntuación
4,5) fue significativamente menor por todas las dosis de la CDB; 94% de los animales
tratados con vehículo mostraron este comportamiento convulsiones; este se redujo a 76%
(P _ 0.05), 61% (P _ 0,001) y 59% (P _ 0.001) por tratamiento con 1, 10 y 100 mg / kg CDB
respectivamente. A pesar de la reducción en el número de animales que presentan
convulsiones tónico-clónicas con control postural retenido, el CDB no afectó el número
medio de ocurrencias de este estado (F 3,68 = 0,830, P> 0,1). Por lo tanto, a pesar de que el
porcentaje de animales que presentan este estado decreciente, los que alcanza este
estado después del tratamiento CDB exhibió el mismo número de ocurrencias como
animales vehicledosed.
PRUEBAS DE LA FUNCIÓN DE MOTOR En la prueba de rotarod de aceleración, el CDB (50, 100 o 200 mg / kg) no tuvo ningún
efecto sobre la latencia a caer cuando se compara con los animales recibieron vehículo (F
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3,99 = 0,568, P = 0,637). Además, no se encontraron diferencias significativas entre carreras
(F 2,33 = 1,378,P = 0,266) ni hubo interacción significativa entre el fármaco y ejecutar
encontraron (F 6,99 = 0,284, P = 0,943). El porcentaje de animales que atravesó con éxito la
viga estática no se vio afectada significativamente por el tratamiento del CDB (P> 0,1). Sin
embargo CDB tuvo un efecto significativo en el número medio de errores footslip que las
ratas de (F 3,79 = 2,915, P _ 0.05), que fue evidente sólo a 100 mg / kg CDB (P _ 0.05). El
efecto de la CDB sobre footslips sin embargo no tuvo un impacto significativo en el tiempo
medio necesario para los animales para atravesar el haz estática (vehículo: 11,8 _ 2,6 s; 50
mg / kg: 11.2 _ 2,9 s; 100 mg / kg: 1 9.1 _ 5,2 s ; 200 mg / kg: 9,8 _ 2,8 s; F 3,74 = 1,405, P>
0,1).
DISCUSIÓN En el presente estudio, se analizó el potencial anti-convulsivo de la CDB, la
fitocannabinoide no psicoactivo más frecuente encontrada en C. sativa, en los modelos de
lóbulo temporal y parciales. En el modelo de pilocarpina aguda, el CBD mostró efectos
anticonvulsivantes
modestos,
reduciendo
significativamente
la
incidencia
de
las
convulsiones más severas. Sin embargo, estos resultados no se reflejan en los efectos
sobre la mortalidad y la gravedad. Por el contrario, se observaron fuertes efectos
anticonvulsivos del CDB en el modelo de la penicilina de convulsión parcial. CDB redujo
significativamente la mortalidad y reduce significativamente el porcentaje de animales que
experimentan convulsiones tónico-clónicas, con y sin control de la posturamantenida. Por
otra parte, cuatro pruebas separadas de la función motora y la fuerza y el tono muscular
indicaron que el CDB ejerce sólo efectos limitados sobre la función motora. Por lo tanto,
aquí se demuestra el potencial del CDB como una novela AED en el lóbulo temporal y las
crisis parciales, que complementa investigaciones anteriores en otros modelos animales in
vivo.
MODELO DE PILOCARPINA AGUDA DE CONVULSIONES DEL LÓBULO TEMPORAL En el modelo de lóbulo temporal, se cree que el desarrollo de convulsiones inducidas por
pilocarpina-aguda ser dependiente de la activación del receptor de acetilcolina muscarínico
subtipo (mAChR) M1 desde M1R _ / _ ratones no desarrollan convulsiones en respuesta a la
pilocarpina.Sin embargo, una vez iniciado, el mantenimiento convulsión es dependiente de
N metil Activación aspartato D (NMDA), y antagonistas muscarínicos de acción
central (por ejemplo, atropina) logran abolir los ataques inducidos por pilocarpina. Aunque
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CDB no redujo la mortalidad en el modelo de pilocarpina aguda, esto podría ser una
consecuencia de la alta tasa de mortalidad, así informado asociada con este modelo que se
atribuye a una mayor probabilidad de insuficiencia respiratoria asociada con graves
estados convulsivos tónico-clónicas en comparación con otros modelos. Por otra parte,
cualquier depresión respiratoria podría oscurecer o confundir a los efectos del fármaco
potencialmente atenuantes sobre la mortalidad. Por el contrario, la falta de efectos del
CBD sobre otros parámetros también podría haber ocurrido como resultado de la CDB que
carece de actividad en contra de la iniciación de los ataques inducidos por pilocarpina, que
es a través de la activación M1 mAChR. Desde CDB redujo significativamente el número de
ocurrencias de las convulsions tónico-clónicas, pero no afectó el inicio de convulsiones, es
posible que los efectos anticonvulsivos del CDB mitigan mantenimiento NMDAR mediada,
pero no el inicio de los ataques inducidos por pilocarpina agudas mAchR mediada.
PRUEBAS DE LA FUNCIÓN DE MOTOR Aunque CDB ha sido previamente informado para ser desprovisto de efectos secundarios
de motor, hemos investigado los efectos del CDB sobre el rendimiento en una variedad de
tareas motoras. Con la excepción de un efecto de 100 mg / kg CDB sobre el número de
footslips como animales atravesaban un haz estática, no se observó ningún efecto del
tratamiento sobre la función motora CDB en este estudio. Footslips sobre el aparato haz
estática se ha informado de que se correlaciona con déficit en la coordinación
sensoriomotora, Sin embargo el efecto de 100 mg / kg CDB sobre footslips no afectó a la
capacidad de los animales para completar la prueba, o su velocidad en la viga, y no se
reflejó en un pobre rendimiento en el cilindro giratorio. CDB también tuvo ningún efecto
sobre la fuerza de agarre, que representa tanto la fuerza muscular y puede ser utilizado
como una medida de la neurotoxicidad funcional, o tono muscular según la evaluación de
la pantalla inclinada. Por lo tanto, hemos demostrado que el CDB tuvo efectos mínimos
sobre la función motora a dosis de hasta 200 mg / kg. En contraste, todos los AED licencia
para uso clínico en el Reino Unido causan efectos secundarios de motor significativa y
fuerte énfasis en la ventaja de CDB como un potencial anticonvulsivo clínico.
POTENCIAL TERAPÉUTICO Proponemos que el CDB ejerce un efecto anticonvulsivante acumulativa; esto se puede
conseguir por un perfil poli-farmacológica, con el CDB modular simultáneamente un
número de sistemas endógenos para atenuar y / o prevenir la hiperexcitabilidad neuronal
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epiléptico. Es importante destacar que, a pesar de numerosos objetivos potenciales, el CDB
tiene un excelente perfil de efectos secundarios, como se revela en esta investigación y
otros. Por otra parte, el CDB puede tener atractivos efectos sinérgicos o aditivos cuando se
co-administra con medicamentos antiepilépticos recetados actualmente, señalando que es
obligatorio
para
los
nuevos
agentes
terapéuticos
que
pueden
administrarse
conjuntamente en primer lugar con los FAE disponibles actualmente. Por lo tanto, el
tratamiento adyuvante CDB puede potencialmente tener efectos beneficiosos como un
anti-convulsivo,
así
como
la
disminución de la dosis necesaria, y por lo tanto los efectos secundarios indeseables de los
tratamientos actuales AED.
CONCLUSIONES En general, nos demuestran las acciones anti-convulsivos de CDB, por primera vez en los
modelos de pilocarpina y penicilina agudos de lóbulo temporal y las crisis parciales,
respectivamente. Estos resultados amplían claramente los datos previamente publicados
de otros modelos que apuntan al CDB ser de uso terapéutico potencial (solo o como un
complemento) en el tratamiento de las epilepsias in vivo. La investigación futura que se
requiere ahora para investigar los posibles efectos sinérgicos o aditivos de la CDB sobre los
FAE y establecer con mayor detalle este importante mecanismo de fitocannabinoide
anticonvulsiva (s) de acción.
INFORMACIÓN MCCRID: ARKMCCR-000OM
PUBMED ID: 22520455
PMCID: N/A
Nombre Original: Cannabidiol exerts anti-convulsant effects in animal models of temporal lobe and
partial seizures
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