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 EXTRACTOS CANNABIDIVARIN –RICOS DE CANNABIS SON ANTICONVULSIVANTE EN RATONES Y RATAS A TRAVÉS DE UN MECANISMO INDEPENDIENTE CON RECEPTORES CB1 REVISIÓN MCCR La epilepsia es la enfermedad neurológica más frecuente y se caracteriza por convulsiones
recurrentes. Aquí, investigamos los perfiles anticonvulsivos de sustancias farmacológicas
botánicas derivadas del cannabis (BDS) ricos en cannabidivarin (CBDV) y que contiene
cannabidiol (CBD) en aguda en modelos in vivo de convulsiones y la unión de CBDV SDE y
sus componentes en cannabinoide en receptores CB1.
Los perfiles anticonvulsivos de dos CBDV SDE (50-422 mg • kg – 1) se evaluaron en tres
modelos animales de convulsión aguda. CBDV purificada y CDB también fueron evaluados
en un estudio isobolográfico para evaluar posibles interacciones farmacológicas. Los
efectos CBDV SDE sobre la función motora también se investigaron mediante ensayos de
vigas y fuerza de prensión estática. La unión de CBDV SDE para receptores cannabinoides
CB1 se evaluó usando ensayos de unión de desplazamiento.
El CBDV SDE ejerce efectos anticonvulsivos significativos en el pentilentetrazol (≥ 100 mg •
kg – 1) y modelos de convulsiones audiogénicas (≥ 87 mg • kg – 1), y convulsiones inducidas
por pilocarpina suprimidas (≥ 100 mg • kg – 1). El estudio reveló que los efectos
anticonvulsivos del CBDV purificado y CDB fueron aditivos linealmente cuando se
administran. Se observaron algunos efectos motores de CBDV SDE en el rendimiento de
haz estática; no se encontraron efectos en la fuerza de agarre. El Δ 9-tetrahidrocannabinol
y Δ 9-tetrahydrocannabivarin contenido de CBDV BDS representaban su mayor afinidad
por los receptores cannabinoides CB1 que purifica CBDV. En conclusión, estos resultados
demuestran una fuerte acción anticonvulsiva independiente del receptor de ambos
modificados y no modificados CBDV SDE en tres modelos de convulsiones, a través de dos
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especies. Si bien el CBDV BDS no modificado afecto negativamente el rendimiento en una
tarea de la función motora, esto fue en marcado contraste con el CBDV BDS modificado
que fue bien tolerado a dosis anticonvulsivas. Esto indica que el CBDV SDE tanto
modificado y no modificado tiene potencial para tratar convulsiones del lóbulo
generalizadas o temporales con el modificado CBDV BDS siendo mejor tolerado.
RESUMEN ANTECEDENTES La epilepsia es la enfermedad neurológica más frecuente y se caracteriza por convulsiones
recurrentes. Aquí, investigamos los perfiles anticonvulsivos de sustancias farmacológicas
botánicas derivadas del cannabis (BDS) ricos en cannabidivarin (CBDV) y que contiene
cannabidiol (CBD) en aguda EN modelos IN VIVO de convulsiones y la unión de CBDV SDE y
sus componentes en cannabinoide en receptores CB1.
APROXIMACIÓN EXPERIMENTAL Los perfiles anticonvulsivos de dos CBDV SDE (50-422 mg · kg – 1) se evaluaron en tres
modelos animales de convulsión aguda. CBDV purificada y CDB también fueron evaluados
en un estudio isobolográfico para evaluar posibles interacciones farmacológicas. Los
efectos CBDV SDE sobre la función motora también se investigaron mediante ensayos de
vigas y fuerza de prensión estática. La unión de CBDV SDE para receptores cannabinoides
CB1 se evaluó usando ensayos de unión de desplazamiento.
RESULTADOS CLAVE El CBDV SDE ejerce efectos anticonvulsivos significativos en el pentilentetrazol (≥ 100 mg ·
kg – 1) y modelos de convulsiones audiogénicas (≥ 87 mg · kg – 1), y convulsiones inducidas
por pilocarpina suprimidas (≥ 100 mg · kg – 1). El estudio reveló que los efectos
anticonvulsivos del CBDV purificado y CDB fueron aditivos linealmente cuando se
administran. Se observaron algunos efectos motores de CBDV SDE en el rendimiento de
haz estática; no se encontraron efectos en la fuerza de agarre. El Δ 9-tetrahidrocannabinol
y Δ 9-tetrahydrocannabivarin contenido de CBDV BDS representaban su mayor afinidad
por los receptores cannabinoides CB1 que purifica CBDV.
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CONCLUSIONES E IMPLICACIONES El CBDV SDE ejerce efectos anticonvulsivos significativos en tres modelos de convulsión
que no fueron mediados por el receptor de cannabinoides CB1 y eran de una eficacia
comparable con CBDV purificada. Estos resultados apoyan firmemente el desarrollo clínico
adicional de CBDV SDE para el tratamiento de la epilepsia.
INTRODUCCIÓN La epilepsia es un trastorno neurológico crónico caracterizado por convulsiones
recurrentes, que afecta aproximadamente a 50 millones de personas en todo el mundo
(Leonardi y Ustun, 2002). Comorbilidades de epilepsia incluyen deterioro cognitivo,
trastornos depresivos y la esquizofrenia (Hermann et al, 2000;.. Kanner et al, 2012) (.
Perucca et al, 2000), que se ve agravada por las convulsiones mal controladas,. Hay muchos
tratamientos disponibles (BNF 2011); Sin embargo, todos tienen efectos secundarios
notables (Ortinski y Meador, 2004; Schachter, 2007) (. Hitiris et al, 2007) y ~ 30% de los
casos permanecen farmacorresistente, que provoca convulsiones mal controladas. Esto
representa
una
importante
necesidad
clínica
insatisfecha
de
nuevos
fármacos
antiepilépticos bien tolerados (FAE) capaces de controlar las epilepsias farmacorresistentes
previamente. Por lo tanto, extendemos nuestras investigaciones previas de los efectos
anticonvulsivos de CBDV y CDB (Jones et al, 2010;. 2012;. Hill et al, 2012a) para evaluar el
potencial anticonvulsivo de extractos ricos en CBDV y el CDB [‘sustancias de drogas
botánicas’ (SDE)]. Aquí, probamos dos de estos extractos: uno con farmacológicamente
significativas (.. JARBE et al, 2002; Hill et al, 2010) Δ 9-THC y Δ 9-tetrahydrocannabivarin
(THCV) contenido (‘sin modificar CBDV BDS’) y otro con Δ 9-THC y Δ 9 -THCV removidos
(‘modificado CBDV BDS’). Esto permite la evaluación de los efectos de Δ 9-THC y Δ 9-THCV
sobre los perfiles de anticonvulsivantes y tolerabilidad de los compuestos; tanto Δ 9-THC y
Δ 9 -THCV pueden ser anticonvulsivante en su propio derecho (Corcoran et al, 1973;. Fried y
McIntyre, 1973; Wallace et al, 2001;. 2003;. Hill et al, 2010), aunque hay son también
algunos informes de que Δ 9-THC puede proconvulsivante Aquí, por primera vez,
demostramos acciones anticonvulsivantes significativos de CBDV SDE en la rata y el ratón
en los modelos de convulsiones vivo. Investigación de las interacciones entre los
constituyentes
principales PCB indica que el CDB y CBDV acto aditiva para suprimir las convulsiones. En
los ensayos de motor, mientras que sin modificar CBDV BDS afectado negativamente el
equilibrio y la coordinación en todas las dosis, los efectos limitados solamente se ven en la
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dosis más alta de modificación CBDV BDS; ni CBDV BDS causado déficits en la fuerza de
agarre de la extremidad anterior. La unión del radioligando indicó que el contenido Δ 9THC / Δ 9 -THCV de la no modificada CBDV BDS fue responsable de la mayoría de los
receptores CB 1 cannabinoide vinculante; experimentos de comportamiento paralelo
demostraron que no eran necesarios para efectos anticonvulsivos.
MÉTODOS ANIMALES Todos los animales se alojaron en un ciclo de luz-oscuridad de 12 h, con comida y agua
disponible ad libitum. Se llevaron a cabo en la Universidad de Reading; Los estudios que
utilizan ratas Wistar Kyoto macho (Harlan, Bicester, Reino Unido 70-110 g). Ratón
membranas del cerebro en conjunto para estudios de unión (Universidad de Aberdeen) se
obtuvieron de adultos (25-40 g) ratones machos MF1 (Harlan, Blackthorn, Reino Unido). En
ambos casos, el trabajo se llevó a cabo de conformidad con los Animales (Procedimientos
Científicos) Ley de 1986 experimentos Audiogenic convulsivos utilizados ratones DBA / 2
(10 a 14 g, 3-4 semanas de edad; Elevage Janvier, Le Genest-Saint-Isle, Francia), fueron
diseñados y analizados por los autores, e interpretada por Porsolt Research Laboratory (Le
Genest-Saint-Isle, Francia), de conformidad con la legislación francesa bajo licencia del
Ministerio francés de Agricultura y Pesca. Todo animal de trabajo se llevó a cabo de
conformidad con las directrices llegar para experimentos de informes relacionados con los
animales (Kilkenny et al, 2010;. McGrath et al, 2010.);595 ratas y 290 ratones fueron
utilizados para los estudios in vivo en total.
LA ADMINISTRACIÓN DEL FÁRMACO Los animales recibieron ya sea derivado de cannabis-CBDV SDE o PCB purificados. PCB (10200 mg · kg – 1) y CBDV SDE derivados del cannabis (50 a 422 mg · kg – 1; GW
Pharmaceuticals Ltd, Salisbury, Reino Unido); se suspendieron en etanol, Cremophor EL y
solución salina [0,9% (w / v) de NaCl, 2: 1: 17, respectivamente; todos de SigmaAldrich,
Poole, Reino Unido]; administrado mediante inyección ip 1 h antes de los procedimientos
experimentales para lograr cerebro T max (Deiana et al., 2012). Cada experimento contenía
un grupo de control que recibió vehículo, a la que se compararon otros grupos.
En experimentos de convulsiones, tamaño de los grupos fueron n = 10 para los ratones y n
= 15 para las ratas. Sin modificar CBDV BDS contenía 47,4% CBDV, 13.9% CBD, 1% Δ 9-THC
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y 2,5% Δ 9 -THCV; modificado CBDV BDS carecía de Δ 9-THC / Δ 9 -THCV y contenía 57,8% y
el 13,7% CBDV CDB; contenido restante compone de materia vegetal. A BDS CBDV con más
contenido del PCB (denominado BDS-PCB) no contenía Δ 9 -THCV / Δ 9-THC y 4,3% y 0,1%
CBDV CDB.
EXPERIMENTOS CONVULSIVOS RATA Pentilentetrazol (PTZ; 85 mg · kg – 1; Experimentos 1.1 a 1.4 y 2.1) o pilocarpina (380 mg ·
kg – 1; experimentos 4.1 y 4.2) se administró ip 1 h después de PCB / CBDV BDS
tratamiento / vehículo en un 0,9% ( w / v) de NaCl. Metilescopolamina [1 mg · kg – 1; en
0,9% (w / v) de NaCl] se administró ip 45 minutos antes de la pilocarpina para minimizar los
efectos periféricos de la pilocarpina. Convulsiones audiogénicas en ratones DBA / 2 ratones
fueron colocados individualmente en un frasco de plexiglás (40 cm de ancho, 35 cm de
alto) que contiene un timbre eléctrico que sonó durante un máximo de 60 s (110-120 dB)
para inducir la actividad convulsiva (Running Wild, convulsiones clónicas y convulsiones
tónico- ), la cual fue registrada por técnicos experimentados durante los experimentos.
Diseño experimental y el análisis isobolográfico determina si dos compuestos que
ejercen (por ejemplo, anticonvulsivos) efectos farmacológicos similares se comportan
de forma sinérgica, aditiva o antagonista cuando se coadministra (Tallarida, 2006). Aquí,
este enfoque se aplicó mediante el modelo de ataque audiogénico para investigar las
interacciones farmacológicas entre el CDB y CBDV. Inicialmente, purificado CBDV y CDB
(cada 10 a 200 mg · kg – 1, ip) se administraron por separado y sus relaciones dosisrespuesta (DRR) calcula para la protección contra el desarrollo de las convulsiones clónicas
(experimento 3.3). CBDV y CDB fueron co-administrados en 1: relaciones de tamaño 1 del
efecto (10 tamaños del efecto igualmente separadas, ED 10 -ED 100) calculada a partir de
los DRR previamente calculados (Experimento 3.4). A partir de entonces, se utilizaron los
DRR individual de cada PCB para crear isobolos describen líneas teóricas de aditividad en
múltiples tamaños del efecto (por ejemplo, ED 30, ED 50) para los dos compuestos en
combinación. Por último, los tamaños del efecto experimentales obtenidos en el estudio
co-administración se compararon estadísticamente con la línea teórica de aditividad en
isobolos deconformidad con el método isobolográfico para los agonistas completos
descritos por Tallarida.
ENSAYOS DE MOTOR 2015
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Transmitir tareas estáticas y fuerza de agarre se utilizaron como se describe en Jones et al.
(2012) para evaluar la función motora después de la administración de no modificada
CBDV BDS (150, 275 o 422 mg · kg – 1, ip), modificado CBDV BDS (150, 275 o 346 mg · kg – 1,
ip) o vehículo CBDV BDS ( control). Orden de tratamiento fue al azar, y cada animal (n = 10)
recibió todos los tratamientos durante el estudio con un mínimo de 48 h entre cada
tratamiento.
ENSAYO DE DESPLAZAMIENTO DE RADIOLIGANDO Los ensayos se llevaron a cabo en tampón Tris-unión (Tris-HCl 50 mM, 50 mM Trisbase,
0,1% de BSA, pH 7,4), volumen de ensayo total de 500 μ L, usando el procedimiento de
filtración descrito por Ross et al. (1999). La unión se inició mediante la adición de
membranas de cerebro de ratón (33 μ g de proteína por pocillo) o HCB 1 - CHO
membranas celulares (50 μ g de proteína por pocillo). Todos los ensayos se realizaron a
37 ° C durante 60 minutos antes de la terminación de la adición de hielo frío Tris-tampón
de unión y filtración al vacío utilizando un colector bien muestreo 24 (Brandel Cell
Harvester; Brandel Inc., Gaithersburg, MD, EE.UU.) y Brandel GF / filtros B que habían sido
empapados en tampón de lavado a 4 ° C durante al menos 24 h. Cada pocillo de reacción
se lavó seis veces con tampón Tris-unión (1,2 ml). Los filtros se secaron al horno durante 60
minutos y se colocaron en 5 ml de líquido de centelleo (Ultima Gold XR, PerkinElmer, Seer
Green,
Buckinghamshire,
Reino
Unido).
La
radiactividad se cuantificó por espectrometría de centelleo líquido. La unión específica se
define por la presencia y ausencia de 1 μ M CP55940 no marcado. La concentración de
CP55940 [3 H] utilizado en nuestros ensayos de desplazamiento fue de 0,7 nM. Todo CBDV
SDE y CBDV se almacenaron como soluciones madre (10 mM) en dimetilsulfóxido (DMSO);
la concentración del vehículo en todos los pocillos de ensayo fue de 0,1% de DMSO. [3 H]
CP55940 parámetros de unión eran 2,336 fmol · mg – (. Thomas et al, 2004) 1 (B max) y 2,31
nM (Kd) en membranas de cerebro de ratón, y 57,0 pmol mg · – 1 (B max) y 1,1 nM (Kd)
para CB humana 1 células CHO.
LOS ANÁLISIS ESTADÍSTICOS Los procedimientos estadísticos se realizaron utilizando GraphPad Prism 5 (GraphPad
Software, Inc., San Diego, CA, EE.UU.). Efectos sobre la severidad de las crisis fueron
analizadas por Kruskal-Wallis con post hoc de Mann-Whitney U-pruebas. Parámetros
reportados como porcentajes se analizaron mediante pruebas de chi-cuadrado con post
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hoc prueba exacta de Fisher. La temperatura del cuerpo se analizaron utilizando la prueba
t de Student. La fuerza de agarre, la distancia recorrida y el pie se desliza / parámetros
metros en ensayos de motor se analizaron mediante ANOVA de una vía con post hoc de
Tukey pruebas, realizadas en los promedios diarios de cada animal. Isobolos fueron
analizados mediante la comparación de las coordenadas cartesianas para el resultado
experimental con los de los dos puntos de la línea teórica de aditividad. La coordenada x se
calculó mediante el establecimiento de la coordenada y del valor experimental y
despejando x en la línea de aditividad, y viceversa para la coordenada y. Las tres
coordenadas se compararon mediante una prueba de ji cuadrado. Valores de ensayo de
unión se expresan como media y la variabilidad como SEM o como el 95% límites de
confianza.
Las
concentraciones
de
compuestos
de
ensayo
que
producen
un
desplazamiento del 50% del radioligando de sitios de unión específicos (valores de CI50) se
determinaron, y los valores correspondientes de K i se calcularon utilizando la ecuación de
Cheng y Prusoff (1973). Todos nomenclatura canal del receptor y de iones se ajusta a
Alexander et al. (2011).
RESULTADOS EFECTOS DE LA MODIFICACIÓN CBDV BDS Y LOS MANDANTES SOBRE LOS ATAQUES INDUCIDOS PTZ EN RATAS Inicialmente, se investigaron los efectos de la modificación CBDV BDS (que no contienen Δ
9 -THCV o Δ 9-THC, Tabla 1) en crisis inducidas por PTZ en experimentos 01.01 a 01.04. La
dosis más alta CBDV BDS modificado se selecciona para contener la dosis anticonvulsivo
más eficaz de CBDV purificada probado hasta la fecha (200 mg · kg – 1; Hill et al, 2012a.). En
el experimento 1.1, modificado CBDV BDS tuvo un efecto anticonvulsivo significativo en la
severidad de las crisis (U = 13.84, P ≤ 0,05; Figura 1A); 200 y 275 mg · kg – 1 suprimió
significativamente la gravedad observada (P ≤ 0,05). Mortalidad Seizureassociated también
se vio afectada por la administración modificado CBDV BDS [χ 2 (5) = 29.97, P ≤ 0,01; Figura
1B]; ≥ 200 mg · kg – 1 redujo significativamente la mortalidad (P ≤ 0,05). Por último,
comparamos los efectos anticonvulsivos de modificación CBDV BDS con los de CBDV
purificada en el experimento 1.2. Administración de CBDV purificada o modificado CBDV
BDS, acompañado de peso absoluto, afectó significativamente la severidad de las crisis
observadas (U = 12.72, P ≤ 0,05; Figura 1C);tanto ≥ 50 mg · kg – 1 de purificado CBDV (P ≤
0,05) y 100 mg · kg – 1 (P ≤ 0,01) de CBDV BDS severidad de las crisis suprimida
significativamente modificada; adicionalmente, 200 mg · kg – 1 de modificado CBDV BDS
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produjo una fuerte tendencia (P ≤ 0,1) hacia la supresión severidad de las crisis. La
mortalidad también se redujo significativamente por purificado CBDV y modificado CBDV
BDS [χ 2 (6) = 21.05, P ≤ 0,01; Figura 1D], con reducciones significativas causadas por la
administración de ≥ 100 mg · kg – 1 (P ≤ 0,01) de ninguna de estas sustancias.
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EFECTOS DE CBDV SDE SOBRE CONVULSIONES INDUCIDAS POR PILOCARPINA EN RATAS Ambos modificados y no modificados CBDV SDE fueron investigados en el modelo de
pilocarpina de agudos, convulsiones del lóbulo temporal (Experimentos 4.1 y 4.2, Tabla 1).
En el experimento 4.1, sin modificar CBDV BDS afectó significativamente la severidad
convulsión (U =13.15, P ≤ 0,01; Figura 4A); ≥ 100 mg · kg – 1 redujo significativamente la
severidad (P ≥ 0,05). No se observó ningún efecto sobre la mortalidad (datos no mostrados).
En el Experimento 4.2, utilizando la dosis a la que no modificada CBDV BDS ejerce su efecto
anticonvulsivante óptimo (200 mg · kg – 1, véase la figura 4A), los efectos de la modificados
y no modificados CBDV SDE y coadministrarse PCB purificados se combina con dosis de
BDV y CDB se compararon. Severidad convulsión El tratamiento farmacológico afectada
significativamente (U = 10.64, P ≤0,05; Figura 4A); sin modificar CBDV BDS (P ≤ 0,05) y PCB
purificados (P ≤ 0,001) redujeron la severidad, y modificado CBDV BDS producen una
tendencia a la reducción de la gravedad (P ≤ 0,1). La administración del fármaco produjo
una tendencia hacia una reducción de la mortalidad [χ 2 (3) = 6,67, P ≤ 0,1], donde no
modificada CBDV BDS reduce la mortalidad.
ENSAYOS DE UNIÓN DE RADIOLIGANDO En primer lugar, se realizaron ensayos de unión para comparar los perfiles farmacológicos
de modificar CBDV BDS con purificada CBDV desplazamiento. Sin modificar CBDV BDS
mostró mayor afinidad por los receptores cannabinoides CB1 que purifica CBDV tanto en
cerebro MF1 ratón y HCB 1 -CHO membranas celulares; CBDV purificada sólo desplaza [3
H] CP55940 en la concentración más alta probada (10 μ M). A continuación, para investigar
la mayor afinidad de no modificada CBDV BDS sobre CBDV purificada por los receptores de
cannabinoides CB 1, los ensayos de unión de desplazamiento utilizando MF1 membranas
del cerebro en conjunto se realizaron con no modificada CBDV BDS en paralelo con el
CBDV BDS modificado. Curiosamente, la eliminación de Δ 9-THC y Δ 9 -THCV no afectó
significativamente la potencia con la que modificado CBDV BDS desplazados [3 H] CP55940.
Sin embargo, el desplazamiento medio, a las concentraciones más altas ensayadas (1 y 10
μ M), se redujo significativamente por esta eliminación (P <0,05) (Figura 5C y Tabla 2). A fin
de evaluar la contribución de Δ 9-THC más Δ 9 -THCV a la potencia con la que CBDV BDS
desplazados [3H] CP55940 no modificada, hemos probado sin modificar CBDV BDS en
paralelo con BDS-PCB a la que un PCB (CBDV, Δ 9 -THCV o Δ 9-THC) se había añadido. La
concentración porcentaje resultante de la PCB añadido era el mismo que el porcentaje de
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concentración de PCB en este sin modificar CBDV BDS. Curiosamente, encontramos que
BDS-PCB + CBDV purificada desplazadas [3H] CP55940 con mucho menos potencia que sin
modificar CBDV BDS. La adición de Δ 9 -THCV a BDS-PCB resultó en este SDE desplazar [3H]
CP55940 con ligeramente, pero no significativamente, menos potencia que no modificada
CBDV BDS. La adición de Δ9-THC no tuvo un efecto estadísticamente significativo en la
potencia o el porcentaje máximo de desplazamiento con la que sin modificar CBDV BDS
desplazados [3H] CP55940 de membranas de cerebro de ratón. Tomados en conjunto,
estos resultados sugieren que tanto Δ 9-THC y Δ 9 -THCV juntos en las cuentas CBDV de
SDE no modificados por su capacidad para desplazar [3H] CP55940 con mayor potencia
que CBDV purificada a partir de sitios de unión específicos en las membranas de ambos
MF1 toda cerebro humano y CB 1 -CHO células.
DISCUSIÓN Aquí, por primera vez, hemos demostrado que los extractos de cannabis ricas en CBDV y
CDB pueden ejercer efectos anticonvulsivos significativos. Es importante señalar que se
observaron estos efectos en tres modelos diferentes de convulsiones en dos especies.
Tanto el modificado y el no modificado CBDV SDE tenido eficacias muy similares a
purificado CBDV así como CBDV y el CDB en combinación. A partir de entonces, se
determinó que CBDV y CDB actúan juntos de manera aditiva contra ataques audiogénicos.
Aunque la presencia de Δ 9-THC y Δ 9 -THCV en los extractos no afectó perfil anticonvulsivo,
su presencia afecta adversamente la función motora y fue responsable para el
desplazamiento de los ligandos del receptor CB 1 de cannabinoides en ensayos de unión
de radioligando. Además, este es el primer estudio para examinar la unión CBDV en el CB 1
receptor cannabinoide donde se encontró afinidad a ser muy limitado.
CANNABINOIDES Y NO CANNABINOIDES INTERACCIONES EN BDS Se han reportado SDE basados en cannabis poseer diferente actividad farmacológica a su
constituyente principal de PCB, donde la presencia de los no principales PCB y PCBfracción
libre puede aumentar o disminuir la actividad en algunos ensayos in vitro (De Petrocellis et
al., 2011 ). Teniendo en cuenta este conocimiento a priori y por los resultados obtenidos de
las comparaciones de CBDV BDS y efectos PCB purificados en modelos de convulsiones
sugirieron posibles ventajas de CBDV SDE, que también investigó las acciones e
interacciones de la PCB y componentes PCB-libres de CBDV SDE. Es importante destacar
que hemos demostrado que el BDS-PCB ejerció ningún efecto significativo sobre la
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severidad de las crisis en el modelo PTZ de convulsión. Con el fin de investigar las
interacciones entre CBDV y el CDB, empleamos el modelo de ataque audiogénico ratón.
Antes del estudio isobolográfico, se confirmó un efecto anticonvulsivo dependiente de la
dosis del modificado y no modificado CBDV SDE en el modelo audiogénico comparable a la
de PTZ. Una temperatura central por debajo de 34,5 ° C en ratones DBA / 2 puede reducir
la incidencia de convulsiones en el modelo audiogénico (Essman y Sudak, 1964); Sin
embargo, las reducciones significativas en la gravedad de las convulsiones se observaron
en animales con temperaturas corporales superiores a este umbral, lo que indica que
efectos anticonvulsivos no se debieron principalmente a la hipotermia. Usando el diseño
del estudio isobolográfico, hemos demostrado un efecto anticonvulsivo aditivo de CBDV
purificada y CDB coadministración; no se observaron efectos nocivos de co-administración
de estos PCB.
CB 1 CANNABINOIDE LA UNIÓN AL RECEPTOR DE CBDV SDE En MF1 ratón membranas del cerebro en conjunto, encontramos que sin modificar CBDV
BDS mostró una mayor afinidad por los receptores cannabinoides CB1 que purifica CBDV,
con una media de K i y valores máximos de desplazamiento porcentaje no
significativamente diferentes de los obtenidos utilizando células CHO que sobre expresan
el receptor CB 1 cannabinoide humano . CBDV purificada tenía poca afinidad por los
receptores de cannabinoides CB 1, con sólo la concentración más alta probada (10 μ M)
que presenta un efecto. Nuestros resultados sugieren que la mayor potencia sin modificar
CBDV del BDS es debido a su capacidad para unirse a receptores CB 1, y no otros GPCRs
presentes en el cerebro. Sin modificar CBDV BDS contiene un porcentaje significativo de la
CDB, Δ 9-THC y Δ 9 -THCV. Aunque nosotros y otros han informado de que el CDB se une a
los receptores CB 1 con sólo una afinidad muy débil (valores de Ki en el rango micromolar;
Pertwee, 2008), tanto -THCV son potentes ligandos del receptor CB 1 cannabinoides Δ 9THC y Δ 9 (media de los valores de Ki en el rango nanomolar; Pertwee, 2008).
Curiosamente, se encontró que (i) aunque la afinidad de CBDV BDS modificado no se vio
afectada significativamente por la eliminación de Δ 9-THC y Δ 9 -THCV, su desplazamiento
máximo porcentaje fue significativamente menor que la de sin modificar CBDV BDS; (Ii) la
adición de Δ 9-THC o Δ 9 -THCV al BDS-PCB no tuvo un efecto estadísticamente significativo
sobre la capacidad de este BDS para desplazar [3H] CP55940 de membranas de cerebro de
ratón en comparación con no modificada CBDV-BDS. En contraste (Figura 5D),
los DDL-PCB plus mezcla CBDV desplazadas [3H] CP55940 con mucho menos potencia que
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no modificadas CBDV-BDS, y es coherente con nuestra conclusión de que purifica CBDV se
une a los receptores cannabinoides CB1 con sólo muy débil afinidad (efecto limitado y no
era meseta alcanzado en la concentración más alta ensayada). Juntos, estos resultados in
vitro sugieren que la presencia de tanto Δ 9-THC y Δ 9 –THCV cuentas para la capacidad de
modificar CBDV BDS para desplazar [3H] CP55940 con mayor afinidad que CBDV purificado.
Además, como modificados y no modificados CBDV BDS mostrar una acción anticonvulsiva
similares in vivo, los datos de unión sugieren que el mecanismo de la acción anticonvulsiva
de la CBDV SDE no se CB de receptor cannabinoide 1 mediada. A pesar CDB inhibir la
función de los canales iónicos (por ejemplo, de tipo T Ca 2 + canales; Ross et al., 2008) y el
aumento de la actividad inhibitoria en algunos GPCR (por ejemplo, 5-HT 1A;. Russo et al,
2005),
la
diana
molecular específica ( s) subyacente a efectos anticonvulsivos de la CDB permanecen.
CONCLUSIONES En
conclusión,
estos
resultados
demuestran
una
fuerte
acción
anticonvulsiva
independiente del receptor de ambos modificados y no modificados CBDV SDE en tres
modelos de convulsiones, a través de dos especies. Si bien el CBDV BDS no modificado
afecto negativamente el rendimiento en una tarea de la función motora, esto fue en
marcado contraste con el CBDV BDS modificado que fue bien tolerado a dosis
anticonvulsivas. Esto indica que el CBDV SDE tanto modificado y no modificado tiene
potencial para tratar convulsiones del lóbulo generalizadas o temporales con el modificado
CBDV BDS siendo mejor tolerado.
INFORMACIÓN MCCRID: ARKMCCR-000M1
PUBMED ID: 23902406
PMCID: PMC3792005
Nombre Original: Cannabidivarin-rich cannabis extracts are anticonvulsant in mouse and at
via a CB1 receptor-independent mechanism
2015
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