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ANÁLISIS CLÍNICOS GENERALES 3 BACTERIOLOGÍA CARACTERÍSTICAS GENERALES Y CLASIFICACIÓN DE LAS BACTERIAS Definición de bacterias: Las bacterias son diminutos organismos microscópicos, vegetales y unicelulares que difieren de las plantas superiores por su carencia de clorofila y que se reproducen por fisión binaria. Se encuentran en gran profusión en el suelo, el aire, el agua y la leche, en la superficie de las frutas y los vegetales y en diversas partes del cuerpo, tales como el conducto alimenticio, la piel, etc. Se ha clasificado a las bacterias de la siguiente manera: 1. Autotróficas que viven sobre materia inorgánica 2. Heterotróficas que viven sobre la materia orgánica (a) Parásitas, aquellas que requieren materia orgánica viva para su desarrollo. Entre estas quedan incluidas las patógenas, las cuales tienen una acción dañina sobre el animal o vegetal (huésped) en el que viven. (b) Saprofitas, las que viven sobre materia orgánica muerta. Agrupamiento morfológico general de las bacterias: Por su forma las bacterias se clasifican en tres grupos principales: a) bacilos u organismos en forma de bastón b) cocos, en forma redonda o esférica c) espirilos, organismos en forma de coma o espiral móviles. Bacterias gram-positivas esporulantes anaerobias estrictas Género Clostridium. Bacterias anaerobias estrictas, pueden ser patógenas por: Producción de toxinas (C. tetanii, C. botulinum) Destrucción de tejidos (C. perfringens) Son los agentes causantes de la «putrefacción de la carne» (descomposición anaerobia de las proteínas). Importancia de las bacterias del género Clostridium en la tecnología de alimentos. Agentes responsables de intoxicaciones alimentarias agudas C. botulinum: intoxicación por neurotoxina termosensible C. perfringens: intoxicación por toxina acumulada debido a tratamiento defectuoso de alimentos. Q.F.B. Dinora Bernal Iribe 11 ANÁLISIS CLÍNICOS GENERALES Bacterias Gram-negativas anaerobias facultativas 1.- Características principales del grupo Bacilos cortos y cocobacilos Gram-negativos Presentan, por lo general, muy pocos requerimientos nutricionales y son capaces de sobrevivir en medios relativamente simples Anaerobios facultativos Hábitats: comprende bacterias Bacterias intestinales: grupo entérico: Bacterias de agua o ambientes exteriores: bacterias anaerobias facultativas capaces de colonizar ambientes intestinales en situaciones patológicas. 2.- Subdivisión del grupo entérico Grupo entérico: Bacterias intestinales: Grupo de Escherichia-Salmonella-Shigella Habitantes habituales comensales de los intestinos de animales superiores, reptiles, pájaros y, ocasionalmente, insectos; aunque no son las bacterias predominantes en estos hábitats. Se incluyen especies intestinales y patógenas responsables de los brotes epidémicos transmitidos a través de los alimentos Escherichia coli Habitante habitual en individuos sanos, no patógena aunque puede haber cepas que causan problemas intestinales serios (mortalidad infantil) Salmonella Vinculada a procesos patológicos Tres divisiones dependiendo de su relación con los animales superiores: Bacterias que infectan sólo a humanos (S. typhi y S. paratyphi) Bacterias adaptadas a un huésped animal (S. gallinarum, S. abortus-equi, S. abortus-ovis, S. cholerasuis) Q.F.B. Dinora Bernal Iribe 12 ANÁLISIS CLÍNICOS GENERALES Bacterias que no presentan preferencia de huésped y son patógenas tanto para hombres como para animales. Shigella vinculadas a procesos patológicos intestinales serias (disentería bacilar). Bacterias no-entéricas relacionadas con el grupo entérico: bacterias cuyo hábitat natural es el agua o el suelo pero que ocasionalmente pueden encontrarse en ambientes intestinales. Microorganismos Gram-negativos aerobios 1.- Características generales del grupo de Pseudomonas Las bacterias del grupo al que pertenecen Pseudomonas está constituido por microorganismos Gram-negativos, siempre móviles con flagelación polar. Se encuentran normalmente en el suelo, aunque pueden ser patógenos oportunistas en animales (Ps. aeruginosa) y patógenos de plantas (Ps. syringae). 2.- Grupos de bacterias del género Pseudomonas El grupo de bacterias relacionadas con el género Pseudomonas es muy amplio y comprende especies patógenas para humanos Pseudomonas cepacia (patógeno oportunista que puede causar infecciones muy serias con alta tasa de mortalidad, especialmente han aumentado los datos de infecciones producidas en los pulmones de pacientes con fibrosis cística) y Ps. aeruginosa. Son capaces de oxidar alcoholes y tienen importancia industrial en la fabricación de vinagre. Las patologías asociadas a Pseudomonas suelen presentarse en animales afectados por algún tipo de disminución, permanente o transitoria, del sistema de defensa inmune. Por esto, se denominan patógenos oportunistas. El tratamiento de estas infecciones suele ser difícil debido a la alta resistencia de estas bacterias a la mayoría de los antibióticos usados normalmente en clínica. Desde el punto de vista humano, el patógeno principal es Ps. aeruginosa. Su actividad como agentes alterantes de alimentos Las Pseudomonas son el grupo de bacterias más frecuente en los alimentos frescos. Debido a su gran potencial metabólico, las bacterias de estos grupos son agentes importantes en la alteración de alimentos. Sin considerar los aspectos de deterioro de vegetales producidos por especies antes citadas, las Pseudomonas son uno de los principales grupos responsables de la alteración de productos cárnicos almacenados incorrectamente en condiciones de aerobiosis. Q.F.B. Dinora Bernal Iribe 13 ANÁLISIS CLÍNICOS GENERALES 3.- Su aplicación como agentes descontaminantes ambientales Varias especies del Pseudomonas contienen plásmidos en los que se encuentran codificadas enzimas capaces de degradar, al menos parcialmente, compuestos orgánicos derivados del petróleo o compuestos organoclorados u organofosfatados. Estas enzimas suelen ser inducibles y la selección de las cepas adecuadas puede permitir reducir los niveles de contaminación. La biodegradación de hidrocarburos y de otros compuestos orgánicos es realizada con eficiencia variable dependiendo de la estructura del hidrocarburo (lineal o ramificado, alifático o aromático) y de la presencia de átomos substituyentes. Algo similar ocurre con la biodegradación de compuestos insecticidas, herbicidas y detergentes y emulgentes. 4.- Bacterias del grupo Neisseria Las bacterias del grupo Neissera son, prácticamente, los únicos cocos Gramnegativos y son agentes causantes de enfermedades en humanos tales como un tipo de meningitis (N. meningitidis) y la gonorrea (N. gonorrheae). BACTERIAS GRAM-POSITIVAS 2.- Género Staphylococcus. Cocos Gram-positivos de 0,5 a 1 m de diámetro. Aerobios o anaerobios facultativos: Se diferencian de las bacterias lácticas por la presencia de catalasas y de pigmentos carotenoides (que dan color a las colonias por ejemplo en S. aureus) y porque su metabolismo es más versátil. En preparaciones para el microscopio aparecen formando racimos o parejas. Inmóviles Son las especies más resistentes a agentes físicos (desecación, temperatura) y químicos (alcohol) Forman parte de la flora normal en piel y cavidades Causa de infecciones e intoxicaciones transmitidas a través de los alimentos Intoxicación alimentaria causada por enterotoxina termoestable de la que no se sabe si actúa sólo a nivel intestinal o si también a nivel de sistema nervioso central una vez absorbida. La intoxicación no es grave aunque puede ser severa. La toxina no se produce cuando el alimento se conserva a 4ºC. Los síntomas de la intoxicación aparecen entre 1 y 7 horas después de la comida y duran unas 12 horas con vómitos, nauseas y, a veces, diarrea; raramente fiebre. Q.F.B. Dinora Bernal Iribe 14 ANÁLISIS CLÍNICOS GENERALES El alimento contaminado puede ser carne o pasteles con crema. También puede transmitirse por productos lácteos. Puede causar infecciones en la piel (forúnculos y otras heridas infectadas); de ahí puede pasar a los alimentos cuando la higiene del manejo de éstos no es completa. MEDIOS DE CULTIVOS Es una sustancia que constituye un ambiente nutritivo para el crecimiento de microorganismos. Los medios de cultivo mas comunes : Agar nutritivo Estracto de carne Peptona de gelatina Agar cerebro corazón PREPARACIÓN: 1.- Colocar en un matraz de 50 ml un poco de agua destilada. 2.- Se pesa 1.2 gr. de medio de cultivo y se agrega al matraz. 3.- Calentar ligeramente, agregar agua destilada lo suficiente como para completar 50 ml. 4.- Colocar tapón de algodón y esterilizar. 5.- Se pasa la flama por la caja Petri y se vacía el medio de cultivo. 6.- Se deja 24 horas a temperatura ambiente. Preparar la siembra de las cajas por los métodos ya conocidos y esperar por 3 días a temperatura de 37º C Pasados los tres días se tiene que identificar y clasificar las bacterias posibles encontradas, para ello se utiliza el método de tinción de GRAM cuya técnica se da a continuación. a) Se prepara el frotis bacteriano b) Por el reverso del portaobjetos cerca de uno de los extremos y utilizando marcador se anotan las iniciales de la persona que lo preparó y en el otro extremo el número de la zona ( donde se tomó la muestra) c) Se cubre la preparación con el colorante cristal violeta por un minuto, desechar y lavar con agua corriente con gotero. Q.F.B. Dinora Bernal Iribe 15 ANÁLISIS CLÍNICOS GENERALES d) Eliminar el exceso. e) Se cubre la preparación con lugol durante un minuto y medio y desechar el exceso. f) Se cubre el frotis con safranina durante medio minuto. Eliminar y enjuagar con agua corriente, y secar a condiciones del laboratorio. g) Observar al microscopio con objetivo de inmersión (100X), para identificar las formas mas comunes de bacterias, y dependiendo de la coloración serán: azul violeta: gram positivas Rosa o rojo: como gram negativas 2.1 COPROCULTIVO: INTRODUCCIÓN: Las enterobacterias representan la mayor parte de la flora microbiana del tracto intestinal del hombre. En ella se incluyen gérmenes comensales (proteus y bacilos coliformes) así como patógenos del género salmonella y shigella. Pueden estar también estreptococos intestinales (enterococos), clostridia levaduras (incluso cándida albicans), y ocasionalmente estaphilococos patógenos. El vibrión colérico puede ser aislado en casos de cólera; ocasionalmente es necesario tratar de aislar mycobacterium tuberculosis en materia fecal. 2.1.1 MEDIOS DE CULTIVOS, MATERIAL Y EQUIPO -Se prepara medio de cultivo de propagación con agar nutritivo en caja de petri deshechable -Eosin metilene Blue (EMB) -SS agar -desoxicolato citrato agar (DCA) -tetrationato o caldo GN(Hajna) -Kligler 0-119, 0-124, 0-125, 0-126, 0-127, y 0128, salmonellas y shigellas. Q.F.B. Dinora Bernal Iribe -SIM -Urea y sacarosa (surraco) -Verde brillante agar (VBA), sulfito de bismuto -Agar sangre con azida de sodio -Antisueros para identificar E coli patógenos: 0-26, 0-55, 0-86, 0-111, 0112, -Material y equipo habitual en un laboratorio de microbiología 16 ANÁLISIS CLÍNICOS GENERALES MATERIAL BIOLÓGICO: toma de muestra. Hay varios métodos: -Raspado rectal con hisopo -Materia fecal evacuada recientemente y llevada al laboratorio en frasco de boca ancha -Papel filtro impregnado de materia fecal. TÉCNICA : Con el hisopo se inocularán los medios siguientes: EMB, Agar Sangre, Dca, además se le agregará al tubo que contiene el hisopo 2mm. del medio de enriquecimiento tetrationato mas 0.04 de solución de lugol . Se inoculan todos estos medios a 37º por 24 hrs. y se observa el desarrollo. 2.1.2 IDENTIFICACIÓN DE CEPAS PATÓGENAS Colonias de color azul negro con brillo metálico en EMB, y agar sangre son características de escherichia coli, y si la materia fecal es de un niño con diarrea, se escogen de 8 a10 colonias y se resiembran en medio blood agar base (BAB) a 37º por 24 hrs. y se indica la existencia de E. coli patógena por métodos serológicos. Las colonias de Shigella son pequeñas y transparentes en EMB, con ellas se hacen estudios de fermentación de azúcares despues se hacen estudios serológicos para determinar si son Salmonellas o Schigellas. MEDIOS PARA ESTUDIAR LA FERMENTACIÓN DE LOS AZÚCARES POR LAS BACTERIAS En medio de Kliger: Fondo amarillo: fermenta la glucosa Superficie amarilla: fermenta la lactosa Formación de burbujas en el medio y elevación del mismo: produce gas Urea Sacarosa (Surraco) En este medio se puede observar la fermentación de la sacarosa ( color amarillo) y la hidrólisis de la urea ( color morado) BIOQUÍMICAS DE ENTEROBACTERIAS E.coli Citrobacter (E freundii) Enterobacter aerobacter Paracolobactrum Salmonela S. dysenteriae A S flexneri B S boydii C S sonnai D Proteus mirabilis proteus vulgaris proteus morgonii proteus retigeri Q.F.B. Dinora Bernal Iribe movilidad +o+ +o+o+ + +(-) - Gluc. + + + + + + + + lact. + + +o+ -o+ - Sac. +o+o+ +o-o+ V + -(+) + 17 Manitol + + + + ++ + + + Indol +(-) V +oV V V + V + H2S + + + + - Urea sac. -o+ -o+ + + + + Gas + ++ V + + + - + ANÁLISIS CLÍNICOS GENERALES Pseudomonas aeroginosa Alcaligenes Vibrio Klebsiela +(-) + + - + + + +o+ + + + + ++ - - ++- + V = Variable VALORES NORMALES: Generalmente se encuentran: Escherichia coli, Paracolon, Proteus, Bacteroides y Clostridia. Q.F.B. Dinora Bernal Iribe 18 ANÁLISIS CLÍNICOS GENERALES 2.1.3 ANTIBIOGRAMAS Se utilizan para la observación del antibiótico que inhibirá el desarrollo de las bacterias y determinar el tipo de antibiótico que se le administrará al paciente. Nombre del paciente:_______________________________________________ Resultado:_______________________________Revisado:________________ Nombre del alumno:________________________________fecha:___________ 2.2 EXUDADO FARÍNGEO Y NASAL Estas pruebas se realizan con el fin de identificar a los microbios mas frecuentes como: Estreptococos, D. pneumoniae, Staphilococos. aureus, Neisseria, Escherichia, Corrynebacterium diphteriae, Cándida, Klebsiella, Haemophilus, Actinomyces Mycobacteria, etc. Material: *Caja de petri * hisopos estériles * agar nutritivo de propagación *antibiograma. Técnica: Este material se recoge con torundas, aunque en los casos sospechosos de tos ferina, se prefiere una asa de platino larga y curva para alcanzar la nasofaringe. Una desventaja del empleo de la técnica en la recolección de las muestras, es que las superficies no son muy húmedas y la torunda se seca muy rápidamente. Para resolver este problema se sugiere conservar la torunda en un tubo que contenga aproximadamente 0.5 ml de caldo de soya tripticasa conservándose juntos en el tubo de transporte. Para el uso se aplica sobre la zona problema la torunda humedecida en el caldo, luego se regresa el tubo. Al llegar al laboratorio se exprime la torunda contra las paredes del tubo para que el material que contiene caiga en el caldo. 2.2.1 MEDIOS DE CULTIVO: Los medios de cultivos mas empleados son: gelosa sangre, infusión cerebro corazón, agar, gelosa chocolate y Staph 110 Se preparan cultivos de agar sangre que se incuban a 37º en CO2 al 10%. En caso de difteria se preparan cultivos en tubo inclinado de Loeffler y en medio de telurita. 2.2.2 IDENTIFICACIÓN DE CEPAS PATOLÓGICAS Q.F.B. Dinora Bernal Iribe 19 ANÁLISIS CLÍNICOS GENERALES Estaphilococos crecen con facilidad en la mayoría de los medios de cultivo ordinarios, dando colonias redondas lisas elevadas y brillantes, aureus color amarillo, citreus verde limón y albus de color blanco. las colonias virulentas de estreptococos tienen aspecto mate. Se preparan con la torunda frotis que se tiñen con gram y se examinan al microscopio. A veces permiten establecer el diagnostico de anginas de Vincent o de Muguet, puede teñirse el frotis con azul de metileno en caso de difteria. 2.2.3 ANTIBIOGRAMA Si en el medio de cultivo hay desarrollo bacteriano, elaborar un frotis con el método de tinción de gram, anotar las características morfológicas de la bacteria mas las características de la colonia determinada. desarrollar un antibiograma gram positivo o gram negativo de acuerdo a los resultados del frotis (bacterias gram positivas = frotis teñidos de azul o violetas bacterias gram negativas = frotis teñido de rosa o rojiso) Nombre del paciente:______________________________________________ Resultado:_______________________________Revisado:________________ Nombre del alumno:________________________________fecha:___________ 2.3 REACCIONES FEBRILES FUNDAMENTO: La demostración de anticuerpos en el suero contra las especies de salmonella, brucella, y enfermedades por ricketsias se conocen como reacciones febriles. Éstas son de mucho valor en el diagnóstico de enfermedades tales como: fiebre tifoidea, paratifoidea, brucelosis e infecciones por proteus. La demostración de estas reacciones serológicas se hacen fundamentadas por la reacción antígeno - anticuerpo. MÉTODO: Reacción de Widal, Reacción de Weil Felix y reacción de hudlesson. 1.- REACCIÓN DE WIDAL.- Incluye reacciones con: a) Antígeno tifico “O” b) Antígeno tifico “H “ c) Antígeno paratifico “A” d) Antígeno paratifico “B” 2.- Reacción de Weil Felix a) Antígeno proteus OX 19 3.- Reacción de hudlesson Q.F.B. Dinora Bernal Iribe 20 ANÁLISIS CLÍNICOS GENERALES a) Antígeno Brucella Abortus MATERIAL: *placa Macini *aplicadores de madera *pipeta *microscopio MATERIAL BIOLÓGICO Suero 2.3.1 ANÁLISIS CUALITATIVO 1.- Con una pipeta serológica se colocan en cada una de las concavidades de la placa Macini una del suero del paciente. 2.- A cada gota de suero añadir una gota de cada antígeno. 3.- Mezclar con un aplicador de madera diferente para cada área, después hacer oscilar la placa por 4 minutos. 4.- Sobre una fuente de luz opaca, observar la aglutinación microscópicamente, si estos son dudosos de preferencia observar con la ayuda de un microscopio con objetivo 10X. INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS: Si existe aglutinación la reacción es positiva, si no aglutinó la reacción es negativa. 2.3.2 ANÁLISIS CUANTITATIVO Cuando existe una reacción positiva se repite la técnica descrita anteriormente, efectuándose una serie de diluciones del suero las cuales se obtienen con el uso de las siguientes cantidades: Mililitros de suero Dilución 0.08........................................................... 1:20 0.04............................................................1:40 0.02............................................................1:80 0.01..........................................................1:160 0.005.........................................................1:320 Con la cuantificación se puede valorar la evolución de la enfermedad, la cual ha sido de gran ayuda para el diagnóstico serológico de bastantes enfermedades infecciosas. Q.F.B. Dinora Bernal Iribe 21 ANÁLISIS CLÍNICOS GENERALES INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS: Se hace la misma observación que en la prueba cualitativa. El informe del resultado se hace tomando en consideración la dilución mas alta en la que se observa una reacción positiva y el antígeno que reaccionó. Nombre del paciente:______________________________________________ Resultado:_______________________________Revisado:________________ Nombre del alumno:________________________________fecha:___________ 2.4 UROCULTIVO FUNDAMENTO: La orina de pacientes con pielonefritis tiene mayor número de leucocitos que el normal, y el número de bacterias viables de la porción media de la micción excede de 10,000 en un ml. El uso de la sonda para obtener la muestra de orina, aún bajo las mejores condiciones de asepsia, puede producir infecciones en las vías urinarias. 2.4.1 MEDIOS DE CULTIVO Gelosa sangre Solución salina al 0.85% Solución de merthiolate al 1:10,000 Solución de cloruro de benzalconio MATERIAL Y EQUIPO: -Asas calibradas portaobjetos -Cubreobjetos -Matraces E.M -Tubos de centrífuga de 15 ml. -Lámpara de alcohol -Torundas -Pinzas -Equipo habitual en un laboratorio de microbiología MÉTODO: 1.-El material biológico es la orina, obtenida del siguiente modo: Se dan instrucciones a la persona para que se presente en el laboratorio sin haber orinado al levantarse. Se asean con agua y jabón los órganos genitales externos y en seguida se aplica en la región que rodea al meato urinario una solución de merthiolate o de cloruro de benzalkonio. Una vez que empieza la micción se desecha la primera orina que arrastra los organismos contaminantes; se interrumpe la micción para recoger en un matraz Q.F.B. Dinora Bernal Iribe 22 ANÁLISIS CLÍNICOS GENERALES estéril unos 10 ml. de orina de la porción media de la micción, se desecha el resto de la orina. El urocultivo debe hacerse dentro de la hora siguiente a la recolección de la orina, o bién si esto no es posible debe guardarse la orina en el refrigerador a 4ºC hasta que pueda cultivarse. 2.- CUENTA DE LEUCOCITOS: El número de leucocitos se determinan en el sedimento urinario; para ello se depositan 20 ml. de orina en un tubo de centrífuga graduado, se centrífuga a 2000 rpm. durante 5 min, se desecha el sobrenadante y se resuspende en la gota de orina residual el sedimento, de esta se toma una gota, la cual se deposita en un porta objeto limpio y se cubre con un cubreobjeto. Se observa en el microscopio con objetivo seco fuerte y se cuenta el número de leucocitos por campo. 3.-CUENTA DE BACTERIAS: Método con asa calibrada para inocular. Se toma una asada de la orina y se hace una siembra por estrías en toda la superficie de la placa. Como en las infecciones del tracto urinario pueden encontrase bacterias gram positivas y bacilos gram negativos, es conveniente sembrar la orina en una placa de agarsangre y en uno de los medios selectivos para las bacterias gram negativas. En ambas placas se debe de examinar después de 24 a 48 horas. Se multiplica por 100 el número de colonias que aparecen el la placa, para determinar el número de bacterias que existen en un ml. de orina. ordinariamente se hace antibiograma a las bacterias encontradas en el urocultivo. 4.- MÉTODO DE DILUCIONES: (solo en casos especiales) Con solución salina al 85% se hacen diluciones 1:10, 1:100,1:1000 y 1: 100,000 de la orina, en tubos que contiene 13 o 15 ml. de BHI, triptosa-agar o cualquier otro medio nutritivo, el cual se fundirá y cuando se encuentre a 37ºC poner 1 ml. de cada una de las diluciones de orina, agitar por rotación y practicar la técnica de vaciado en la placa, incubar a 37ºC durante 24 hrs. y hacer la cuenta de las colonias que desarrollaron al cabo de este tiempo: 2.4.2 INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS: Estimación cuantitativa de colonias: En general cuentas de menos de 10,000 bacterias por mililitro de orina indican contaminación, cuando el número esta entre 10,000 y 100,000 se sospecha infección, y si es mayor de 100,000 se confirma la sospecha. Las infecciones bacterianas del tracto urinario pueden presentarse en pacientes de cualquier edad y cualquier sexo. Q.F.B. Dinora Bernal Iribe 23 ANÁLISIS CLÍNICOS GENERALES Debido a que las muestras de orina frecuentemente se contaminan en su recolección, el desarrollo de microorganismos, aún de los patógenos conocidos, no establece necesariamente el diagnóstico de infección del tracto urinario. VALORES NORMALES: La flora bacteriana de las orinas normales difiere de las orinas con microorganismos patógeno. En el primer caso los microorganismos encontrados con mas frecuencia son: Leucocitos en orina Adultos....................................Hasta 100 en un mm. Niños .......................................hasta 50 en un mm. Nombre del paciente:______________________________________________ Resultado:_______________________________Revisado:________________ Nombre del alumno:________________________________fecha:___________ Tinción GRAM: Bacterias Gram-Negativas Cocos Gram-negativos Diplococos: forma usual de Neiseria sp, como N. meningitidis También Moraxella sp y Acinetobacter sp aparecen con morfología de diplococos. Acinetobacter puede ser pleomórfico, y a veces aparece como coco Gram-positivo. Bacilos Gram-negativos Bacilos finos: forma usual de enterobacteriaceae, como E. Coli Cocobacilos: forma usual de Acinetobacter sp, que puede ser Gram-positivo o Gramnegativo, y, a menudo, Gram-variable. Cocobacilos: forma usual de Haemophilus sp, como H. influenzae Q.F.B. Dinora Bernal Iribe 24 ANÁLISIS CLÍNICOS GENERALES Curvados: forma usual de Vibrio sp, como V. cholerae, y Campylobacter sp, como C. jejuni Tinción GRAM: Bacterias Gram-Positivas Bacilos Gram-positivos Gruesos: forma típica de Clostridium sp, como C. perfringens, C. septicum Cocos Gram-positivos Racimos: forma típica de Staphylococcus sp, como S. aureus Finos: forma típica de Listeria sp Cadenas: forma típica de Streptococcus sp, como S. pneumoniae, Streptococcus grupo B Ramificados: forma típica de Actinomycetes y Nocardia, como A. israelii Tetradas: forma típica de Micrococcus sp Q.F.B. Dinora Bernal Iribe 25 ANÁLISIS CLÍNICOS GENERALES Q.F.B. Dinora Bernal Iribe 26