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XV Jornadas de Divulgación Técnico-Científicas 2014 - II Jornada Latinoamericana
Facultad de Ciencias Veterinarias – Universidad Nacional de Rosario
Escherichia coli enteroinvasiva aislada desde cerdos con
patología digestiva
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Comba, Eduardo; Pereyra, Norma; Francois, Silvina; Casabonne, Cecilia;
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Aquili,Virginia; Tártara, Gustavo; Pidone,Claudio
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Cátedra de Microbiología. Cátedra de Enfermedades Infecciosas,
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Facultad de Ciencias Veterinarias. Cátedra de Microbiología. Facultad de
Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Universidad Nacional de Rosario
(UNR) [email protected]
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Escherichia coli (E. coli) y sus diferentes patotipos se ha constituido como
uno de los patógenos más estudiados tanto en medicina humana como
veterinaria. Los animales domésticos se afectan especialmente con los
patotipos E. coli enterotoxigénica (ETEC) E. coli enterohemorrágica (EHEC)
también conocida como E. coli verotoxigénica (VTEC) y E. coli
enteropatogénica (EPEC). Los patotipos E. coli enteroinvasiva (EIEC), E.
coli enteroagregativa (EAEC) y E. coli difusoadherente (DAEC) se
consideran importantes sólo en medicina humana. En el ganado porcino de
Argentina se han reportado los patotipos ETEC, VTEC y E. coli
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enteropatogénicaporcino ( PEPEC ) . Se sabe que en los cerdos E. coli
produce cuadros característicos en distintas edades: diarrea en neonatos y
destetados, enfermedad de los edemas en destetados, septicemias,
infecciones extraintestinales como meningitis o artritis en distintas
categorías, síndrome de mastitis-metritis-agalactia en cerdas en lactancia e
infecciones del tracto urinario en reproductores. La genotipificación de las
cepas de E. coli basada en la detección de factores de virulencia a traves
de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es la forma de caracterizar
los patotipos. El objetivo del presente trabajo fue investigar patotipos de E.
coli provenientes de cerdos con diferentes cuadros clínicos. Se estudiaron
cepas de. E coli provenientes de cerdos de diferentes categorías
productivas afectados con patologías compatibles con aquellas producidas
por E. coli. Muestras de órganos y materia fecal se sembraron en agar
sangre, agar Mac Conkey lactosado y agar Mac Conkey con sorbitol. A
todas las colonias compatibles con E. coli se les realizaron pruebas
bioquímicas convencionales para confirmar su identificación. Se registraron
datos de hemólisis y utilización del sorbitol como indicadores fenotípicos de
patogenicidad. Para detectar los genes codificantes de factores de
virulencia se aplicó la PCR sobre pooles de colonias provenientes de cada
caso. Se investigaron genes que codifican para las toxinas STX1, STX2
(que caracterizan VTEC), LT1, ST1 y ST2 (que definen ETEC), ipaH (de
EIEC), hly (presente en VTEC), eae (presente en EPEC y VTEC) y Eagg
XV Jornadas de Divulgación Técnico-Científicas 2014 - II Jornada Latinoamericana
Facultad de Ciencias Veterinarias – Universidad Nacional de Rosario
(que define EAEC). Se detectaron 2 cepas provenientes de materia fecal y
riñón de un mismo animal que portaban el gen ipah que caracteriza a EIEC.
Esta cepa fue aislada de lechones destetados con diarrea. No se investigó
la presencia de pilis de adhesión. La EIEC está relacionada con Shigella
spp. ya que genéticamente son taxonomicamente indistinguibles a nivel de
especie. En medicina humana los pacientes presentan una colitis
inflamatoria, diarrea acuosa y disentería. El mecanismo de acción se basa
en una fase temprana de patogenicidad que incluye la penetración de la
célula epitelial, seguida por lisis de la vacuola. De esta manera, EIEC invade
el epitelio del colon, se adhiere a la mucosa requiriendo de dos proteínas
mucinasas y adhesinas, para entrar por endocitosis en la célula
multiplicándose dentro de ella y diseminándose a las células sanas
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adyacentes . El mecanismo de patogenicidad está en el loci del cromosoma
y plásmido. Los genes de la invasividad se encuentran en un plásmido de
140 MDa llamado pInv, que codifica proteínas, como Ipa y otras que están
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involucradas en el proceso de patogénesis . La detección se puede realizar
por la prueba de Sereny en cobayo, invasividad en células HeLa, ELISA, y
la detección del gen ipa a través de PCR. Este aislamiento a partir de
cerdos con patología entérica significa un nuevo aporte al conjunto de
patotipos diagnosticados en el porcino en la Argentina, debido a que no
existirían aislamientos previos de cepas EIEC, lo cual otorgaría gran
importancia a este hallazgo. La cepa de EIEC aislada se caracterizó por ser
muy beta hemolítica y la aislada desde intestino estuvo acompañada por
Klebsiella pneumoniae, causante de cuadros digestivos en terneros pero
poco frecuente en cerdos. No se encontraron características fenotípicas
indicativas de patogenicidad en la metodología utilizada, excepto la de
hemólisis de las cepas. El cuadro clínico se resolvió con tratamiento
específico. El único factor de virulencia demostrado fue la detección del gen
ipah no realizándose test de Sereny.
BIBLIOGRAFÍA
1. Alustiza, F. y col. “Frequency of virulence genes of E.coli among newborn
piglets from an intensive pig farm in Argentina”. Rev Arg Microbiol 44: 250254, 2012.
2. Moredo, F. y col. “Caracterización genotípica de aislamientos
de E.coli obtenidos de cerdos con diarrea posdestete y enfermedad de los
edemas”. Rev Arg Microbiol 44:85-88, 2012.
3. Nataro,J.P.; Kaper, J.B. “Diarrheagenic Escherichia coli”. Clinical
Microbiology Reviews, 11:142–201, 1998.