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Utilidad de la cuantificación de la AdenosinaDesaminasa en la Tuberculosis • Enzima EC 3.5.4.4 HIDROLASA • ENZIMA POLIMORFISMO GENÉTICO • El sustrato es la Adenosina UNA PURINA • BASE NITROGENADA ENDÓGENA SINTETIZADA DE LA DEGRADACIÓN DE AMINOÁCIDOS COMO METIONINA , TREONINA, VALINA E ISOLEUCINA AMP CICLICO • Las purinas pueden tener una doble procedencia por un lado exógeno (a través del consumo de proteínas) y por otro lado endógeno (la más importante). • El producto final de la degradación de las purinas ÁCIDO ÚRICO • Enzima esencial para el metabolismo de ciertos tipos de células del organismo, en especial, de las células que se ocupan del desarrollo del sistema inmune, de los linfocitos T. • Interés clínico por la ADA nació al describirse la asociación existente entre su déficit y algunas formas de inmunodeficiencia. • La ADA se localiza principalmente en el citoplasma celular, con una presencia escasa en el núcleo Presente en : eritrocitos, leucocitos, pulmón, hígado, estómago, tracto genitourinario y suero. ADA SÉRICA AUMENTADA ADA SÉRICA DISMINUIDA AUTOINMUNES NEOPLÁSICAS SINDROME IDCS HEPATOPATÍAS INFECCIOSAS HEMATOLÓGICAS I. CARDÍACA LEUCEMIA LINFOIDE CRÓNICA En que muestras medimos la ADA? Derrames serosos Líquidos pleurales Líquidos peritoneales Líquidos pericárdicos Líquidos sinoviales Líquido cefalorraquídeo INTERÉS CLÍNICO El análisis de los líquidos serosos contribuye en muchos casos a la formulación del diagnóstico etiológico de la enfermedad que lo produce. Estudio citoquímico básico macroscópico bioquímico citológico Otras determinaciones : Tg , amilasa, urea, iones etc EXUDADO TRASUDADO Más proteínas Proteínas normales Más células Células normales Glucosa ↓ Glucosa =Glucosa plasmática pH < 7,3 pH > 7,3 LDH> 200 LDH< 200 • FASE EXTRAANALÍTICA • PREANALITICA EXTRALABORATORIO INTRALABORATORIO • Muestra • Volumen • Transporte • Centrifugación • Conservación y estabilidad • Criterios de rechazo de muestras Fase Analítica BoLL Soc Ital Biol Sper.1966 Oct 15; 42(19 ):1312-6. Rapid colorimetric method for determination of some deaminase activities [Article in Italian] GIUSTI G, GALANTI B • Técnica colorimétrica de Giusti Bioquímica enzimática cuantitativa Midiendo la intensidad de color se podría conocer la concentración de la sustancia que lo produce. • Para ello se aplican técnicas fotométricas, empleando un aparato llamado espectrofotómetro . ADENOSINA + AGUA ADA INOSINA + NH3 Métodos de punto final: se pone en contacto los reactivos (que aportan el sustrato) la muestra biológica (que aporta la enzima) periodo de incubación se mide la absorbancia. Sensibilidad: 100% Especificidad: 93% Valor predictivo positivo: 67% Valor predictivo negativo: 100% Requerimientos clínicos de exactitud y precisión Valores de corte para nuestro país Imprecisión intraserie-interserie Coeficiente de variación 7 % Fase extranalítica Posanalítica Tiempo de respuesta (TAT) • Diagnóstico diferencial • Resultados y valores de corte • Interpretación de los resultados • Disminución de otros estudios • Útil en pacientes VIH positivos LÍQUIDOS PLEURALES 586 397 372 350 233 136 2011 2010 2009 2008 2007 2006 RESULTADOS ADA PERÍODO 2006 - 2011 Muestras Procesadas 6% 94% Muestras No procesadas RESULTADOS ADA PERIODO 2006-2011 19% 10% 71% > A 70 UI/l ENTRE 40 -70 UI/l < 40 UI/L Muchas gracias !!