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Laboratorios de Referencia para
Escherichia coli en alimentos
Funciones y tareas de los EU-RLs (882/2004, Art. 32
 Proveer a los NRLs método analítico de referencia
Proveer a los NRLs materiales de referencia
Proveer entrenamiento a los NRLs (workshop anual, cursos,
visitas al EU-RL)
Organizar pruebas comparativas (ring test o proficiency test)
Proveer asistencia científica y técnica a la comisión
Funciones y tareas de los EU-RLs (882/2004, Art. 32
 Proveer a los NRLs método analítico de referencia
Proveer a los NRLs materiales de referencia
Proveer entrenamiento a los NRLs (workshop anual, cursos,
visitas al EU-RL)
Organizar pruebas comparativas (ring test o proficiency test)
Proveer asistencia científica y técnica a la comisión
Objetivo de los workshop anuales de la UE
Consolidar el equipo de Laboratorios de Referencia
NLR que participan en actividades de la Red
Funciones y tareas de los EU-RLs (882/2004, Art. 32
 Proveer a los NRLs método analítico de referencia
Proveer a los NRLs materiales de referencia
Proveer entrenamiento a los NRLs (workshop anual, cursos,
visitas al EU-RL)
Organizar pruebas comparativas (ring test o proficiency test)
Proveer asistencia científica y técnica a la comisión
PT12-PARTICIPANTES: 38 LNR
OBJETIVOS PT12
• Continuar con el entrenamiento de los LNR EU en el uso de la norma
CEN/ISO/TS 13136 para la detección de STEC (Reg. 209/2013)
• Introducir métodos confiables para la detección de otras E. coli
patogénicas además de STEC en la red de laboratorios Nacionales de
la Unión Europea
PT12- Diseños del estudio
• Se enviaron a los laboratorios 3 muestras de brotes de 25 g cada una,
“potencialmente contaminadas con STEC, EAEC, EIEC y ETEC”.
• Metodología:
 CEN/ISO/TS 13136 para la detección de STEC
 PCR tiempo real para la detección de los genes de virulencia:
• aaiC and aggR for EAggEC
• lt, sth, and stp for ETEC
• ipaH for EIEC
 Las muestras se enviaron el 18 de noviembre de 2013
CONCLUSIONES
• Participaron 38 laboratorios
• De los 38 uno solo no envió resultados
• Casi todos los laboratorios tienen la capacidad de realizar la ISO 13136
para STEC
• 10 laboratorios no realizaron la detección de otras categorías de E. coli
patogénicas
• 28 de los 31 laboratorios (90%) identificaron correctamente EIEC de la
muestra B
PT13-PARTICIPANTES: 40 LNR
PT13-MUESTRAS
• 7 Cepas incógnitas, más las cepas de referencia para las PCR en AB
• Las muestras incógnitas fueron numeradas/codificadas aleatoriamente
• Las muestras se enviaron el 7 de abril de 2014
• Los resultados se completaron vía web-online
PT12-EVALUACION DE PERFORMANCE LNR
PT12-EVALUACION DE PERFORMANCE LNR
PT12-EVALUACION DE PERFORMANCE LNR
CONCLUSIONES
• Participaron 40 laboratorios
• Buenos resultados en la identificación de genes de virulencia
• Todavía hay laboratorios que no tienen los reactivos para otros patotipos
• Buenos resultados serotipificación
• El método de subtipificación de stx2d todavía tiene problemas de
especificidad
PT-PFGE3
En España existen 3 NRL para STEC:
1) Centro de Sanidad Animal (Algete). Se ocupa de la producción
primaria de alimentos de origen animal, pero desde el brote de
2011 son los encargados de analizar las semillas y brotes de
vegetales.
2) Instituto Carlos III, NRL para STEC desde su impacto en Salud
Pública.
3) Centro Nacional de Alimentación y Universidad de Lugo se ocupan
de alimentos desde la industrialización al consumo.