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Pruebas bioquímicas
para identificación de
enterobacterias
Práctica 11
Agar triple azúcar y hierro (TSI)
• Color: rojo ladrillo
• Inhibidores: no tiene
• Indicador: rojo fenol
• Sustratos Principales:
Lactosa, sacarosa y glucosa
Agar triple azúcar y hierro (TSI)
Carbohidratos:  ácido
• Lactosa
• Sacarosa
• Glucosa
Gas
Sulfuro de hidrogeno
• Superficie inclinada:
▫ fermentación de
lactosa o sacarosa 
amarillo
 Indicador: Rojo de
fenol
• Profundidad:
▫ Fermentación de
glucosa  amarillo
▫ Gas  burbujas o
fragmentación del
medio
• Sulfuro de hidrógeno
 negro
Sin inocular
K/K - -
K/A - -
A/A + -
A/A + +
K/A - +
Agar lisina hierro (LIA)
•
•
•
•
Color: lila
Inhibidores: no tiene
Indicador: púrpura de bromocresol
Sustratos principales: lisina y
glucosa
Agar lisina hierro (LIA)
• Descarboxilación de la lisina
• Positiva  color purpura
• Negativa 
▫ Superficie: purpura
▫ Fondo: amarillo
K/K - -
K/A - -
R/A + - K/A + +
SIM
•
•
•
•
•
Color: crema
Indicador: no tiene
Inhibidor: no tiene
Sustrato principal: peptona
Sustrato secundario: tiosulfato
sodico, hierro y amanio
SIM
• Ácido sulfhidrico 
▫ Positivo: negro
▫ Negativo: del color del medio
S
• Indol 
▫ Positivo: anillo rojo (Reactivo de Kovacs)
▫ Negativo: anillo amarillo
I
• Movilidad
▫ Positiva  medio opaco
▫ Negativa  crecimiento en la linea del inoculo
M
MIO
• Movilidad
• Indol
• Ornitina
▫ detección de la enzima
ornitina decarboxilas
CITRATO
•
•
•
•
Color: verde
Inhibidor: no tiene
Indicador: azul de bromocresol
Sustrato principal: citrato de
sodio
CITRATO
• Citrato de sodio
• Indicador: azul de bromotimo
▫ Positiva: azul
▫ Negativo: verde
Urea
•
•
•
•
Olor: rosado
Indicador: rojo fenol
Inhibidor: no tiene
Sustrato principal: urea
Urea
• Detecta enzima ureasa
• Indicador: rojo de fenol
• Positivo: a
Urea
 amoniaco
Negativa
Procedimiento
• Rotular tubos
▫
▫
▫
▫
▫
TSI
LIA
MIO o SIM
Citrato
Urea
•
•
•
•
•
TSI: 1 picadura + superficie
LIA: 2 picaduras + superficie
MIO: 1 picadura en el centro
Citrato: superficie
Urea: superficie o en el caldo