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SÍNDROMES POLIGLANDULARES
AUTOINMUNES (SPA)
Polyglandular autoinmune syndromes. REVIEW.
European Journal of Endocrinology 2009, 161: 11-20.
George J Kahaly.
Nat.Rev.Endocrinol.2010, 6,270-277
AWMichels and PA Gottlieb
AIRE in the thymus and beyond.
James M Gardner, Anne L Fletcher, Mark S Anderson and Shannon J Turley.
Current Opinion in Immunology 2009, 21:582–589.
• SÍNDROMES POLIGLANDULARES AUTOINMUNES
• SÍNDROME POLIGLANDULAR AUTOINMUNE TIPO 1
• CASO CLÍNICO
Definición
El Síndrome Poliglandular Autoinmune (SPA) se define
como la coexistencia de una o varias alteraciones
autoinmunes de las glándulas endocrinas con otras
patologías inmunológicas (no endocrinas) y con la
presencia de anticuerpos circulantes órgano específicos
dirigidos contra los órganos blancos.
• La asociación entre estas enfermedades
autoinmune no son al azar, sino en
combinaciones particulares.
• Neufeld y Blizzar clasificaron estos clusters
clínicos en cuatro tipos definidos de
enfermedad autoinmune poliglandular
Clasificación de Síndromes de Deficiencias
Poliglandulares Autoinmunes (SPA)
Neufeld y Blizzard 1980-
SPA Tipo I
SPA Tipo 2
SPA Tipo 3
SPA Tipo 4
Candidiasis crónica, Hipoparatiroidismo crónico,
AD autoinmune (al menos dos presentes)
AD autoinmune + enfermedad Tiroidea
autoinmune y/o Diabetes Mellitus (AD debe
estar siempre presente)
Enfermedad Tiroidea autoinmune + otra
enfermedad autoinmune (excluyendo AD
autoinmune, hipoparatiroidismo, candidiasis
crónica)
AD mas otra/s enfermadad/es autoinmune
órgano específica (excluyendo tipo 1, 2 o 3)
CLASIFICACIÓN
CARATERÍSTICAS DIFERENCIALES
Síndrome de Schmidt
Características de los SPA
Nat.Rev.Endocrinol.2010,270-277
PATOGÉNESIS DE SPA
FACTORES AMBIENTALES
FACTORES GENÉTICOS
• Infecciones
• Fármacos
• Dieta
• HLA II
• Otros genes
Fracaso de inducción
de tolerancia
Pérdida de tolerancia
No deleción de clones autoreactivos
Expresión aberrante de HLA
Alteraciones en el ANTIGENO
Liberación masiva de citoquinas
Déficit de función supresora
AUTOINMUNIDAD
Específica de órgano
Sistémica
Mecanismos efectores
Células NK
Células T
Células B
•Citotoxicidad Directa
•Citoquinas
AUTOANTICUERPOS
Patogénesis del síndrome poliglandular autoinmune
La enfermedad es determinada a través de predisposición genética y perdida de tolerancia inmunológica . La predisposición
genética puede aumentar o proteger el riesgo de desarrollar autoinmunidad dependiendo del polimorfismo. La tolerancia
central esta compuesta por selección negativa y positiva. Positiva resulta en cel T efectoras y regulatorias que entran a
circulación. La negativa remueve cel T con afinidad para Ag propios. Mut y polim pueden predisponer a una perdida de
tolerancia central o a un desequilibrio entre cel T efectoras y regulatorias. HLA claseII predispone a que un tejido especifico
sea blanco de la autoinmunidad. AIRE, autoinmune regulator gene; CTLA4, cytotoxicT lymphocyte associated antigen 4;
FOXP3, forkhead box P3 gene; HLA, human leukocyte antigen; MICA5.1, MHC class I- relatedgene A; PTPN22, protein
tyrosine phosphatase; VNTR, variable number tandem repeat 5' of the insulin gene.
Patogénesis de APS
El desarrollo de autoinmunidad múltiple puede ser
debido a epitopes compartidos entre agentes
ambientales y Antígenos propios comunes presentes en
varios tejidos endocrinos. Kamradt, N Engl J Med,2001.
Los órganos derivados de una misma capa germinal
expresan Ag comunes y estos pueden servir como
blanco para la autoinmunidad en SPA. De acuerdo a esta
teoría, SPA 2 podría ser el resultado de autoinmunidad
en mesodermo (corteza adrenal) y endodermo (tiroides y
páncreas).Tadmor B, Lancet; 1992
AUTOANTÍGENOS
ENFERMEDAD
AUTOANTÍGENO
TEJIDO/CÉLULA
Enf. autoinmune tiroidea
TPO, TG, RTSH
Tirocito
Diabetes mellitus tipo 1
Islotes pancreáticos, GAD65,
Célula beta
insulina, IA2
Insuficiencia suprarrenal
P450c21, P450c17, P450scc
Suprarrenal
Hipoparatiroidismo
Receptor sensible al calcio
Paratiroides
Gastritis autoinmune
H+, K+ - ATPasa
Cel. parietales gástrica
Enfermedad celiaca
Transglutaminasa, endomisio
Intestino delgado
Hepatitis autoinmune
AA decarboxilasa (AADC),
Hígado
P450D6, P4501A2
Vitiligo
Tirosinasa
Melanocito
Alopecia areata
Tirosina hidroxilasa (TH)
Folículo piloso
Anemia perniciosa
Factor intrínseco
Estómago
Hipogonadismo
P450c17, P450scc
Leydig/teca
SÍNDROME POLIGLANDULAR AUTOINMUNE
SCREENING PARA SPA
Screening Funcional
TSH, T4 libre, FSH, LH, To, E2, cortisol y glucosa
Na+, K+, Ca+ séricos, recuento de células sanguíneas
Opcional: test de estímulo con ACTH
Screening Serológico : autoanticuerpos contra
Islotes pancreátricos, GAD, IA2
TPO, TSH receptor
Enzimas de Citocromo P450
H+-K+-ATPase de células parietales, factor intrínseco
Transglutaminasa, endomisio
Opcional: screening genético
Análisis Molecular del gen AIRE, para SPA tipo 1
HLA tipificación y subtipificación
SÍNDROME POLIGLANDULAR AUTOINMUNE TIPO
Enfermedad autoinmune
monoglandular
Screening funcional y serológico para SPA
cada tres años
Cuando es positivo
Opcional: screening funcional para
SPA de fliares. en primer grado
• SÍNDROMES POLIGLANDULARES AUTOINMUNES
• SÍNDROME POLIGLANDULAR AUTOINMUNE TIPO 1
• CASO CLÍNICO
SÍNDROME POLIGLANDULAR AUTOINMUNE TIPO 1
SPA1 es una enfermedad autoinmume órgano-específica
poco frecuente de herencia autosómica recesiva.
El diagnóstico de SPA1 esta clásicamente basado en la
presencia de dos de los siguientes tres criterios mayores:
•
Candidiasis mucocutánea crónica
•
Hipoparatiroidismo
•
Enfermedad de Addison
SPA1 es relativamente común en algunas poblaciones
(Finlandeses 1:25.000, judíos iraníes 1:9.000, Sardos 1:14.000).
SÍNDROME POLIGLANDULAR AUTOINMUNE TIPO 1
Se caracteriza por la presencia de:
Otras endocrinopatías autoinmunes:
DM tipo1
Enfermedad tiroidea autoinmune
Hipogonadismo
Desordenes no endócrinos:
Hepatitis autoinmune
Síndrome de malabsorción
Gastritis atrófica
Anemia perniciosa
Desórdenes ectodermales
(hipoplasia de esmalte dental, distrofias de uñas,
alopecia, vitiligo, keratopatías)
Sindrome Poliglandular Autoinmune Tipo 1
Neufeld Ahonen Betterle Betterle
1981
1990
1998
2002
71
68
41
35
1.5
0.8
2.4
1.8
9.0
4.0
4.0
13.2
17.5
9.0
Nº de casos
Femenino/Masculino
Muerte
APS familiar (%)
Manifestaciones principales (%)
Hipoparatiroidismo crónico
76
Candidiasis crónica
73
Enf. de Addison autoinmune
100
Manifestaciones menores (%)
Hipogonadismo
Hipergonadotrófico autoinmune
17
Alopecía
32
Hepatitis crónica
13
Gastritis atrófica crónica
13
Anemia perniciosa
13
Vitiligo
8
Malabsorción
22
Síndrome de Sjögren's
Enfer. Tiroidea autoinmune
11
Keratoconjuntivitis
Síndrome de Turner
IDDM
4
79
100
72
93
83
73
88
79
100
50
29
12
13
13
13
18
43
37
20
15
15
15
15
12
10
12
2
2
61
38
19
6
19
22
15
16
13
12
3
6
2
35
12
Manifestaciones clínicas de SPA Tipo 1:
Candidiasis Crónica
• Es la primera manifestación de SPA Tipo 1
• Comienza antes de los 5 años
• Deficiencia inmunológica selectiva de Linfocitos
T a Cándida Albicans con células B normales
• Anergia contra antígenos Cándida
• Frecuencia : 17 % (Judíos) al 100 % (Finlandeses
y Noruegos)
SÍNDROME POLIGLANDULAR AUTOINMUNE TIPO 1
CANDIDIASIS MUCOCUTÁNEA
Manifestaciones clínicas de SPA Tipo 1:
Hipoparatiroidismo
•
•
•
•
Segunda manifestación clínica de SPA tipo 1
Edad de comienzo: 10 años
70-100 % de los pacientes con SPA tipo 1
Infiltración de células mononucleares y atrofia
glandular
• Autoinmunidad en la patogénesis de
hipoparatiroidismo es altamente probable, pero es la
única enfermedad autoinmune sin un marcador
serológico definido
Manifestaciones clínicas de SPA Tipo 1:
Enfermedad de Addison (AD)
•
•
•
•
•
Tercera manifestación clínica de SPA 1
Edad de comienzo: 15 años
22-100 % de los pacientes con SPA 1
Infiltración linfocitaria y atrofia glandular
Presencia de anticuerpos antiadrenales (ACA)
Diagnóstico de Enfermedad de Adisson’s
Laboratorio
Determinación
ACTH
Cortisol
Aldosterona
Renina
C.L.U.
Test de ACTH
Cortisol 60 min
Insuficiencia Primaria
Aumentado
Dudoso 3-5 ug/dl
Confirma < 3 ug/dl
Disminuído
Aumentado
Disminuído
< 20ug/dl
SÍNDROME POLIGLANDULAR AUTOINMUNE TIPO 1
Prevalencia de los componentes de la
enfermedad en función de la edad.
Halonen, JCEM; 2002
Marcadores séricos de AD autoinmune
Una característica de la enfermedad autoinmune es la
presencia de anticuerpos que reconocen antígenos propios.
Anticuerpos principales
Anti células adrenales ACA o 21-OH Ab
Anti células productoras de esteroides StCA
Anticuerpos de menor importancia clínica
Anti-superficie adrenal
Anti-receptor de ACTH
Anticuerpos Anti-células Adrenales (ACA)
Son anticuerpos órgano específicos que reaccionan contra las tres
capas de la corteza adrenal.
Son IgG subclase 1-2-4.
Técnicas de detección:
Fijación del Complemento
Elisa - RIA
Inmunofluorescencia Indirecta (IIF)
Autoantígenos propuestos: 17- Hidroxilasa (17-OH)
P450 scc
21- Hidroxilasa (21-OH)
Anticuerpos Anti-21-OH (21-OHAbs)
Método de detección de 21-OHAbs
Western Blotting (proteínas nativas o recombinantes)
Ensayos de inmunoprecipitación:
•
35S-21-OH
sistema transcripción/traducción en reticulocitos de
conejo.
•
125 I-21-OH
recombinante humana
Autoanticuerpos ACA/21-OH en AD
Betterlet al. JCEM 1999
Autoanticuerpos ACA/21-OH en AD
• ACA y 21-OHAbs son importantes marcadores de
autoinmunidad adrenal
• Las mediciones de IIF ACA e IPA 21OHAb son
esencialmente equivalentes
• Es necesario estandarización internacional y
programas de calidad adecuados para la medición de
Ac anti-adrenales
Betterlet al. JCEM 1999
¿ Podrían los ACA/21-OHAbs producir
un efecto inhibitorio sobre la actividad
enzimática y estar involucrados en la
patogénesis de la insuficiencia adrenal?
Autoepítopes de 21-OH
• Los autoepítopes de 21-OH son conformacionales y
abarcan la porción central y C-terminal de la enzima
• La porción C-terminal de 21-OH forma el sitio de unión a
la hormona es fundamental para su actividad enzimática
• Las secuencias de unión de 21-OHAb, fueron específicas
de humano, demostrando la conveniencia del uso de
métodos de detección que utilicen sustratos humanos y no
bovinos
• In vitro: IgG de pacientes con AD producen una
marcada disminución de la actividad enzimática
dosis dependiente
• In vivo: no se observó incremento de niveles de
17-OHP (test de ACTH) por inhibición de la
actividad enzimática de 21-OH
• No hay evidencias de hipoadrenalismo neonatal
por pasaje transplacentario de ACA de madres con
anticuerpos positivos
Hasta el presente la función
patogénica de ACA/ 21OHAbs no
ha podido ser demostrada in vivo
Historia natural de la Adrenalitis Autoinmune
Después de la infiltración linfocítica, ACA/21-OH Abs
comienzan a ser detectados en suero, evidenciando una
agresión adrenal silente mediada por células T
Similar a otras enfermedades autoinmune, AD es una
enfermedad crónica con un período pre clínico prolongado
Estadíos del desarrollo de la enfermedad de Addison
I: predisposición genética
II eventos desencadenantes, autoinmunidad adrenal
III anticuerpos 21-OHlasa predicen enfermedad adrenal
IV desarrollo de AD
Nat.Rev.Endocrinol.2010, 6,270-277
ACA como predictores de AD
Incidencia anual: 34,6%
Incidencia anual: 4.9 %
Riesgo acumulativo:100%
Riesgo acumulativo: 31.6 %
Betterle Endocrine Reviews 2002, 23:327-364
Prevalencia de ACA y StCAbs en niños con
enfermedad autoinmune órgano específica
Enfermedad
Hipoparatiroidismo
Tiroidea autoinmune
Diabetes mellitus tipo I
Vitiligo/Alopecia/Otros
Total
Controles normales
a
Sujetos
N° F/M
ACA +
N°
%
a
N°
StCA +
% % de ACA
21
10/11
10
47,6
6
28,6
60
207
160/47
0
0
0
0
0
430 220/210
4
0,9
0
0
0
150
0
0
0
0
0
808 496/312
14
1,7
6
0,7
43
100
0
0
0
0
0
106/44
71/29
p < 0.001 vs controles normales
Betterle et al.JCEM 1997
ACA en pacientes sin AD: Marcadores
de potencial enfermedad autoinmune
Población normal
0-0.6 %
Pacientes hospitalizados
4%
ACA +
Pacientes con otra
enfermedad autoinmune
48 %
Pronóstico en pacientes SPA I
• Los problemas incluyen astenia de etiología incierta
• Infecciones recurrentes oportunistas que, surgen a causa de
una deficiencia subyacente de los linfocitos T
• Hepatitis crónica activa (una de las causas más comunes de
mortalidad en SPA-1)
• La orofaringe o carcinoma gástrico, que puede ser mortal si
no se diagnostica a tiempo.
• En pacientes con SPA-1 la mortalidad suele ocurrir entre
el final de la segunda o la tercera década
SÍNDROME POLIGLANDULAR AUTOINMUNE TIPO 1
Mecanismos moleculares:
SPA1 esta asociada a mutaciones en el gen AIRE (regulador
autoinmune).
El gen AIRE esta localizado en el cromosoma 21q22.3, posee
14 exónes y codifica a una proteína de 545 aa.
Esta proteína muestra una señal de localización nuclear (NT),
un motivo de unión al DNA (SAND), 2 dedos de zinc (PHD),
una región rica en prolina (PRR) y 4 motivos de unión a
receptor nuclear ricos en leucina (LXXLL).
SÍNDROME POLIGLANDULAR AUTOINMUNE TIPO 1
Actúa como un fuerte activador transcripcional y esta
involucrado en mecanismos de tolerancia inmunológica
central y periférica.
AIRE regula la transcripción de ciertos auto-antígenos órganoespecíficos en la células epiteliales tímicas medulares.
Es un importante regulador del normal desarrollo de las
células T. Tendría un rol en la selección negativa de los
timocitos órgano-específicos.
SPA1 es, a la fecha, la única enfermedad autoinmune órganoespecífica descripta en humanos debida a mutaciones en un
único gen.
Función de AIRE.
En el timo normal, AIRE regula la expresión de antígenos propios que resulta en la
eliminación de las células T autorreactivas. En APS1, el defecto de expresión AIRE causa
presentación insuficiente de auto-antígenos y escapan del timo las células T autorreactivas.
Siglas: MTEC, medular células epiteliales del timo,
Nat.Rev.Endocrinol.2010,270-277
SÍNDROME POLIGLANDULAR AUTOINMUNE TIPO 1
MECANISMO MOLECULAR
En la deficiencia de AIRE el numero de epítopes expresados en mTEC es reducido, con la
consecuente falla en el proceso de selección negativa de las cel T auto reactivas.
SÍNDROME POLIGLANDULAR AUTOINMUNE TIPO 1
MECANISMO MOLECULAR
La estructura de dominios sugiere que la proteína AIRE interactuaría
directamente con el DNA. Algunos estudios así lo demuestran.
Sin embargo, al dominio de unión al DNA (SAND) le falta la secuencia
crucial KDWK que poseen otra proteínas con dominio SAND.
Además, los análisis genómicos actuales no han podido identificar la
secuencia consenso de unión de la proteína AIRE al DNA.
Quizás la proteína AIRE formaría parte de un gran complejo
macromolecular.
AIRE se asociaría con la matriz nuclear, haciendo de andamio para
otras proteínas para la alteración de la cromatina, apoyando la idea que
actuaría como un modificador epigenético (necesario, pero no
suficiente).
MECANISMOS EPIGENETICOS
Cualquier proceso que
altere la expresión de un
gen sin cambiar la
secuencia del ADN.
SÍNDROME POLIGLANDULAR AUTOINMUNE TIPO 1
MECANISMO MOLECULAR: mecanismo epigenético
Dominio PHD1 (dedo de zinc) se
une a Histona H3K4-no metilada
H3K4-no metilada
Heterocromatina inactiva
Reconocida por AIRE
Reclutamiento de otras
proteínas
Aumento de la actividad
transcipcional
SÍNDROME POLIGLANDULAR AUTOINMUNE TIPO 1
MUTACIONES
Hay 78 mutaciones en el gen AIRE descriptas (HGMD).
Solo se ha identificado 5 mutaciones intrónicas.
No hay una relacion clara entre genotipo y fenotipo
Habría otros factores genéticos y ambientales que determinarían la severidad
clínica de la enfermedad.
(R139X) EX3. Sardos
(R257X) EX6. Finlandeses. También es común en el norte de Italia y Europa
del este.
(1094–1106del) EX8. Anglo-americanos. Británicos.
(G228W) EX6. Esta mutacion actuaría de una manera dominante,
interfiriendo con el proceso de homodimerizacion afectando el alelo
normal.
SÍNDROME POLIGLANDULAR AUTOINMUNE TIPO 1
RESÚMEN
La presentación clínica del SPA es a veces precedida por un
período latente asintomático de meses a años, caracterizado por
la presencia de Anticuerpos circulantes asociados.
Los Anticuerpos son marcadores útiles para la predicción de
desarrollo de SPA.
La ausencia de Anticuerpos no excluye enfermedad.
El screening funcional, serológico y genético permiten el
diagnóstico del Síndrome Poliglandular Autoinmune.
SÍNDROMES POLIGLANDULARES AUTOINMUNES
SÍNDROME POLIGLANDULAR AUTOINMUNE TIPO 1
CASO CLÍNICO
HOSPITAL de NIÑOS
de la
SANTÍSIMA TRINIDAD
UNA NUEVA MUTACIÓN EN EL GEN
REGULADOR AUTOINMUME (AIRE) EN UN
PACIENTE DE ARGENTINA CON SÍNDROME
POLIGLANDULAR AUTOINMUNE TIPO 1 (SPA1)
Bazzara, Leonardo1; Muñoz, Liliana1; Nievas, Valeria1; Castro, Laura1; Ayan, Diana1;
Paez, Alejandra1; Inchaurregui, Elida2; Khon, Joaquín3; Nuñez, Mary3; Miras, Mirta1
1Servicio
Hospital de Niños de la Santísima Trinidad, Córdoba, Argentina.
de Endocrinología; 2Servicio de Nefrología; 3Servicio de Gastroenterología
RESUMEN DE HISTORIA CLÍNICA
Paciente de sexo masculino nacido con 40 semanas de gestación.
Peso y talla normal al nacimiento sin antecedentes perinatológicos
importantes.
El paciente presentó candidiasis mucocutánea desde los 3 años.
Fue hospitalizado con signos de tetania y arritmias secundario a un
desbalance electrolítico (Ca sérico 3.7 mg/dl, PTH 1.0 pg/ml). Se
diagnosticó hipoparatiroidismo idiopático (Tx: calcio y Vit. D desde
los 3 años).
A la edad de 5 años presentó una falla multiorgánica por sepsis y
posteriormente comenzó con síndrome de mala absorción. Los Acs
antigliadina, antiendomisio y antimúsculo liso fueron negativos.
La endoscopía gastro-esofágica mostró una esofagitis por cándida,
gastritis crónica y duodenitis.
RESUMEN DE HISTORIA CLÍNICA
A los 6 años desarrolló síndrome de Sjögren (mucosas secas,
ausencia de lagrimas) y vitiligo en cara, tronco y miembros.
A los 7 años presentó hipertransaminasemia persistente (AST: 254
IU/L; ALT: 343 IU/L) con Acs positivos contra microsoma de hígado y
riñón (LKM). La biopsia hepática mostró hepatitis crónica activa leve.
Los Acs contra la corteza adrenal y anti CYP21 fueron positivos con
niveles séricos de cortisol y ACTH normales.
La función tiroidea y los escaneos ultrasonográficos fueron siempre
normales, sin embargo presentó Acs anti tiroglobulina elevados.
Recientemente ha desarrollado alopecia y se positivisaron los Acs
anti GAD65, sin presentar aún clínica de DM.
RESUMEN DE HISTORIA CLÍNICA
PESO
TALLA
DATOS CLÍNICOS Y DE LABORATORIO
Tabla 1. Caracterí
Características clí
clínicas (nú
(números
entre paré
paréntesis indican la edad en añ
años del
comienzo de la enfermedad)
Tabla 2. Resultados de las determinaciones
de autoanticuerpos en el paciente
ACA
+
ASMA
–
+ (3)
CYP21 Ac
+
ANA
+
Hipoparatiroidismo
+ (3)
GAD65 Ac
+
SSA/Ro Ac
+
Enfermedad de Addison
–
Insulina Ac
–
SSB/La Ac
–
Diabetes insulino-dependiente
–
IA2 Ac
–
RNP
–
Hipotiroidismo
–
Síndrome de malabsorción
+ (5)
LKMA
+
Sm Ac
–
Síndrome Sjögren
+ (6)
AMA
–
SCL-70
–
Hepatitis autoinmune
+ (7)
EMA
–
Jo-1 Ac
–
Vitiligo
+ (7)
Gliadina Ac
–
ANCA-c
–
Alopecia
+ (8)
TPO-Ac
–
ANCA-p
–
Otras distrofias ectodermales
–
TG-Ac
+
Edad en el último examen (años)
8
Candidiasis mucocutánea
ESTUDIO MOLECULAR
Secuencia aminoácidos
Secuencia nucleótidos
SUJETO
NORMAL
Secuencia aminoácidos
Secuencia nucleótidos
PACIENTE
C302fsX311
Secuenciamiento del exón 8 del gen AIRE
ESTUDIO MOLECULAR
Secuencia aminoácidos
Secuencia nucleótidos
SUJETO
NORMAL
Secuencia aminoácidos
Secuencia nucleótidos
PACIENTE
Además, fueron detectados 3
polimorfismos heterocigotas
silentes (588 C/T, S196; 681 C/T,
G227 and 1197 T/C, A399).
X546C
(Molecular Endocrinology 1112-1119, 1998)
Secuenciamiento del exón 14 del gen AIRE
ESTUDIO MOLECULAR
Heterocigota C302fsX311
Heterocigota X546C
Doble heterocigota C302fsX311 / X546C
Pedigrí y genotipos de los miembros de la familia
CONCLUSIONES
Éste es el primer estudio molecular reportado en un paciente
con SPA1 de Argentina.
Se identificó una nueva mutación en el gen AIRE (C302fsX311).
La proteína mas corta resultante perdería ambos dedos de zinc
(PHD), la PRR y dos motivos LXXLL. Reportes previos indican
que la falta de los dedos de zinc ocasionaría la retención de la
proteína en el citoplasma.
La presencia de anticuerpos anti-CYP21, anti-GAD65 y antitiroglobulina supondría para el paciente un alto riesgo de
desarrollar enfermedad de Addison, diabetes e hipotiroidismo.
Un mayor conocimiento de las patologías de
base y sus mecanismos puede contribuir al
diagnóstico precoz y el tratamiento y ayudar a
mejorar los resultados en salud
y sobrevida de los pacientes con SPA.
MUCHAS GRACIAS
SUJETOS Y METODOLOGÍAS
Estudios moleculares
•
•
•
Se extrajo DNA genómico de leucocitos de sangre periférica (salting out).
Los 14 exónes del gen AIRE fueron individualmente amplificados (empleando primers
intrónicos específicos), purificados y visualizados en geles de agarosa.
Finalmente cada fragmento fue secuenciado mediante secuenciador automático.
Determinaciones bioquímicas
•
•
•
•
•
•
PTH, TSH, free T4, cortisol y ACTH séricas fueron determinados mediante ensayos de
electroquimioluminiscencia (Elecsys2010; Roche).
TPO-Ac y TG-Ac fueron determinados por radioinmunoensayo (RSR, UK).
Anticuerpos anti-gliadina (Ac) fueron medidos por ELISA.
Anticuerpos anti-SSA/Ro, anti-SSB/La, anti-Smith (Sm), anti-ribonúcleo proteínas (RNP),
anti-sclero70 (SCL-70) y anti-Jo-1 fueron medidos por inmuno difusión radial doble.
Anticuerpos anti-nucleares (ANA), anti-endomisio (EMA), anti-músculo liso (ASMA), antimicrosoma de hígado y riñón (LKMA), anti-corteza adrenal (ACA), anti-mitocondriales (AMA),
ANCA-c y ANCA-p fueron determinados por ensayos de inmunoflurescencia indirecta.
Anticuerpos anti-21-hidroxilasa (CYP21), anti-GAD65, anti-insulina y anti-IA2 fueron medidos
por radioinmunoensayo (RSR, UK).
Los padres del paciente dieron su consentimiento escrito para la participación de su hijo en este estudio.
Hay dos enfoques principales de laboratorio se utilizan para diagnosticar un APS. En primer lugar,
la selección mediante suero de anticuerpos se utiliza para (1) verificar la naturaleza autoinmune de
la enfermedad en pacientes con insuficiencias poliglandular, (2) identificar a los pacientes
afectados por una endocrinopatía aisladas que son propensas a desarrollar autoimmunities
multiorgánico, y (3) la familia de pantalla miembros de pacientes con SAF, aunque los familiares
están asintomáticos. Un panel de detección completo incluye evaluaciones de las suprarrenales
(21-hidroxilasa), la celda esteroideos (17-hidroxilasa y P450 ssc), tiroides (peroxidasa y
tiroglobulina), células de los islotes (GAD65 y GAD65 no), y la célula parietal (H +, K + ATPasa)
autoanticuerpos (véase el cuadro 3). Estimulante de la tiroides inmunoglobulinas puede ser
necesario en pacientes seleccionados. Un examen negativo solo no excluye la posibilidad de una
futura enfermedad, y anualmente a pruebas de seguimiento son óptimas. El valor predictivo de un
resultado positivo ya se ha expuesto anteriormente.
En segundo lugar, las evaluaciones de fin de la función de órganos-en positivo-las personas de
autoanticuerpos son obligatorios. Los niveles séricos de tirotropina, calcio, fósforo, glucosa en
ayunas y se practican anualmente puedan evaluar eficazmente la tiroides, paratiroides, y la
función de los islotes pancreáticos de pacientes asintomáticos