Download Ver/Abrir

www.gobiernofederal.gob.mx
www.sagarpa.gob.mx
www.inifap.gob.mx
Producción de plántulas y semilla prebásica de
variedades comerciales de papa libres de enfermedades
Marco Antonio ARELLANO GARCÍA, Eulalia Edith VILLAVICENCIO GUTIÉRREZ y
Sergio J. GARCÍA GARZA
Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias
Centro de Investigación Regional del Noreste
Campo Experimental Saltillo, Febrero 2010
Folleto Técnico No. MX-0-310702-37-03-15-09-41
ISBN: 978-607-425-301-6
GOBIERNO DEL ESTADO DE COAHUILA
SECRETARIA DE AGRICULTURA, GANADERIA,
DESARROLLO RURAL, PESCA Y ALIMENTACION
LIC. FRANCISCO JAVIER MAYORGA CASTAÑEDA
Secretario
M. C. MARIANO RUIZ-FUNES MACEDO
Subsecretario de Agricultura
ING. IGNACIO RIVERA RODRIGUEZ
Subsecretario de Desarrollo Rural
Dr. PEDRO ADALBERTO GONZALEZ HERNANDEZ
Subsecretario de Fomento a los Agronegocios
INSTITUTO NACIONAL DE INVESTIGACIONES
FORESTALES, AGRICOLAS Y PECUARIAS
Dr. PEDRO BRAJCICH GALLEGOS
Director General
Dr. SALVADOR FERNANDEZ RIVERA
Coordinador de Investigación, Innovación y Vinculación
MSc. ARTURO CRUZ VAZQUEZ
Encargado de la Coordinación de Planeación y Desarrollo
LIC. MARCIAL ALFREDO GARCIA MORTEO
Coordinador de Administración y Sistemas
LIC. RICARDO NOVERÓN CHAVEZ
Director General Adjunto de la Unidad Jurídica
CENTRO DE INVESTIGACION REGIONAL DEL
NORESTE
Dr. SEBASTIAN ACOSTA NUÑEZ
Director Regional
Dr. JORGE ELIZONDO BARRON
Director de Investigación, Innovación y Vinculación
M. C. NICOLAS MALDONADO MORENO
Director de Planeación y Desarrollo
M. A. JOSE LUIS CORNEJO ENCISO
Director de Administración
CAMPO EXPERIMENTAL SALTILLO
M. C. GUSTAVO JAVIER LARA GUAJARDO
Director de Coordinación y Vinculación en Coahuila
PROFR. HUMBERTO MOREIRA VALDES
Gobernador Constitucional del Estado
LIC. ROMAN ALBERTO CEPEDA GONZALEZ
Secretario de Fomento Agropecuario
LIC. ELIAS JUAN MARCOS ISSA
Subsecretario de Agricultura y Comercialización
ING. JOSE CARLOS DESTEVANE MEJIA
Secretario de Agricultura
M. V. Z. ENRIQUE GARCA PEREZ
Director de Ganadería
ING. FRANCISCO MARTINEZ AVALOS
Secretario de Medio Ambiente
DELEGACION ESTATAL DE SAGARPA
ING. EDUARDO VILLARREAL DAVILA
Delegado en Coahuila
ING. JORGE ALBERTO FLORES BERRUETO
Subdelegado Agropecuario
LIC. REYNOLD MALTOS ROMO
Subdelegado de Planeación
LIC. REYNALDO PEREZ-NEGRON
Subdelegado de Administración
FONDO MIXTO DE FOMENTO A LA INVESTIGACION
CIENTIFICA Y TECNOLÓGICA
CONACYT-GOBIERNO DEL ESTADO DE NUEVO LEON
DR. OSCAR VAZQUEZ MONTIEL
Director Regional Noreste del CONACYT
Secretario Técnico del Fondo Mixto
C. RODOLFO TENORIO SANCHEZ
Jefe del Departamento de Enlace Técnico Noreste del
CONACYT
LIC. ROGELIO FLORES DE LA PEÑA
Secretario Administrativo del Fondo Mixto
Producción de plántulas
y semilla prebásica de
variedades comerciales
de papa libres de
enfermedades
Dr. Marco Antonio ARELLANO GARCÍA
M. C. Eulalia Edith VILLAVICENCIO GUTIÉRREZ
Dr. Sergio J. GARCÍA GARZA
Instituto Nacional de Investigaciones Forestales,
Agrícolas y Pecuarias
Progreso No. 5, Barrio de Santa Catarina
Delegación Coyoacán, C.P. 04010 México D. F.
Teléfono (55) 3871-8700
Producción de plántulas y semilla prebásica de variedades
comerciales de papa libres de enfermedades
ISBN: 978-607-425-301-6
Primera Edición 2010
No. de Registro INIFAP/CIRNE/A-458
Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias
Centro de Investigación Regional Noreste
Campo Experimental Saltillo
Saltillo Coah., Febrero 2010
Folleto Técnico Núm. 41, ISBN: 978-607-425-301-6
No está permitida la reproducción total o parcial de esta publicación,
ni la transmisión de ninguna forma o por cualquier medio, ya sea
electrónico, mecánico, fotocopia, por registro u otros métodos, sin el
permiso previo y por escrito de la Institución.
Contenido
Introducción
Origen del cultivo de papa
Taxonomía y botánica
Descripción de la planta de papa
Raíz
Tallo
Hojas
Flor
Tubérculos
I. Fase de emergencia
II. Fase vegetativa
III. Fase de tuberización
IV. Fase de madurez
Tipos de reproducción
Sustento legal para la micropropagación de papa
I. Producción de material prenuclear
Obtención de vitroplántulas libres de virus
a) Termoterapia
b) Cultivo de meristemos
c) Pruebas serológicas para detección de virus
Micropropagación de papa
Producción de plántulas in Vitro
Medio nutritivo base
Procedimiento para la elaboración del medio
nutritivo
Vida del medio
Etapa 1. Selección de materiales donantes
Etapa 2. Multiplicación de explantes
Producción de material prenuclear
(vitroplantas)
Etapa 3. Enraizamiento
3.1) Enraizamiento in vitro
3.2) Enraizamiento in vivo
Etapa 4. Trasplante al invernadero
Aclimatación
Producción de microtubérculos de papa
(prenuclear)
II. Producción de minitubérculos-semilla
Sistemas de producción de semilla prebásica en
otros países.
Sistema de producción de minitubérculo-semilla de
papa en invernaderos de la región papera del
noreste de México
Pág.
1
4
5
6
6
6
7
7
7
8
8
8
8
9
9
10
10
10
12
13
14
15
16
18
20
20
20
20
22
22
23
24
24
25
26
26
27
Pág.
Metodología para la producción de semilla
prebásica
Selección del sustrato
Solución nutritiva
Riegos
Determinación del cuando regar
Determinación del cuanto regar
Control de plagas
Control de enfermedades
Prácticas culturales
Aporque
Cosecha
Clasificación del tamaño de minitubérculos
Producción de semilla prebásica de variedades
comerciales de papa bajo condiciones de
invernadero
Efecto de la densidad de población y altura de la
plántula, sobre la producción de minitubérculossemilla de papa.
Número de minitubérculos
Peso de minitubérculos
Efecto del tamaño del microtubérculo, sobre la
producción de minitubérculos-semilla de papa
Proceso de certificación de tubérculos-semilla
básica en campo
Requerimientos de semilla certificada por hectárea
Conclusiones
Literatura Citada
29
29
30
31
33
33
34
34
36
36
36
36
37
38
38
39
40
41
42
42
43
Índice de Figuras
Índice de Cuadros
Cuadro 1.
Cuadro 2.
Cuadro 3.
Cuadro 4.
Cuadro 5.
Cuadro 6.
Cuadro 7.
Cuadro 8.
Componentes de los medios de cultivo
para la producción de vitroplántulas de
papa (Solanum tuberosum).
Características de la solución nutritiva
universal elaborada por Steiner y
modificada para su aplicación por
etapas
en
la
producción
de
minitubérculos semilla de papa.
Tensiones de humedad para determinar
la frecuencia de aplicación del riego
(tensiómetros a 10 cm de profundidad)
y coeficientes de desarrollo del cultivo
(Kc), según Allen et al., (2006).
Algunos productos recomendados para
el control de hongos y bacterias
(aplicación semanal preventiva).
Clasificación con base en el diámetro
polar del minitubérculo (clasificación
propia).
Producción
de
semilla
básica
(minitubérculos por m2) de variedades
comerciales de papa bajo condiciones
de invernadero.
Efecto de la altura de las vitroplántulas
y las diferentes densidades de
población
en
el
número
de
minitubérculos-semilla obtenidos en la
categoría media (2.5 a 5 cm de
diámetro). Variedad Gigant.
Efecto de la altura de las vitroplántulas
y las diferentes densidades de
población en el peso de minitubérculossemilla (g) obtenidos en la categoría
media (2.5 a 5 cm de diámetro).
Variedad Gigant.
Pág.
17
Figura 1.
31
Figura 2.
32
Figura 3.
35
Figura 4.
37
38
Figura 5.
39
39
Figura 6.
Figura 7.
Esquema de la trayectoria de un clon y/o
variedad de papa para la producción de
minitubérculo-semilla libre de virus.
Elaboración del medio nutritivo para la
multiplicación de papa (Solanum
tuberosum) en el Laboratorio de Cultivo
de Tejidos Vegetales del Campo
Experimental Saltillo CIRNE-INIFAP.
Obtención de explantes de papa (Solamun
tuberosum) para la multiplicación
intensiva de vitroplantas en el
Laboratorio de Cultivo de Tejidos
Vegetales del Campo Experimental
Saltillo CIRNE-INIFAP.
Enraizamiento in vitro de las vitroplantas
de papa (Solamun tuberosum.) Los factores
a controlar en esta etapa son: el medio de
crecimiento,
temperatura,
luz
y
fotoperíodo. Laboratorio de Cultivo de
Tejidos
Vegetales
del
Campo
Experimental Saltillo CIRNE-INIFAP.
Enraizamiento in vivo de vitroplantas de
papa (Solanum tuberosum) en sustrato
estéril.
Camas en el interior del invernadero
antes de ser rellenadas con el sustrato de
tierra de bosque cribada. Abajo: proceso
de desinfección de la tierra y vista del
invernadero una vez rellenadas las
camas.
Figura 7. 1) Establecimiento de
vitroplántulas; 2) Humedecimiento del
Agribón; 3) Detalle del establecimiento
de las vitroplántulas por debajo del
Agribón; 4) Establecimiento completo de
las vitroplantulas.
Pág.
11
19
21
23
24
29
30
Pág.
Figura 8.
Figura 9.
Figura 10.
Figura 11.
Figura 12.
Figura 13.
Equipo Xilema, con la disposición de los
elementos fertilizantes, cuando se tienen
dos tanques para la concentración de la
solución nutritiva.
Detalle de la utilización de tensiómetros
para el control de la aplicación del agua.
Detalle de la sanidad lograda en el
interior del invernadero.
Tamaño de minitubérculos preferidos
para la siembra, en campo, de semilla
prebásica de papa.
Producción
de
minitubérculos/m2,
mediante la siembra directa de
microtubérculos. Invernadero Campo
Experimental Saltillo.
Esquema de certificación de tubérculossemilla de papa.
31
32
35
36
40
42
Producción de plántulas y semilla prebásica
de variedades comerciales de papa libres de
enfermedades
Marco Antonio Arellano García1
Eulalia Edith Villavicencio Gutiérrez2
Sergio Javier García Garza3
Introducción
La papa es un alimento de gran importancia para
el consumo en fresco y procesado que, junto con el
maíz, frijol, trigo y arroz forman parte de la dieta
del mexicano. De las 63 mil 919 ha anuales que se
siembran con papa en el país, sólo el 20 % de la
superficie utiliza semilla calificada (prebásica,
básica, registrada, certificada y habilitada)
(CONPAPA, 2009). La semilla es el insumo más
importante en todo cultivo, siendo la disponibilidad
de semilla sana y de buena calidad uno de los
principales factores que limitan la producción de
este tubérculo. Desde 1982 en el INIA, ahora
INIFAP, se empezaron a establecer proyectos
encaminados a la producción de semilla de papa.
Posteriormente, en 1988 el sistema de producción
Laboratorio-Invernadero-Campo fue adoptado por
algunos productores del centro del país; sin
embargo, aún no se ha logrado abastecer de
suficiente semilla con calidad fitosanitaria. Las
principales variedades comerciales de papa de las
que se ha generado semilla calificada en México
han sido variedades como: Alpha, Atlantic, Gigant,
Mondial, Fiana, Caesar, Vivaldi y Felsina, y de una
cantidad reducida de variedades mexicanas como:
Norteña, Montserrat, Zafiro, Malinche y Tollocan.
Entre las décadas de los 60’s y 70’s, la producción
de semilla certificada en nuestro país se realizó con
materiales importados de Europa, posteriormente
se facilitó la importación de semilla de Holanda y
1
Dr. Ex-investigador del Campo Experimental Saltillo. CIRNE-INIFAP.
M.C. Investigadora del Nodo Regional de la Red de Investigación e
Innovación de Hortalizas del Campo Experimental Saltillo. CIRNE-INIFAP.
3
Dr. Investigador del Nodo Regional de la Red de Investigación e Innovación
de Hortalizas del Campo Experimental Saltillo. CIRNE-INIFAP.
2
Canadá y los productores dejaron de producir
semillas de variedades mexicanas criollas y
mejoradas.
A finales de la década de los 80’s y principios de
los 90’s se presentaron una serie de eventos que
dificultaron en nuestro país el comercio de
semillas, como fue la restricción de la semilla
importada, debido a problemas fitosanitarios y la
firma del Tratado de Libre Comercio de América
del Norte (TLCAN). Durante la última década se
han hecho esfuerzos para consolidar en el sector
agropecuario el sistema-producto papa, generando
normas fitosanitarias para su producción en
invernadero y campo, lo que ha fortalecido el
programa de producción de semillas. Esto ha
generado que a nivel nacional se tengan
establecidos 10 laboratorios y 17 invernaderos con
una superficie útil de 60 mil m2, en los que se
producen aproximadamente 25 millones de
minitubérculos por año, con los que se abastece
sólo el 1.3% de la superficie cultivada, sin llegar a
satisfacer la demanda nacional (Hernández, 2008).
En la zona papera del noreste de México
existen 4 laboratorios y 5 invernaderos con una
capacidad instalada de 11,248 m2 y una superficie
de 8,000 m2, donde se llegan a generar hasta tres
cosechas de minitubérculos al año, obteniendo 1.5
millones de unidades de minitubérculos-semillas
clasificados como semilla con categoría prebásica,
mismos que se pueden utilizar para establecer 50
ha.
Esta producción es baja si se considera que en
el ciclo Primavera-Verano 2007 (P-V) se sembraron
en esta región 5,000 ha y la producción de semilla
prébasica sólo cubrió el 1% de esta superficie.
Algunos productores de la región papera de
Coahuila y Nuevo León han invertido en la
2
construcción de invernaderos para abastecerse de
semilla, importando plántulas in vitro y/o
minitubérculos a precios altos. En esta
infraestructura se pueden obtener minitubérculos
comerciales con un diámetro mayor a 2.5 cm. Como
lo refiere Ranalli et al., (1994), el potencial genético
de una variedad o clon se conserva con tubérculossemilla libres de virus, en donde la calidad
fitosanitaria repercute en el rendimiento del
cultivo, por lo que la producción de semilla
prebásica es importante.
La capacidad de producción de semilla
certificada de papa en la región corresponde
aproximadamente al 10% de la demanda total de
semilla, valuada en $780 millones de pesos,
considerándose un cultivo clave en la economía y
en la generación de empleos directos (60 jornales
por hectárea) e indirectos (compañías productoras
de agroquímicos, transportes, comercio e
industria). Recientemente, este cultivo ha sido
seriamente afectado por la enfermedad conocida
como “síndrome de la punta morada de la papa”
(PMP), la cual reduce el rendimiento y la calidad
del cultivo en ocasiones en más del 65%.
Durante el ciclo de producción P-V 2006, el
cultivo de papa tuvo grandes pérdidas debido a este
síndrome, el cual, se considera como el factor
limitante de la producción de este cultivo en
México (CONPAPA, 2009). La PMP se detectó en
México en el año de 1948 y se clasificó como un
problema de baja importancia.
Sin embargo, esta enfermedad se ha
incrementado notablemente en los últimos 15 años,
afectando al 70% de la superficie sembrada con
papa en México y un gran porcentaje en la región
papera de Coahuila y Nuevo León (Flores y Flores,
2008).
3
Para seguir apoyando a este sector productivo, es
necesario fortalecer el esquema de producción de
semilla certificada, ya que este ha sido el insumo
más afectado con pérdidas mayores al 65% debido a
la PMP, por lo que el objetivo de la presente
publicación es ofrecer a los productores y a los
interesados en esta cadena productiva, una
metodología para la producción de minitubérculossemilla prebásica libre de agentes patógenos,
describiendo de manera práctica los resultados
obtenidos en el Campo Experimental Saltillo del
INIFAP bajo el esquema de producción de
Laboratorio-Invernadero.
Origen del cultivo de papa
Existe abundante evidencia arqueológica que
demuestra que la papa ha sido cultivada en la
región Andina de América del Sur desde tiempos
muy antiguos. Se considera que el centro de origen
es en las tierras altas del sur de Perú, en una zona
comprendida entre El Cuzco y los alrededores del
lago Titicaca. De ahí se difundió por el sur hacia
Bolivia, Argentina y Chile; y por el norte hacia
Ecuador, Colombia, Venezuela, Guatemala y
México.
Han transcurrido miles de años desde que el
hombre andino domesticó una o más especies
silvestres del género Solanum con capacidad de
producir tubérculos. Una vez que la agricultura se
hizo más extensiva, la papa fue difundida a otras
áreas geográficas, en donde se generaron
variedades mas adaptadas a cada lugar.
En estas regiones numerosos cultivares nativos
muestran gran variación en el tipo de hoja, color de
flor y característica de los tubérculos, tales como
forma, color y sabor.
Dentro de las especies cultivadas, la subespecie
tuberosum se cultiva mundialmente.
4
Sin embargo, en el sur de Chile se han cultivado
por varios siglos, cultivares nativos de esta
subespecie.
La subespecie andigena es todavía la de mayor
distribución en la zona andina de Venezuela,
Colombia, Ecuador, Perú, Bolivia, el norte de
Argentina y también se cultiva en algunas áreas de
Guatemala y México. Tradicionalmente se produce
entre los 2,000 y 4,000 metros de altitud (Huamán,
1986).
La diferencia entre andigena y tuberosum reside
en la adaptación a la longitud del día. La evidencia
experimental expuesta en Europa y Estados Unidos
muestra que las poblaciones de andigena adaptadas
principalmente a días cortos se pueden transformar
en poblaciones tolerantes a días largos.
Este proceso se acompaña de cambios
morfológicos, tales como disminución en el
crecimiento de la parte superior, entrenudos más
cortos, hojas más grandes, reducción en su
floración y producción de frutos. Esto indica que
las subespecies presentes en Chile, Europa y
Estados Unidos proceden de andigena a través de
un proceso de adaptación a los días largos que son
características en estas zonas (Plaisted, 1971).
Taxonomía y botánica
La papa cultivada y sus parientes silvestres se
clasifican como sigue:
Solanaceae
Familia:
Solanum
Género:
Sección:
Petota (tuberosum)
Sub-Sección:
Potatoe (hyperbasarthrum)
La última categoría taxonómica se subdivide en
series y éstas en especies. La papa es una
dicotiledónea herbácea con hábitos de crecimiento
rastrero o erecto, generalmente de tallos gruesos y
leñosos, con entrenudos cortos.
5
Los tallos son huecos o medulosos, excepto en
los nudos que son sólidos, de forma angular y por
lo general verdes o rojo púrpura.
El follaje normalmente alcanza una altura entre
0.60 a 1.50 m. Las hojas son compuestas y pignadas.
Las hojas primarias de plántulas pueden ser
simples, pero una planta madura contiene hojas
compuestas en par y alternadas.
Las hojas se ordenan en forma alterna a lo largo
del tallo, dando un aspecto frondoso al follaje,
especialmente en las variedades mejoradas.
Descripción de la planta de papa
Raiz. La raíz puede desarrollarse a partir de una
semilla o de un tubérculo. Cuando crece a partir de
una semilla, forma una delicada raíz axonomorfa,
con ramificaciones laterales. Cuando crece de
tubérculos, forma raíces adventicias, primero en la
base de cada brote y luego encima de los nudos en
la parte subterránea de cada tallo. El sistema
radical varía de delicado y superficial a fibroso y
profundo
Tallo. Las plantas provenientes de semilla
verdadera tienen un tallo principal, mientras que
las provenientes de tubérculos-semillas pueden
producir varios tallos.
El tallo es generalmente de color verde y algunas
veces puede ser de color marrón-rojizo o morado.
Las yemas que se forman en el tallo a la altura
de las axilas de las hojas pueden desarrollarse para
llegar a formar tallos laterales, estolones,
inflorescencias y, a veces, tubérculos aéreos.
Los estolones son tallos laterales que crecen
horizontalmente por debajo del suelo a partir de
yemas de la parte subterránea de los tallos. Los
estolones pueden formar tubérculos mediante un
agrandamiento de su extremo terminal.
6
Sin embargo, no todos los estolones llegan a
formar tubérculos; un estolón no cubierto con
suelo, puede llegar a ser un tallo vertical con follaje
normal.
Hojas. Las hojas están distribuidas en espiral
sobre el tallo. Normalmente, las hojas son
compuestas, es decir, tienen un raquis central y
varios folíolos. Cada raquis puede llevar varios
pares de folíolos laterales primarios y un folíolo
terminal.
Flor. El pedúnculo de la inflorescencia está
dividido generalmente en dos ramas, cada una de
las cuales se subdivide en otras dos ramas. Las
flores de papa son bisexuales y poseen las cuatro
partes esenciales de una flor (cáliz, corola,
estambres y pistilo). Las flores pueden ser de color
blanco, crema, azul claro, rojo o morado en
diferentes tonos e intensidades. Las flores pueden
llegar a formar frutos llamados baya, que contienen
numerosas semillas conocidas como la semilla
sexual de la papa (Huamán, 1986).
Tubérculos. Morfológicamente los tubérculos son
tallos modificados y constituyen los principales
órganos de almacenamiento de la planta de papa.
Un tubérculo tiene dos extremos: el basal o
extremo ligado al estolón, que se llama talón, y el
extremo opuesto, llamado apical o distal.
Los “ojos” del tubérculo de papa se distribuyen
sobre la superficie del mismo en espiral. Los ojos
corresponden morfológicamente a los nudos de los
tallos, las cejas representan las hojas y las yemas
del ojo representan las yemas axilares.
Los brotes crecen de las yemas que se
encuentran en los ojos del tubérculo. El brote es
una característica varietal importante. La forma y
color del brote es para la papa lo que la huella
digital es en los humanos.
7
Los brotes pueden ser blancos, parcialmente
coloreados en la base o el ápice, o casi totalmente
coloreados. En la mayoría de las variedades
comerciales la forma del tubérculo varía entre
redonda, ovalada y oblonga.
La piel del tubérculo o peridermo, es una capa
delgada protectora del exterior del tubérculo; su
color varía entre blanco, crema, café, amarillo,
naranja, rojo o morado.
En algunas variedades la piel de los tubérculos
tiene dos colores; generalmente es suave y en
algunas variedades es rugosa o áspera y, al frotarla
cuando el tubérculo no ha madurado, se desprende
fácilmente. Por eso, el daño de la piel es frecuente
cuando se cosechan tubérculos antes de su
madurez. En la superficie de la piel se encuentran
distribuidas las lenticelas (poros respiratorios) por
los cuales se efectúa el intercambio de gases entre
el tubérculo y el ambiente. La pulpa constituye la
carne del tubérculo la cual, en variedades
comerciales, es normalmente de color blanco,
crema o amarillo pálido; algunas variedades
andígenas presentan dos colores.
El crecimiento y desarrollo de las plantas
pueden dividirse en cuatro fases:
I. Fase de emergencia. Período entre la siembra y
la aparición de los brotes en el surco.
II. Fase vegetativa. Período entre la emergencia y
la iniciación de la tuberización.
III. Fase de tuberización. Período entre el inicio
de la formación de tubérculos y el máximo
desarrollo del follaje. En muchas variedades
introducidas este período coincide con el inicio
y la finalización de la floración. Esta relación no
está bien establecida para la mayoría de los
cultivares mexicanos.
IV. Fase de madurez. Período entre el máximo
desarrollo del follaje y la senescencia total.
8
Tipos de reproducción
La papa se puede propagar por medio de la
reproducción sexual (semilla botánica) y asexual
(tubérculo). La sanidad fisiológica de los
tubérculos-semilla está entre los factores más
importantes que influyen sobre la producción.
En los sistemas de producción convencional, los
tubérculos se utilizan generalmente para la
multiplicación y producción. Este método tiene
algunas desventajas como un índice reducido de
multiplicación y un alto riesgo de adquirir
enfermedades (fungosas, virales y bacterianas).
Algunas plagas y agentes causales de
enfermedades pueden ser transmitidos y
diseminados por los tubérculos, causando así la
degeneración de los tubérculos-semilla. La papa es
propensa a la degeneración de la semilla porque la
propagación continua disminuye la calidad de los
tubérculos-semilla, causado por un aumento en las
enfermedades, entre las cuales las provocadas por
virus son las más frecuentes. Algunas de las
ventajas de utilizar tubérculos-semilla para la
multiplicación de la papa son: la producción de
plantas sanas, la uniformidad de los tubérculos y el
crecimiento vegetativo vigoroso.
Existen técnicas de multiplicación desarrolladas
recientemente. Una de éstas es la producción in
vitro o cultivo de tejidos. Esta técnica es muy
flexible y produce una tasa de multiplicación alta,
la cual proporciona vitroplántulas libres de
enfermedades (Roca et al., 1978; Wang y Hu, 1982;
Jones, 1988; Beukema y Van der Zaag, 1990).
Sustento legal para la micropropagación de
papa
El proceso de producción de vitroplantas se
inicia en laboratorio, en donde se multiplica de
9
manera intensiva el genotipo o variedad comercial
de interés.
Los laboratorios comerciales dedicados a esta
actividad deben estar dados de alta, contar con su
registro fitosanitario, cumplir con la Norma Oficial
Mexicana NOM-041-FITO-2002 y la Ley Federal de
Producción y Certificación de Semillas SAGARPASNICS.
LIMPIEZA
Cultivo de meristemos y
Termoterapia
Disección
meristemo
Prueba de Elisa
BANCO DE GERMOPLASMA
Almacenamiento
Material libre de virus
I. Producción de material prenuclear
Obtención de vitroplántulas libres de virus
En el laboratorio de Cultivo de Tejidos Vegetales
del CESAL así como en otros laboratorios
comerciales el método que tradicionalmente se ha
utilizado para obtener vitroplántulas libres de virus
es mediante la termoterapia, despunte apical y
cultivo de ápices meristemáticos establecidos in
vitro.
MULTIPLICACION
PRODUCCION
MICROTUBERCULOS
Prueba de Elisa
a) Termoterapia
Para la erradicación de uno o más virus, se
requiere someter el material vegetativo ya sea
plantas de maceta o vitroplántulas a un período de
calor (Escalante, 1989). En el primer caso, se
establecen minitubérculos de papa del genotipo de
interés en macetas, luego que las plantas alcanzan
entre 15 a 20 cm se someten a un tratamiento con
calor considerando temperaturas de incubación
relativamente altas (± 28 hasta 32°C) por un
período de 3 a 4 semanas (Figura 1).
Para promover el desarrollo vegetativo del
vástago, inactivar la multiplicación del virus y
mantener el metabolismo de la planta, se
recomienda que en la termoterapia también se
considere el fotoperíodo y humedad relativa,
debido a que la interacción de dichos factores
influye en la sobrevivencia del material (Escalante,
1989).
10
ACLIMATACION
PRODUCCIÓN SEMILLA PREBASICA
PRODUCCIÓN
SEMILLA BASICA EN CAMPO
INVERNADERO
camas 10 x 10 cm
Figura 1. Esquema de la trayectoria de un clon y/o variedad de papa
para la producción de minitubérculo-semilla libre de virus.
11
Escalante (1989) y López-Delgado y Zavala
(1988) coinciden en señalar que la termoterapia es
el método más utilizado para obtener plantas libres
de virus, agregando que algunos virus son más
estables que otros por lo que su erradicación se
vuelve un problema, debido a que algunos
genotipos necesitan períodos más largos de
termoterapia que otros o viceversa.
b) Cultivo de meristemos
Morell y Martín (1952) demostraron que el
tejido meristemático es capaz de desarrollar
vitroplántulas completas a partir de células
aisladas. El meristemo es un tejido no diferenciado
que se divide rápidamente y constituye el punto
activo de la yema vegetal. Esta es una estructura
genéticamente estable en donde el nivel de
infección viral tiende a ser reducido, debido a que
los primordios foliares no están en contacto con los
haces vasculares del tallo (tejido más diferenciado),
originando que la concentración del virus sea
reducida.
Aunque el cultivo de meristemos se conoce
desde 1955, la técnica ha sido modificada en papa
por Kartha (1981) y Debergh (1991). Se ha
encontrado que el número de plántulas libres de
virus tiene una relación inversa con el tamaño del
meristemo, esto significa que mientras más grande
sea el meristemo las posibilidades de su
establecimiento in vitro aumentan pero se
disminuye la probabilidad de saneamiento.
Al respecto Kartha (1981) encontró menor
eficiencia (10%) en el saneamiento al establecer
primordios grandes (0.6-0.8 mm), mientras que
Debergh (1991) obtuvo mayor eficiencia (100%)
cuando estableció domos más pequeños (0.3-0.5
mm).
12
El aislamiento del meristemo y su
establecimiento in vitro son procesos delicados que
requieren mucha práctica. Bajo el esquema
combinado de termoterapia y cultivo de
meristemos, en algunos casos la etiolación puede
aumentar el margen de seguridad en la obtención
de plantas sanas.
Después de la termoterapia, los tallos de las
plantas se fraccionan y disectan extrayendo el
meristemo apical, con uno o dos primordios
foliares, los cuales se transfieren a un medio de
cultivo selectivo haciéndolos crecer.
Al desarrollarse forman una planta nueva, de la
cual se extrae una muestra para realizar la prueba
de ELISA (Ensayos Inmunoabsorbentes de Enzimas
Ligadas) y determinar la eficiencia de la limpieza.
Las plantas seronegativas (libres de virus)
continúan su fase de multiplicación hasta obtener el
volumen deseado (Figura 1).
Cuando se tiene un interés particular sobre un
clon o variedad, las yemas también pueden tomarse
de plantas en campo.
c) Pruebas serológicas para detección de virus
En el laboratorio se lleva a cabo la termoterapia,
disección y cultivo de meristemos, y posteriormente
la prueba de ELISA seleccionando aquellas
vitroplántulas que hayan resultados seronegativas.
Con esta prueba serológica se determina el
estado fitosanitario del material vegetal. En papa,
se han realizado pruebas serológicas, las cuales se
basan en la reacción antígeno-anticuerpo (LópezDelgado et al., 1985).
Entre las más comunes están: a) doble difusión
de gel; b) hibridación molecular; c) micro
precipitación; d) látex y e) ELISA. Sin embargo, en
años recientes esta última ha sido la más utilizada
debido a que requiere menor cantidad de antisuero
13
muestras en menor tiempo y es más sensible que la
que las otras, permite analizar un mayor número de
prueba de látex (Salazar, 1998; López-Delgado
Zavala, 1988).
En la prueba serológica de ELISA pueden
utilizarse plántulas de laboratorio y/o de
invernadero, su fundamento se basa en el uso de
enzimas conjugadas a moléculas de anticuerpo
(gamma-globulina) para detectar partículas de virus
provenientes de extractos de savia de la planta. En
papa los virus que comúnmente se detectan en la
prueba de ELISA son: el PVM, PVS, PVY, PVX y
PLRV (DOF, 2003).
Actualmente existen antisueros comerciales para
virus específicos por lo que esta prueba es igual de
efectiva que los ensayos electroforéticos,
hibridación molecular y microscopía electrónica
(Hooker, 1981; Escalante, 1989).
En caso que el material resulte seropositivo se
aplica termoterapia y/o quimioterapia para
eliminar los patógenos (Figura 1). Después de la
termoterapia se vuelve a realizar la misma prueba
serológica con el fin de certificar la limpieza, si el
material resulta seronegativo se procede a su
multiplicación (Salazar, 1983; López-Delgado y
Zavala 1988). Esta prueba es de mucha importancia
en el sistema laboratorio-invernadero, dentro de la
etapa de multiplicación, en la producción de
plantas in vitro y en la producción de
minitubérculos-semilla prebásica cosechada en
invernadero. También se recomienda su realización
en la producción de tubérculos-semilla básica
obtenida en campo (Salazar, 1998).
Micropropagación de papa
La micropropagación de plantas forma parte de
la biotecnología moderna, en la cual se utiliza el
cultivo de tejidos vegetales para multiplicar rápida
y masivamente una especie de interés (Figura 1).
14
Mediante esta técnica se pueden producir
vitroplántulas a partir de pequeños segmentos
(yemas, tallos, hojas) que crecen dentro de un tubo
o frasco en un medio aséptico (libre de
microorganismos). El cultivo de tejidos permite
manipular no sólo los mecanismos de
diferenciación celular, sino también los factores
físicos y químicos que los regulan, por lo que en
papa las técnicas de micropropagación pueden
utilizarse para producir en un tiempo corto una
gran cantidad de vitroplántulas y microtubérculos
in vitro, ambos con calidad fitosanitaria.
Producción de plántulas in vitro
La micropropagación es el método más rápido
para producir plántulas manteniendo su calidad
fitosanitaria. La técnica del cultivo de tejidos
vegetales ha solucionado algunos de los problemas
asociados al sistema convencional de producción de
tubérculos-semilla, como son la obtención de una
gran cantidad de vitroplántulas sin virus (Khurana
et al., 2003). También es posible obtener un índice
más alto de multiplicación, material sano,
almacenaje y transporte más conveniente y
menores espacios durante la multiplicación.
Además, la multiplicación se puede hacer en todo el
año (Wang y Hu, 1982; Marinus, 1983; Struik y
Wiersema, 1999).
El término "cultivo in vitro" se define como el
cultivo de plantas o de alguna de sus partes
(semillas, embriones u órganos superiores) dentro
de recipientes de vidrio en condiciones estériles de
ambiente controlado (Pierik, 1987).
El cultivo in vitro de plantas superiores es una
técnica que exige un control absoluto del ambiente,
tanto físico como químico, en el que se sitúa al
explante; por lo tanto, los principales factores no
biológicos que afectarán al desarrollo del cultivo in
vitro son: 1) La composición del medio y el pH
15
(ambiente químico) y 2) la temperatura, luz y
fotoperíodo a los cuales serán sometidos los
explantes (ambiente físico).
El cultivo de tejidos permite manipular los
mecanismos de diferenciación celular, así como los
factores físicos y químicos que los regulan, por lo
que en papa las técnicas de micropropagación
pueden utilizarse para producir en un tiempo corto
no sólo una gran cantidad de vitroplántulas, sino
también microtubérculos in vitro, ambos con
calidad fitosanitaria.
Para la multiplicación in vitro se utilizan
segmentos de tallo con al menos una yema axilar
como explantes (Figura 1).
La propagación de nódulos puede hacerse en
tubos, frascos, envases o magentas, variando el
número de explantes que se establecen, siendo de 4,
10 y 25, respectivamente.
Los explantes, cualquiera que sea su naturaleza,
requieren de un medio que suministre un balance
nutricional adecuado, para que a corto plazo se
obtenga un crecimiento óptimo (Toledo et al., 1998).
Existen diferentes medios de cultivo, por lo que
su selección depende del objetivo que se persiga, ya
sea establecimiento in vitro, multiplicación, cultivo
de
meristemos,
almacenamiento,
microtuberización, etc. El medio que más se ha
utilizado para la producción de plántulas in vitro de
papa es el propuesto por Murashige y Skoog (1962),
el cual es adicionado con diferentes dosis de
fitohormonas, vitaminas y ajustadores osmóticos,
dependiendo los intereses establecidos.
Medio nutritivo base
Existen diferentes medios de cultivo, por lo que
su selección depende del objetivo que se persiga, ya
sea para el establecimiento in vitro o multiplicación.
16
Cuadro 1. Componentes de los medios de cultivo para la
producción de vitroplántulas de papa (Solanum
tuberosum).
Composición
NH4NO3
KNO3
MgSO4.7H20
KH2PO4
Ca(NO3)2
IK
H3BO3
MnSO4.4H2O
ZnSO4.7H2O
Na2MoO4.2H2O
CuS04.5H2O
CoCl.6H2O
Na2EDTA
FeSO4.7H2O
Acido Nicotínico
Piridoxina
Tiamina
Myoinositol
Glicina
Acido
P
é i
Sacarosa
Agar (6.0 g/L)
Requerimientos
para 1 L de medio
Milimoles Micromoles
(mM)
(µM)
Macroelementos
80.40
20.60
101.11
18.80
246.48
1.50
136.09
1.25
236.15
3.00
Microelementos
166.01
1.00
61.83
1.00
228.00
0.10
287.54
0.30
241.95
0.01
249.68
0.001
239.93
0.001
Quelatos
372.24
1.00
278.28
0.90
Vitaminas
123.10
4.06
205.60
2.43
337.30
0.29
180.20
5.54
Aminoácidos
75.07
0.26
238.30
0.49
Medio de Cultivo
342.30
87.64
Peso
molecular
(g)
En otros laboratorios comerciales y en el del
CESAL el medio nutritivo base que se ha utilizado
17
para la producción de plántulas in vitro de papa es
el MS (Murashige y Skoog, 1962), mismo que se
complementa con diferentes dosis de fitohormonas,
vitaminas y ajustadores osmóticos (Cuadro 1).
Los explantes requieren de un medio que
suministre un balance nutricional adecuado para
que a corto plazo se obtenga un crecimiento
óptimo.
Procedimiento para la elaboración del medio
nutritivo
A continuación se describe el procedimiento para
la elaboración del medio nutritivo.
1) En un vaso de precipitado añadir la cuarta
parte de agua destilada de la cantidad que se
desea preparar de medio (Figuras 2a y 2b).
minutos en el autoclave, considerando una
temperatura de 120 °C y 4 libras de presión
(Figuras 2g y 2h).
10) Ya esterilizados, los recipientes se colocan en
un lugar limpio.
a
b
c
d
2) Disolver la cantidad de sacarosa.
3) Añadir el volumen correcto de cada una de las
soluciones
de
microelementos
y
macroelementos (Figura 2c).
4) Añadir el volumen correcto de quelatos,
vitaminas y aminoácidos (Figura d).
e
f
5) Añadir las fitohormonas si el medio nutritivo
lo requiere.
6) Mezclar estos componentes y aforar con agua
destilada a la cantidad que se desea preparar
del medio (Figura 2e).
7) Introducir el electrodo del potenciómetro en el
medio, esperar que el aparato tome la lectura y
ajustar el pH a 5.7. Para bajarlo agregar
algunas gotas de HCl 1N y para subirlo aplicar
algunas gotas de NaOH (Figura 2f).
g
h
8) Colocar el medio en una parrilla para calentar
y agregar el agar, mezclar hasta diluirlo, antes
de la ebullición.
9) Vaciar el medio en los recipientes, ya sean
frascos, tubos o envases y esterilizar por 20
18
Figura 2. Elaboración del medio nutritivo para la multiplicación de papa
(Solanum tuberosum) en el Laboratorio de Cultivo de Tejidos
Vegetales del Campo Experimental Saltillo CIRNE-INIFAP.
19
Vida del medio
El medio de cultivo se puede almacenar a
temperatura ambiente por una semana. Si se
requiere aumentar el tiempo de almacenamiento el
medio de cultivo tendrá que refrigerarse.
Sin embargo, de preferencia se debe usar medio
fresco, siempre que sea posible.
Etapa 1. Selección de materiales donantes
El material vegetativo puede obtenerse de un
banco de germoplasma in vitro, seleccionarse de
minitubérculos-semilla sanos o de campo.
En el Laboratorio de Cultivo de Tejidos Vegetales
del Campo Experimental Saltillo CIRNE-INIFAP se
han utilizado las variedades; Atlantic, Gigant,
Mondial, Alpha, Felsina, Vivaldi y Caesar además
de clones del INIFAP provenientes de genotipos
sobresalientes para la zona de Coahuila y Nuevo
León y otros provenientes del Centro Internacional
de la Papa (CIP).
Los explantes requieren de un medio que
suministre un balance nutricional adecuado, para
que a corto plazo se obtenga un crecimiento
óptimo, éstos se “cultivan” en envases de
polipropileno, estableciendo un total de 25
explantes por envase con 50 mL de medio. El medio
de multiplicación que se utiliza para la producción
intensiva de plántulas in vitro de papa es el de
Murashige y Skoog (1962), el cual es adicionado
con diferentes dosis de vitaminas y ajustadores
osmóticos de acuerdo a lo descrito en el cuadro 1.
Dependiendo del genotipo, los subcultivos en
este medio semisólido se realizan después de un
período de incubación de 4 a 6 semanas para
obtener vitroplantas (Figura 3).
Todo el material vegetativo utilizado ha sido
sometido a pruebas de indexación corroborando su
calidad fitosanitaria, realizando las pruebas de
ELISA correspondientes de acuerdo a lo señalado
anteriormente. Después de obtener plántulas
seronegativas in vitro se procede a su multiplicación
intensiva para producir material prenuclear.
Etapa 2. Multiplicación de explantes
Producción de material prenuclear (vitroplantas)
La multiplicación in vitro del material vegetativo
de interés se realiza obteniendo explantes de la
planta donadora a partir de cortes transversales.
Los segmentos de tallo con yema axilar o apical son
de 1 cm de longitud, los cuales son sembrados en
contenedores con medio de multiplicación
semisólido, como se describió en la Figura 1.
20
Figura 3. Obtención de explantes de papa (Solamun tuberosum) para la
multiplicación intensiva de vitroplantas en el Laboratorio de Cultivo
de Tejidos Vegetales del Campo Experimental Saltillo CIRNEINIFAP.
21
Las vitroplantas generadas sirven como fuente
donadora de explantes, obteniendo de cada
subcultivo de 4 hasta 8 segmentos de tallo más
yema por vitroplanta, mismos que pueden
utilizarse como material prenuclear para la
producción de minituberculos en invernadero o
utilizarse para la producción de microtubérculos in
vitro.
Las vitroplantas listas para el invernadero se
extraen de sus contenedores, se lavan con
abundante agua para eliminar los restos del medio
de cultivo del sistema radicular y evitar su
contaminación en el sustrato. Se acomodan en
papel húmedo y se llevan al invernadero para su
trasplante (Figura 4).
En esta etapa se vuelve a corroborar el estado
fitosanitario de las vitroplantas producidas; el
material que resulta seronegativo se sigue
multiplicando periódicamente en un medio de
cultivo fresco, realizando estas operaciones
asépticamente. Se recomienda que en esta etapa se
lleve un registro de la producción semanal de cada
genotipo y de la producción que genera cada
persona dedicada a la multiplicación, para
determinar el volumen de producción en función
del tiempo y de este modo programar y coordinar
las labores de la siguiente etapa en invernadero.
Etapa 3. Enraizamiento
3.1) Enraizamiento in vitro
Es importante que el enraizamiento de las
vitroplantas sea inducido dentro del medio de
cultivo, pues de ello depende en gran medida que
se obtengan altas tasas de viabilidad en la siguiente
etapa. En papa no se requieren reguladores de
crecimiento para inducir este proceso; pero sí
condiciones mixotróficas que lo favorezcan, como
regular la concentración de sacarosa del medio en
el último subcultivo y controlar el fotoperíodo. Las
raíces formadas en esta etapa no son 100%
funcionales para la asimilación de nutrientes, pero
sí aseguran un buen sostenimiento en el sustrato
cuando se establecen en invernadero.
22
Figura 4. Enraizamiento in vitro de las vitroplantas de papa (Solamun
tuberosum.) Los factores a controlar en esta etapa son: el medio de
crecimiento, temperatura, luz y fotoperíodo. Laboratorio de Cultivo
de Tejidos Vegetales del Campo Experimental Saltillo CIRNEINIFAP.
3.2) Enraizamiento in vivo
En este caso, las vitroplantas se transfieren a
suelo utilizando un sustrato limpio y esterilizado
que se coloca en contenedores de plástico
termoestables acondicionados con un domo.
Dependiendo del tamaño del contenedor que se
utilice se establecen entre 25 hasta 60
plantas/contenedor. Como sustrato para el
enraizamiento se puede utilizar peat moss
comercial. Con este método se requiere que las
vitroplantas tengan más de tres yemas axilares y
que las hojas estén bien desarrolladas, esto, para
que la planta a través de la fotosíntesis obtenga los
23
fotosintatos y energía necesaria para enraizar y
desarrollarse.
Los contenedores con las plantas se llevan al
invernadero para su aclimatación. En este proceso
es necesario cuidar los factores que controlan el
ambiente de crecimiento, como la temperatura del
invernadero y aplicar riego por nebulización
periódicamente con una solución nutritiva.
Después de tres semanas las plantas están listan
para su establecimiento en las camas de
invernadero (Figura 5).
Vitroplantas sanas enraizadas in vitro o in vivo
que presenten más de 4 nudos cada una se pueden
transplantar a suelo. Al momento que se extraen de
sus contenedores, ambos tipos de plántulas están
poco adaptadas para crecer en un invernadero, ya
que ambas han crecido en ambientes con una
elevada humedad relativa, por lo que sus estomas
no responden fácilmente al descenso de la
humedad y son susceptibles a la desecación al
momento del trasplante.
Esto debido a la falta de una cutícula cerosa bien
desarrollada, que es necesaria para evitar la
pérdida de agua.
Independientemente del tipo de plantas
utilizadas, éstas requieren aclimatarse en
invernadero por un periodo de 2 a 3 semanas en
donde se disminuya progresivamente la humedad
relativa e incremente progresivamente la intensidad
de luz.
Esto se logra colocando una cubierta de Agribón
en la cama del invernadero. Después de este
período se retira el agribón y se levanta el sistema
de riego por microaspersión, para continuar con el
ciclo normal del cultivo.
Figura 5. Enraizamiento in vivo de vitroplantas de papa (Solanum tuberosum) en
sustrato estéril.
Etapa 4. Trasplante al invernadero
Aclimatación. Dado que las plántulas obtenidas in
vitro carecen de adaptaciones morfológicas que les
permitan el traspaso directo a las condiciones
exteriores, éstas deben ser transplantadas
manteniendo un control de la temperatura,
humedad relativa e intensidad lumínica en
invernadero.
24
Aplicando este procedimiento la sobrevivencia
de las plantas al trasplante es alta; sin embargo, el
proceso es delicado y requiere el uso intensivo de
mano de obra.
Producción de microtubérculos de papa
(prenuclear)
Los microtubérculos representan otra forma de
producir material prenuclear en laboratorio y se
utilizan como fuente de material vegetativo para la
producción como minitubérculos-semilla prebásica
de papa en invernadero.
25
Estos son comúnmente cosechados asépticamente,
y al envasarse son tratados con fungicidas, secados
y suberizados en la obscuridad a 20°C. Este
material se almacena en refrigeradores a 4-5°C para
cumplir con sus requerimientos de dormancia.
Por el tamaño tan pequeño que caracteriza a este
material vegetativo es más fácil de manejar en
invernadero; sin embargo, se requiere que los
microtubérculos estén brotados.
Los microtuberculos se producen a partir de
vitroplantas que se subcultivan en un medio base
inductor de tuberización adicionado con 5 mg/l
de BAP (6-Bencilaminopurina) y 500 mg/l de CCC
(chlorocholine chloride) incubando los nódulos en
oscuridad por cuatro semanas para obtener de 3 a 5
microtubérculos/ frasco.
II. Producción de minitubérculos-semilla
Sistemas de producción de semilla prebásica en
otros países.
En la Estación Experimental Sta. Catalina del
Instituto Nacional Autónomo de Investigaciones
Agropecuarias (INIAP), localizado en la ciudad de
Quito, Ecuador, se utilizaba como sistema
convencional para la producción de minitubérculos, camas de producción bajo invernadero
con un sustrato a base de tierra negra, pomina y
humus, con fertilización sólida y riego manual, con
una densidad de 16 vitroplántulas/m2 (arreglo
topológico de 25 x 25 cm).
Posteriormente, pasaron a un sistema semihidropónico, el cual consistió en colocar un
sustrato liviano en camas de producción. El agua y
los nutrientes se suministraron por medio de un
sistema de riego por goteo y la densidad utilizada
cambió a 34 plantas/m2 (arreglo topológico de 15 x
20 cm entre plantas). Actualmente, el INIAP
recomienda utilizar el arreglo topológico de 15 x 15
cm entre plantas.
Sin embargo, no encontraron diferencias
significativas en cuanto a producción frente al
sistema convencional, pero sí se obtuvo un
incremento en la calidad sanitaria de la semilla. En
su sistema de producción también utilizan plantas
in vitro producidas en laboratorio, libres de virus,
plagas y enfermedades, de diferentes variedades
(Paredes et al., 2004).
En la región de Asia Tropical, se está utilizando
la tecnología del cultivo de tejidos para producir
tubérculos-semilla de papa libre de virus. Han
observado incrementos en los rendimientos de este
cultivo utilizando esta técnica (Nagib et al., 2003).
De igual manera sucede en la India, en donde
desde 1999 se encuentran aplicando el cultivo de
tejidos (Khan et al., 1999).
En todas las regiones del mundo en donde se
produce este cultivo, ya se encuentran utilizando
este tipo de tecnologías para erradicar las
enfermedades o virus.
Sistema de producción de minitubérculosemilla de papa en invernaderos de la
región papera del noreste de México
El rendimiento de la región papera de Coahuila
y Nuevo León es de los más altos del país; sin
embargo, el beneficio económico para el productor
se reduce, debido a que el costo por hectárea es alto
($100,000 ha-1, aproximadamente). Una parte
importante de este costo (25 al 35%) se destina a la
compra de semilla. Para satisfacer las necesidades
de este insumo se requieren de aproximadamente
42 mil toneladas de semilla, que es insuficiente,
importándose de otras regiones paperas del país y
del extranjero.
27
26
La falta de semilla sana de variedades mexicanas
adaptadas a la región y tolerantes a enfermedades
obliga a los productores a introducir materiales de
dudosa calidad fitosanitaria, incrementando los
problemas fitopatológicos en la región.
papa. Este rendimiento fluctuará de acuerdo con el
genotipo a utilizar.
Dada la apertura del Tratado de Libre Comercio
de América del Norte (TLCAN), se requiere que la
zona papera del noreste cuente con semilla de
buena calidad que compita con la semilla que se
importa de Estados Unidos y Canadá.
Con el propósito de producir semilla prebásica
de papa libre de agentes patógenos, a continuación
se describe el proceso de producción
minitubérculos a partir de material prenuclear.
La producción de semilla de papa bajo
condiciones de invernadero, puede realizarse a
partir de plántulas in vitro, microtubérculos
(material prenuclear) y minitubérculos, de los
cuales, de acuerdo a la Norma Oficial Mexicana
NOM-041-FITO-2002, se puede obtener de semilla
prebásica.
La elección del sustrato se basa en sus
características de retención de humedad, aereación
y permeabilidad, además de asegurar su condición
de asepsia.
El material prenuclear se recomienda
establecerlo en camas de invernadero con ambiente
controlado para promover el desarrollo de las
plantas bajo condiciones de aislamiento.
Los requerimientos de este material vegetativo
dependen de la capacidad instalada del
invernadero, el cual puede estar compuesto por un
determinado número de naves, con un número
específico de camas, las cuales conforman la
superficie útil del invernadero.
En los cinco invernaderos comerciales de la
zona, el material prenuclear se establece
generalmente bajo el mismo diseño de plantación o
arreglo topológico, con una distancia de 10 x 10 cm
entre plantas e hileras. Considerando dicho
esquema de plantación, en una cama de 42 m de
largo por 1.25 m de ancho se podrán establecer
5,100 plántulas y/o minitubérculos.
Por cada planta establecida se producirán en
promedio 3 minitubérculos de semilla prebásica de
28
Metodología para la producción de semilla
prebásica
Selección del sustrato
Puede emplearse el “peat moss” indicado para la
germinación de plántulas, o bien utilizar tierra de
bosque cribada y desinfectada para darle las
condiciones de aereación y retención de humedad
al suelo.
Esto, para promover un óptimo desarrollo y
crecimiento de la planta de papa. El sustrato estéril
se extiende en las camas y se humedece al
momento del trasplante (Figura 6).
Figura 6. Camas en el interior del invernadero antes de ser rellenadas con el
sustrato de tierra de bosque cribada. Abajo: proceso de
desinfección de la tierra y vista del invernadero una vez rellenadas
las camas.
29
Después del trasplante las plantas se cubren con
una película de Agribón a una altura de 20 a 30 cm
del sustrato. Esto para asegurar el mayor
establecimiento de las plántulas en el invernadero,
e incrementar las condiciones de humedad relativa
para su rápido desarrollo (Figura 7).
la conductividad eléctrica de la solución a un valor
de 2 milisiemens cm-1 (Figura 8).
Cuadro 2. Características de la solución nutritiva universal
elaborada por Steiner y modificada para su
aplicación por etapas en la producción de
minitubérculos semilla de papa.
Elemento
Nitrógeno Nítrico
Nitrógeno Amoniacal
Fósforo (P)
Potasio (K)
Calcio (Ca)
Magnesio (Mg)
Azufre (S)
Hierro (Fe)
Manganeso (Mn)
Cobre (Cu)
Zinc (Zn)
Boro (B)
Molibdeno (Mo)
1
150
20
50
200
180
48
112
3.0
1.0
0.20
0.40
0.50
0.10
2
200
20
50
220
180
48
112
3.0
1.0
0.20
0.40
0.50
0.10
ETAPA (g/L)*
3
180
20
40
250
180
48
112
3.0
1.0
0.20
0.40
0.50
0.10
4
160
20
40
273
180
48
112
3.0
1.0
0.20
0.40
0.50
0.10
5
0
0
0
273
0
0
0
0
0
0
0
0
0
Figura 7. 1) Establecimiento de vitroplántulas; 2) Humedecimiento del
Agribón; 3) Detalle del establecimiento de las vitroplántulas por
debajo del Agribón; 4) Establecimiento completo de las
vitroplantulas.
*(g/L) = Gramos por litro; etapa 1= desarrollo de plántula, (10 días); etapa 2=
desarrollo de tallos (20 días); etapa 3= tuberización y floración (30 días); etapa
4= desarrollo de tubérculos (30 días); etapa 5= cosecha (10 días).
Esta película se humedece cada 30 minutos,
aproximadamente durante 12 horas en el período
diurno. Para evitar probables deficiencias de
nutrientes, en la etapa temprana durante la primera
semana y cada tercer día se aplican 150 ppm de
nitrato de calcio (para favorecer el crecimiento de
la raíz). En la segunda semana y cada tercer día se
aplican 150 ppm de nitrato de amonio más 50 ppm
de sulfato de magnesio (para acelerar el
crecimiento de la planta); la aplicación foliar de
estos fertilizantes se suspende cuando las plántulas
muestran un crecimiento vigoroso.
También deberá de ajustarse a rangos de pH
entre 5 y 6 (Cuadro 2). Posteriormente se aplica al
cultivo por medio del sistema de riego.
Solución nutritiva
La solución nutritiva a utilizar es de carácter
universal del tipo Steiner ajustándola a las
necesidades de nutrición del cultivo de la papa.
Esta solución nutritiva se concentra 100 veces en
un tanque de 1000 litros de capacidad y se controla
30
Figura 8. Equipo Xilema, con la disposición de los elementos fertilizantes,
cuando se tienen dos tanques para la concentración de la
solución nutritiva.
Riegos
La aplicación de los riegos se realiza
considerando los registros de humedad de los
tensiómetros (Figura 9), mismos que se distribuyen
en toda la cama.
31
Figura 9. Detalle de la utilización de tensiómetros para el control de la
aplicación del agua.
Es posible utilizar otro tipo de sensores para fijar
la frecuencia del mismo. En cuanto a la cantidad de
aplicación (lámina de riego), ésta se determina por
medio de la estimación de la evapotranspiración
del cultivo (existen varios métodos). Un método
sencillo que es menos preciso, pero que es el más
utilizado, es el de introducir un recipiente con agua
en el interior del invernadero, en donde se puede
medir los milímetros de agua evaporados y por
medio de la multiplicación por un coeficiente de
desarrollo del cultivo y se estima la lámina de riego
a aplicar (Cuadro 3),
Cuadro 3. Tensiones de humedad para determinar la
frecuencia de aplicación del riego (tensiómetros a
10 cm de profundidad) y coeficientes de desarrollo
del cultivo (Kc), según Allen et al., (2006).
Coeficiente de
Etapas de crecimiento
Tensión de
desarrollo del
del cultivo
humedad (cb)
cultivo (Kc)
Desarrollo de plántula.
10
0.5
Desarrollo de tallos.
20
0.8
Tuberización y
floración.
25-30
1.15
Desarrollo de
tubérculos.
30-40
0.95
5. Cosecha.
70
0.75
32
El cuándo regar está determinado por la tensión
de la humedad del suelo y el cuanto regar se
encuentra determinado por las condiciones de
evaporación en el interior del invernadero
asociadas al factor de desarrollo del cultivo kc
(Cuadro 3).
Ejemplo para determinar el cuando y el cuanto
regar.
Determinación del cuando regar:
Datos necesarios:
a) Lectura del tensiómetro.
Procedimiento:
El cuándo regar lo indica la lectura del
tensiómetros en cada etapa de desarrollo del
cultivo. Es decir en este ejemplo el riego se va a
aplicar cada vez que el tensiómetro alcance la
lectura de 20 cb.
Determinación del cuanto regar:
Datos necesarios:
a) Área de las camas de siembra (18 m2).
b) Etapa de desarrollo del cultivo (kc=0.8)
c) Lectura de la evaporación del agua (10 mm)
Procedimiento:
1. Determinar la lámina de riego por aplicar
(LR): LR = Ev x kc
Donde: Ev = Evap. del agua (mm) y kc = 0.8
Por lo tanto, la lámina de riego por aplicar = 8
mm.
2. Calculo del volumen de agua a aplicar:
Volumen = área de riego x lámina de riego
Volumen = 18 m2 x 0.008 m = 0.144 m3 = 144
litros a aplicar.
3. Calculo del tiempo de riego:
Datos necesarios:
-Gasto del gotero = 16.6 mililitros por minuto (1
litro por hora).
- Número de cintillas x cama = 6
- Número de goteros por cintilla = 60
- Número total de goteros por cama = 360.
33
-Por lo tanto, el volumen de aplicación de agua por
cama por minuto = 5.9 litros.
Tiempo de Riego = volumen de agua a aplicar /
volumen de aplicación de agua por cama por
minuto. Por lo tanto el Tiempo de Riego = 144/5.9 =
24 minutos aprox.
Los fungicidas de contacto, protegen el área
foliar de las plantas. Lo que hacen es dejar una
molécula en la parte tratada de las hojas, que inhibe
tanto las fases tempranas de las esporas como su
inoculación ó ingreso en los tejidos de la planta.
Control de plagas
Aunque el invernadero actúa como barrera para
la entrada de plagas al mismo, se recomienda como
medida preventiva la aplicación de productos
orgánicos tales como el Neem 25%, el cual es un
bioinsecticida orgánico efectivo en el control de
áfidos, chupadores, trips, ácaros, araña roja,
gusanos y larvas en general, pulgones, chapulines,
psílidos, escama, larvas de mosquita blanca entre
otros (concentración de ingrediente activo: aprox.
3% de azaridachtina). Se utilizan de 5 a 10 ml por
litro de agua para control, asegurando una buena
cobertura en el haz y el envés de las hojas. El
Nemafin es un nematicida orgánico para todo tipo
de suelo, aumenta la masa radicular y multiplica los
organismos benéficos mejorando la disponibilidad
de nutrientes. Se aplica en dosis de 20 ml por litro
de agua (su concentración de ingrediente activo:
Polífenos naturales 15%; Halógenos extraídos de
algas 25% y Ácidos carboxílicos 10%). Los extractos
de ajo actúan como repelentes de insectos y evitan
su entrada al invernadero (Phc® bug balancer® en
dosis de 2 litros/ha. Su ingrediente activo está
representado por: extracto acuoso de ajo 87% y
extracto acuoso de manzanilla y ruda 10%.
Control de enfermedades
Para evitar la proliferación de enfermedades en
el interior del invernadero, se recomienda la
aplicación preventiva de fungicidas, bactericidas y
antivirus, con una frecuencia de aplicación semanal,
para lograr la sanidad del cultivo (Figura 10).
Algunos productos especificados para tal fin se
presentan en el Cuadro 4.
34
Figura 10. Detalle de la sanidad lograda en el interior del invernadero.
Ejemplo de este tipo de productos son el Manzate
(en dosis de 2 a 4 kg/ha), y el Ridomil Gold Bravo
(en dosis de 2.5 kg/ha), entre otros.
Cuadro 4. Algunos productos recomendados para el control
de hongos y bacterias (aplicación semanal
preventiva).
Ingrediente
Producto
Acción
Control
Activo
Gran
Fungibac Extracto de Candelilla
Fungicida–
variedad de
29%; extracto de Limón
Plus
29% y extracto de
Bactericida
hongos y
(Dosis 1-2
Gobernadora 29%.
litros/ha)
bacterias
Manzate
Fungicida
Hongos Fito200
Mancozeb 80%
(contacto)
patógenos
(Dosis 1-4
kg/ha)
Ridomil
Gold
Bravo
76.5 PH
45g/kg
Mefenoxam
(Metalaxil-M) + 720
g/kg Clorotalonil.
(Dosis 1
kg/ha)
35
Fungicida
(sistemico)
Phytophthora
Spp;
Alternaria
solani
Prácticas culturales
Aporque. Cuando las plantas presenten una
altura aproximada de 15 cm se procederá al
aporcado de las mismas, con el mismo sustrato u
otro que se tenga a la mano, sólo hay que verificar
que efectivamente haya sido esterilizado.
Esta práctica se realiza con el objetivo de
favorecer la producción de minitubérculos en la
zona de aporcado y dar mayor sostén a la planta.
Cosecha. Al llegar al tamaño deseado de
minitubérculos se procede a desecar el follaje de las
plantas (90 a 100 días después del trasplante) y a
promover la suberización de la papa. Después de
15 días de la práctica anterior se realiza la
extracción de minitubéculos, de esta forma se
evitan daños en la piel (Figura 11).
Con base en esta preferencia se elaboraron las
siguientes clasificaciones (Cuadro 5).
Cuadro 5. Clasificación con base en el diámetro polar del
minitubérculo (clasificación propia).
Categorías
Diámetro polar
(cm)
< 1.0
1.1 - 1.9
2.0 - 2.4
2.5 – 5.0
> 5.1
Canicas
Chico 1
Chico 2
Medio
Grande
Producción de semilla prebásica de variedades
comerciales de papa bajo condiciones de
invernadero
Durante los ciclos de producción 2006 y 2007, se
establecieron algunas pruebas de producción de
minitubérculos-semilla prebásica de variedades de
papa libres del síndrome punta morada.
Se encontró que la variedad Mondial produce 7
minitubérculos-semilla de la categoría grande por
m2; siendo el único material que produjo este tipo
de categoría, bajo estas condiciones de producción
(Cuadro 6).
Figura 11. Tamaño de minitubérculos preferidos para la siembra en campo,
de semilla prebásica de papa.
Clasificación del tamaño de minitubérculos
Existen varias clasificaciones de minitubérculos,
algunas de índole nacional y otras de índole
internacional.
Por lo general el productor de semilla de papa
requiere de un tamaño de minitubérculos de 2.5 a
5.0 cm de diámetro polar.
36
La categoría correspondiente al tamaño del
minitubérculo-semilla para siembra, es la de
tamaño medio y se busca la mayor producción de
esta categoría. Los materiales que produjeron
mayores cantidades de minitubérculos-semilla de
papa son las variedades Mondial y Fabula, con
aproximadamente una producción de 115
minitubérculos-semilla/m2 (Cuadro 6).
Gigant
produjo
alrededor
de
80
minitubérculos/m2 y Alpha produjo tan sólo 50
minitubérculos/m2.
37
La clasificación correspondiente al tamaño Chico
1 y 2, y Canicas, podrán ser utilizadas como
material reproductivo para el siguiente esquema de
producción bajo invernadero.
Cuadro 6. Producción de semilla básica (minitubérculos por
m2) de variedades comerciales de papa bajo
condiciones de invernadero.
Tamaño (cm)
Grande
Medio
Chico
Canicas
Variedad
(> 5.1)
(2.5-5)
(1.1-2.4)
(< 1)
Gigant
0
80 ab
209 a
67 a
Mondial
7
115 a
176 ab
47 a
Alpha
1
50 b
61 c
4b
Fabula
0
118 a
110 bc
28 a
Efecto de la densidad de población y altura
de la plántula, sobre la producción de
minitubérculos-semilla de papa
El tamaño de las vitroplántulas provenientes de
laboratorios comerciales es variable, presentando
una altura por vitroplanta que va desde 3 a 9 cm
considerando tres categorías; vitroplantas chicas (3
a 5 cm de altura); medianas (5 a 7 cm) y grandes (>
de 7 cm).
Para analizar el efecto del tamaño de las
vitroplantas y las diferentes densidades de
población que se utilizan el invernadero sobre la
producción de minitubérculos semilla, se realizó
una evaluación utilizando los siguientes
tratamientos: T1) 5 cm x 5 cm= 400
vitroplántulas/m2; T2) 7 x 7 = 200; T3) 10 x 10 = 100;
T4) 10 x 15 = 66; y T5) 15 x 15 = 44 vitroplántulas/m2.
Número de minitubérculos
Considerando que los minitubérculos-semilla de
papa de interés para el productor son los de
tamaño medio (2.5 a 5 cm de diámetro), a
continuación se analiza la producción de
minitubérculos para esta categoría.
38
De los tres tamaños de vitroplántulas evaluados
se encontró que con las densidades de población de
400 y 200 vitroplántulas/m2 se produce 30% más
minitubérculos-semilla, en comparación al resto de
las densidades evaluadas, si se utilizan vitroplantas
con alturas mayores de 7 cm (Cuadro 7).
Cuadro 7. Efecto de la altura de las vitroplántulas y las
diferentes densidades de población en el número
de minitubérculos-semilla obtenidos en la categoría
media (2.5 a 5 cm de diámetro). Variedad Gigant.
T1) 400
T2) 200
T3) 100
T4) 66
T5) 44
DMS0.05
Altura de vitroplántulas
3 a 5 cm
5 a 7 cm
> de 7 cm
77 a
57 a
64 a
62 a
89 a
64 a
40 a
74 a
44 ab
43 a
34 a
26 b
50 a
73 a
43 ab
35
60
19
Peso de minitubérculos
La
densidad
de
población
de
200
vitroplántulas/m2 producen un 32.74 % más peso de
minitubérculos-semilla en comparación con la
densidad de 100 vitroplántulas/m2, si se utilizan en
invernadero vitroplantas con alturas mayores de 7
cm (Cuadro 8).
Cuadro 8. Efecto de la altura de las vitroplántulas y las
diferentes densidades de población en el peso de
minitubérculos-semilla (g) obtenidos en la categoría
media (2.5 a 5 cm de diámetro). Variedad Gigant.
Vitroplántulas
Altura de vitroplántulas
por m2
3 a 5 cm
5 a 7 cm
> de 7 cm
T1) 400
800 a
700 a
785 ab
T2) 200
820 a
1065 a
855 a
T3) 100
545 a
895 a
575 abc
T4) 66
600 a
420 a
350 c
T5) 44
585 a
840 a
520 bc
DMS0.05
286
689
283
La variable tamaño de la vitroplántula (altura)
por si sola no tiene influencia sobre el número y
peso de los tubérculos-semilla, pero su desventaja
39
principal está representada al momento del
trasplante, las pequeñas (3 a 5 cm), necesitan
mayores cuidados para lograr su sobrevivencia
cuando se realiza el transplante al invernadero.
Estos resultados confirman la factibilidad del
empleo de microtubérculos como material
prenuclear para llevar a cabo la producción de
“minis” bajo condiciones de invernadero.
Efecto del tamaño del microtubérculo,
sobre la producción de minitubérculossemilla de papa
La producción de microtubérculos, representa
un gran potencial para los programas de semilla de
papa, por su fácil manipulación debido a su tamaño
y a su calidad sanitaria.
Para evaluar la factibilidad de utilizar
microtubérculos en los programas de reproducción
de minitubérculos-semilla de papa, se utilizaron
microtubérculos de la variedad Mondial en dos
tamaños: grande (mayores de 5 mm de diámetro) y
mediano (< de 5 mm), estableciéndose en un solo
arreglo topológico (10 x 10 cm = 100
microtubérculos/m2).
Los resultados mostraron que es factible
producir minitubérculos-semilla de papa, por
medio del establecimiento de los microtubérculos
en el invernadero.
El potencial de producción para la variedad
Mondial encontrado fue de 120 minitubérculos/m2
de superficie, de la categoría media, para ambos
tamaños de microtubérculos (Figura 12).
160
Número de
minitubérculos/m2
140
120
Además, los microtubérculos pueden ser usados
como semillas para la conservación del Banco de
Germoplasma (Borda et al. 2001), sólo que en este
caso, se estarían utilizando los minitubérculos de
las clasificaciones chica y canicas libres de
patógenos para iniciar el programa de producción
de semilla prebásica bajo condiciones de
invernadero.
Proceso de certificación de tubérculossemilla básica en campo
El proceso de certificación de semilla depende de
la producción en las etapas de laboratorio e
invernadero.
Del volumen total de minitubérculos producidos
como semilla prebásica durante un ciclo de
producción en invernadero, sólo el 40% es
considerado como semilla prebásica útil y puede
establecerse en campo para producir semilla básica
el ciclo siguiente.
100
80
60
40
20
0
Grande
Media
Chico1
Chico 2
Canicas
Categorías
Mondial mediano
Los minitubérculos, considerados como semilla
prebásica útil, se incluyen básicamente en dos
categorías diamétricas (minis y minis comercial),
que registran un diámetro superior a 2.5 cm. La
semilla prebásica de las categorías inferiores puede
seguirse incrementando en invernadero cuidando
su calidad fitosanitaria.
Mondial grande
Figura 12. Producción de minitubérculos/m2, mediante la siembra directa de
microtubérculos. Invernadero Campo Experimental Saltillo.
40
41
Requerimientos de semilla certificada por
hectárea
Se requieren aproximadamente 40,000 unidades
de semilla certificada por hectárea.
Este volumen se genera considerando cuatro
ciclos de producción en campo, en donde la
producción total de cada ciclo tiene que clasificarse
para obtener la materia prima útil que se
establecerá en el ciclo siguiente (Figura 13). Para
esta producción deben seleccionarse lugares fríos y
sin problemas de enfermedades y paratrioza.
SEMILLA
PREBÁSICA
INVERNADERO
SEMILLA
BÁSICA
CAMPO
(Ciclo 1)
SEMILLA
REGISTRADA
(0)
(Ciclo 2)
SEMILLA
REGISTRADA
(II)
(Ciclo 5)
SEMILLA
REGISTRADA
(II)
(Ciclo 4)
SEMILLA
REGISTRADA
(I)
(Ciclo 3)
Por su tamaño y peso, las categorías de
minitubérculos medianos y grandes producidos en
invernadero pueden ser utilizados en el programa
de producción de semilla básica, registrada y
certificada en campo.
El lote de minitubérculos-semilla prebásica con
sus diferentes categorías puede ser movilizado si
cumple con la inspección y diagnóstico de plagas
reglamentado y cuenta con el Certificado
Fitosanitario de Movilización.
Estos lotes pueden incrementarse en campo en
lugares de climas fríos sin problemas de
enfermedades, insectos vectores y paratrioza en
donde el cultivo exhibe un mayor potencial
productivo.
Literatura Citada
SEMILLA
CERTIFICADA
(Ciclo 6)
Figura 13. Esquema de certificación de tubérculos-semilla de papa.
Conclusiones
Uno de los factores limitantes de este cultivo es
la renovación de la semilla, por lo que del avance
tecnológico que se tenga en la producción de
minitubérculos-semilla prebásica y tubérculossemilla básica dependerá la calidad de este cultivo.
Esto hace que el esquema de laboratorioinvernadero sea básico para garantizar la calidad
en la producción de minitubérculos-semilla
prebásica de papa, en donde se pueden producir
minitubérculos de cinco categorías.
42
Allen, R.G.; L. Pereira S.; D. Raes y M. Smith. 2006.
Evapotranspiración del cultivo. Guías para la
determinación de los requerimientos de agua de
los cultivos. FAO. Cuadernos de Riego y Drenaje
No. 56.Roma, Italia. 322 p.
Beukema, H. P. and D.E. Van der Zaag. 1990.
Introduction to potato production. Pudoc,
Wageningen, The Netherlands. 208 p.
Borda, C.C.; J. Toledo; A. Golmirzaie and W. Roca. 2001.
Efecto de inductores de tuberización y
fotoperíodo sobre la microtuberización de
Solanum tuberosum L. in vitro. Centro
Internacional de la Papa (CIP). Lima, Perú.
http://redepapa.org/produccionred3.html (15 de
marzo de 2007).
CONPAPA, 2009. Panorama de la producción en
México.
http://www.conpapa.org.mx/panoramexico.html
(17 marzo de 2009)
43
Diario Oficial de la Federación (DOF), 2003. Norma
Oficial
Mexicana
NOM-041-FITO-2002,
Requisitos y especificaciones fitosanitarios para
la
producción.
SAGARPA.
México.
http://vlex.com.mx/vid/fitosanitariospropagativo-asexual-papa-28046240 (7 mayo de
2008).
Debergh, P. 1991. Acclimatization techniques of plants
from in vitro. Acta Horticulturae 289:291-300.
Escalante Z., B. 1989. Cultivo in vitro de papa. Principios
y metodología. Erradicación de patógenos y
micropropagación clonal. 1ª Ed. Edit. El Rosario.
Cajamarca, Perú. 107 p.
Flores O., A. y L. E. Flores J. 2008. Enfermedades
fungosas de la papa. XII Congreso Nacional de
Papa. Los Mochis Sinaloa México. 9-25
Hernández C., V. 2008. Producción de papa Cultivo que
crece
a
la
sombra
del
TLC.
http://empresarios.mundoejecutivo.com.mx/artic
ulos.php (8 de julio de 2008).
Hooker W., J. 1981. Compendio de enfermedades de la
papa. Centro Internacional de la Papa. Lima,
Perú. 166 p.
Huamán, Z. 1986. Botánica Sistemática y Morfología de
la papa. 2a ed., Centro Internacional de la Papa
(CIP), Lima, Perú. 22 p.
Jones E., D. 1988. A current assessment of in vitro culture
and other rapid multiplication methods in North
America and Europe. Am. Potato J. 65:209-220.
Kartha
K., K. 1981. Meristem culture and
cryopreservation; methods and application. In
plant tissue culture. Methods and application in
agriculture. pp. 181-211.
Khan P., S., S.V. Sanjay and S. Vibha D. 1999. Tissue
culture technology for large-scale production of
microtubers of chipping potato. Potato, global
research & development. Proceedings of the
global conference on potato, New Delhi, India.
Vol. 1. 16-20
44
Khurana, S.M.P., J. Minhas S. y S. Pandey K., 2003. The
Potato: production and utilization in subtropics.
Mehta Publishers, New Delhi, India, 445 p.
López-Delgado, H. y Q. Zavala T. 1988. I Curso de
multiplicación acelerada de papa in vitro e
invernadero.
PRECODEPA.
Campo
Experimental Metepec. Toluca Edo México. 21 p.
López-Delgado H.; Q. Zavala T. y H. Cadena M. 1985.
Obtención y conservación de genotipos de papa
libres de virus. Folleto misceláneo No. 3. INIFAPSARH. Campo Experimental Metepec. Toluca
Edo México. 16 p.
Marinus, J. 1983. Some aspects of the in vitro
multiplication of potatoes. Potato Research 26:
85-86.
Morell G., M. and C. Martin. 1952. Guerison de dahlias
atteints d’une maladie virus. Comptes rendus
hebdomaire des seances de I‘ Academie des
Sciences, Paris. 235: 1324-1325.
Murashige T. and F. Skoog. 1962. A revised medium for
rapid growth and bio assays with tobacco tissue
cultures. Physiologia Plantarum 15: 473-497.
Nagib, A., S. A.; Hosain, M.F.; Alam, M.M.; Hosaim, R.
Islam and R.S. Sultana. 2003. Virus free potato
tuber seed production through meristem culture
in Tropical Asia. Asian Journal of Plant Sciences
2:616-622.
Paredes M.; J. Benítez; D. Horna; J. Navarrete; F.
Montes de Oca y J. Velásquez. 2004. Producción
de semilla prebásica de papa en la Estación
Experimental Santa Catalina – INIAP, Ecuador.
http://www.uach.cl/alap2004/04Resumenes%20de
%20Paneles%2088_134.pdf (15 de marzo de 2007).
Pierik R., L. M. 1987.In vitro culture of higher plants.
Martinus
Nijhoff
Publishers.
Dordrecht.
Netherlands. 344 p.
Plaisted R., L. 1971. A project to duplicate 400 years of
potato evolution. New York´s food and life
sciences 4: 24-26.
45
Ranalli P.; F. Bassi; A. Ruaro; P. del Re; M. Di. Candilo
and A. Mandolino. 1994. Microtuber and
minituber production and field performance
compared with normal tubers. Potato Res. 37:
383-391.
Roca W., M.; N.O. Espinoza; M.R. Roca and J.E. Bryan.
1978. A tissue culture method for the rapid
propagation of potatoes. Am. Potato J. 55: 691701.
Salazar L., F. 1983. Detección con ELISA de virus de
papa. Serie II: Métodos de Detección de Virus y
Viroides. Guía: II (3) Centro Internacional de la
Papa (CIP). Lima Perú. 12 p.
Centros Nacionales de Investigación Disciplinaria,
Centros de Investigación Regional y
Campos Experimentales
Salazar L., F. 1998. Fitoplasmas: Un Factor Negativo
para la Producción de Semilla de Papa en
Latinoamérica. "I Foro Electrónico de Plagas y
Enfermedades de Importancia en el Cultivo de
Papa en Latinoamérica". Centro Internacional de
la Papa (CIP). Apartado 1558. Lima, Perú.
http://www.condesan.org/e-foros/infopapa/papa
27.htm. (15 de marzo de 2007).
Struik P., C. and S. G. Wiersema. 1999. Seed Potato
Technology. The Netherlands. pp. 175-216.
Toledo J.; N. Espinoza and A. Golmirzaie.1998. Tissue
Culture. Management of in vitro plantlets in
potato seed production. International Potato
Center (CIP). Training Manual. Lima, Peru. 46p.
Wang P. and C. Hu. 1982. In vitro mass tuberization and
virus-free seed-potato production in Taiwan. Am.
Potato J. 59: 33–37.
Sede de Centro de Investigación Regional
Centro Nacional de Investigación Disciplinaria
Campo Experimental
46
Edición
Dr. Marco Antonio Arellano García
M. C. Eulalia Edith Villavicencio Gutiérrez
Revisión Técnica
Ph. D. Jorge Elizondo Barrón
Dr. Oswaldo A. Rubio Covarrubias
Dr. Guillermo Fuentes Dávila
Comité Editorial del Campo Experimental Saltillo
Presidente
M. C. Francisco J. Contreras de la Reé
Secretario
M. C. Gustavo J. Lara Guajardo
Vocales
M. C. Oscar U. Martínez Burciaga
M. C: Luis Mario Torres Espinosa
M. C. Pedro Hernández Rojas
M. C. Eulalia Edith Villavicencio Gutiérrez
Fotografía
Dr. Marco Antonio Arellano García
M. C. Eulalia Edith Villavicencio Gutiérrez
Código INIFAP
MX-0-310702-37-03-15-09-41
Esta publicación se terminó de imprimir en el mes de febrero del 2010
en los talleres de:
IMPRENTA SANCHEZ
Nueva España 514
Fraccionamiento Urdiñola
CP 25020, Saltillo Coah.
Tel. /fax (844) 4-14-61-51
Su tiraje consta de 250 ejemplares
Campo Experimental Saltillo
M. C. Gustavo J. Lara Guajardo
Director de Coordinación y Vinculación en Coahuila
Isaac Sánchez Valdez
Jefe de Operación
María de Lourdes Briones Peña
Jefe Administrativo
Personal investigador
Carlos Alejandro Berlanga Reyes
Antonio Cano Pineda
David Castillo Quiroz
Francisco J. Contreras de la Ree
Eutimio de Jesús Cuellar Villarreal
Juan M. Covarrubias Ramírez
Sergio J. García Garza
Hernández Rojas Pedro
Miriam P. Luevanos Escareño
Oscar Mares Arreola
Oscar Ulises Martínez Burciaga
Emigdio Morales Olais
Victor Manuel Parga Torres
Carlos Ríos Quiroz
David Sánchez Aspeytia
Isaac Sánchez Valdez
Luis Mario Torres Espinoza
José Antonio Vázquez Ramos
Eulalia Edith Villavicencio Gutiérrez
María del Rosario Zúñiga Estrada
Red de Investigación
e Innovación
Manejo Forestal Sustentable
Manejo Forestal Sustentable
Manejo Forestal Sustentable
Agua y Suelo
Pastizales y Recursos Forrajeros
Agua y Suelo
Hortalizas
Pastizales y Recursos Forrajeros
Transferencia de Tecnología
Manejo Forestal Sustentable
Modelaje
Frutales Caducifolios
Hortalizas
Ovinos y Caprinos
Hortalizas
Frijol y otras Leguminosas
Manejo Forestal Sustentable
Frutales Caducifolios
Manejo Forestal Sustentable
Agua y Suelo