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MINISTERIO DE
ECONOMÍA Y
COMPETITIVIDAD
Curso de técnicas de
diagnóstico de Peste
porcina africana (PPA)
Organizado por el
Laboratorio de referencia de la Unión
Europea (UE) y de la FAO de PPA
Centro de Investigación en Sanidad Animal
CISA-INIA, Valdeolmos, Madrid, España
Personas de contacto:
Dr. Marisa Arias: [email protected]
Dr. Carmina Gallardo: [email protected]
Lugar de realización:
Laboratorio de referencia de la UE y de la FAO de PPA
Centro de Investigación en Sanidad Animal CISA-INIA
Ctra. Algete a El Casar, s.n.
Valdeolmos, Madrid, España
Tlf; +34916202300
Fax; +34916202247
Objetivo del curso :
Transferencia tecnológica de las técnicas de diagnóstico de la PPA prescritas
internacionalmente por la OIE y por la UE.
Email: [email protected]
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MINISTERIO DE
ECONOMÍA Y
COMPETITIVIDAD
Día primero
Horario: 9.15 -16.15
Apertura del curso: Dr. Marisa Arias, Directora Técnica y coordinadora del Laboratorio de Referencia de
PPA de la UE y de la FAO.
Conferencias:
• Peste Porcina Africana (PPA): revisión de la situación actual de la enfermedad
• Técnicas de diagnóstico de Peste Porcina Africana (PPA).
Instrucciones de Acceso al Laboratorio NSB3: D. Gonzalo Pascual. Jefe de Servicio de Seguridad
Biológica CISA-INIA
PRÁCTICAS DE LABORATORIO, SIMULACRO DE DIAGNÓSTICO DE PPA→ Para la
ejecución del curso se proporcionará a los participantes un panel de muestras ciegas para que
realicen el diagnóstico serológico y virológico de la PPA.
Diagnóstico virológico:
•
•
•
Práctica I: Detección del genoma viral de PPA mediante la técnica de PCR convencional →
extracción del ADN y PCR.
Práctica II: Diagnóstico diferencial de Peste porcina clásica (PPC) y PPA mediante la técnica de PCR
múltiplex → extracción del ácido nucléico y PCR
Práctica III: Aislamiento del virus de la PPA e identificación mediante la técnica de la hemoadsorción
(I) → Obtención de cultivo primario de leucocitos porcinos de sangre periférica de cerdo donante.
Lugar de realización: CISA-INIA, Laboratorio NSB3.
Día segundo
Horario: 9.15 -16.15
PRÁCTICAS DE LABORATORIO, SIMULACRO DE DIAGNÓSTICO DE PPA.
Diagnóstico virológico:
•
•
•
Práctica IV: Diagnóstico diferencial de PPC y PPA mediante la técnica de PCR múltiplex y
convencional → métodos electroforéticos/análisis de resultados.
Práctica V: Detección del genoma viral de PPA mediante la técnica de PCR en tiempo real → PCR
/análisis de resultados.
Práctica VI: Aislamiento del virus de la PPA e identificación mediante la técnica de la hemoadsorción
(II) → inoculación de las muestras
Lugar de realización: CISA-INIA, Laboratorio NSB3.
Email: [email protected]
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MINISTERIO DE
ECONOMÍA Y
COMPETITIVIDAD
Día tercero
Horario: 9.15 -16.15
PRÁCTICAS DE LABORATORIO, SIMULACRO DE DIAGNÓSTICO DE PPA
Diagnóstico virológico:
•
Práctica VII: Detección del antígeno viral de PPA mediante la técnica del ELISA de antígeno →
realización del ELISA comercial de INGENASA (INGENASA PPA DAS K2) /análisis de los resultados.
Diagnóstico serológico:
•
•
Práctica I: Detección de anticuerpos frente al VPPA mediante la técnica de ELISA indirecto (OIEELISA) → realización de la técnica/análisis de los resultados.
Práctica II: Detección de anticuerpos frente al VPPA mediante la técnica de ELISA de bloqueo →
realización del ELISA comercial de INGENASA (INGEZIM PPA COMPAC K3) /análisis de los resultados.
Lugar de realización: CISA-INIA, Laboratorio NSB3.
Día cuarto
Horario: 9.15 -16.15
PRÁCTICAS DE LABORATORIO, SIMULACRO DE DIAGNÓSTICO DE PPA
Diagnóstico serológico, técnicas de confirmación.
•
•
Práctica III: Detección de anticuerpos frente al VPPA mediante la técnica de Immunoblotting
(OIE_IB)→ realización de la técnica/análisis de los resultados.
Práctica IV: Detección de anticuerpos frente al VPPA mediante la técnica de inmunoperoxidasa
indirecta (IPT) → realización de la técnica/análisis de los resultados.
Lugar de realización: CISA-INIA, Laboratorio NSB3.
Día quinto
Horario: 9.15 -14.00
PRÁCTICAS DE LABORATORIO, SIMULACRO DE DIAGNÓSTICO DE PPA
Diagnóstico virológico:
•
Práctica VII: Aislamiento del virus de la PPA e identificación mediante la técnica de la
hemoadsorción (III) → lectura de los resultados.
Clausura del curso: Presentación de los resultados obtenidos/Conclusiones y
recomendaciones.
Email: [email protected]
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